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數(shù)字PCR培訓(xùn)考試試題單項(xiàng)選擇題LPCR開(kāi)展有三個(gè)階段,第三階段是()A.相對(duì)定量B.定性檢測(cè)C.絕對(duì)定量(正確答案)2.根據(jù)()以及陽(yáng)性微滴的比例,分析軟件可計(jì)算給出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù)。A.笛卡兒定理B.泊松分布原理(正確答案)C.卡爾丹公式D.海倫公式.對(duì)于數(shù)字PCR技術(shù),當(dāng)檢測(cè)到的有效液滴數(shù)占生成液滴數(shù)的比例應(yīng)至少大于—時(shí),定量結(jié)果是準(zhǔn)確可靠的。()A20%B50%C72%(正確答案)D99%.數(shù)字PCR和熒光定量PCR(qPCR)的不同點(diǎn)的描述,錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A.兩者有不同的熒光化學(xué)原理和反響條件(正確答案)B.dPCR將核酸分子隨機(jī)分配進(jìn)大量獨(dú)立的反響體系C.dPCR直接給出拷貝數(shù)濃度,qPCR間接給出Cq值D.dPCR是終點(diǎn)熒光檢測(cè),qPCR是實(shí)時(shí)熒光檢測(cè).數(shù)字PCR和熒光定量PCR(qPCR)定量方式的比擬,錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()dPCR是直接定量,qPCR是間接定量dPCR不依賴外部參照和標(biāo)準(zhǔn)品dPCR的動(dòng)態(tài)范圍大于qPCR(正確答案)qPCR的動(dòng)態(tài)范圍大于dPCR.關(guān)于數(shù)字PCR的數(shù)學(xué)計(jì)算,說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A.每個(gè)微滴中靶標(biāo)序列的平均拷貝數(shù)CPD=-ln(l-P).上述公式中,P為陰性微滴的比例(正確答案)C.反響體系的拷貝數(shù)濃度(copy/PL)C=CPD/VD.上述公式的V為微滴的平均體積7.使用新羿生物樣本制備儀,30微升體系可制備多少液滴?()A.1萬(wàn)B.2萬(wàn)C.3萬(wàn)D.不少于5萬(wàn)(正確答案)8.關(guān)于新羿TDT數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)樣本的準(zhǔn)確定量,以下說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A.推薦靶標(biāo)核酸分子在微滴中的平均含量小于5個(gè)拷貝。B.應(yīng)保證每個(gè)微滴里不含或者只含有一個(gè)靶標(biāo)核酸分子。(正確答案)C.軟件根據(jù)陰性微滴的比例和泊松分布概率密度函數(shù)準(zhǔn)確計(jì)算靶分子的濃度。D.為了提高極低拷貝條件下檢測(cè)準(zhǔn)確性和靈敏度,可以增加樣品的重復(fù)檢測(cè)次數(shù),利用軟件功能進(jìn)行合并分析。9.關(guān)于新羿生物探針?lè)〝?shù)字PCR微液滴生成,以下說(shuō)法不正確的有()A.先準(zhǔn)備反響體系,其中含有引物、探針、樣品及反響預(yù)混液,然后將30111上述反響體系加入微液滴生成芯片對(duì)應(yīng)的孔內(nèi)。B.反響體系制備完成,需放置在冰上,最好在1小時(shí)內(nèi)完成液滴生成。C.DropMaker樣本制備儀可在3分鐘內(nèi)將8個(gè)樣品分別制備成50000個(gè)微滴。D.如果制備樣品數(shù)缺乏8個(gè),必須用水或緩沖液補(bǔ)足至8個(gè)。(正確答案)10.關(guān)于新羿生物TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)的以下描述中,不正確的選項(xiàng)是()A.不需要配制標(biāo)準(zhǔn)品,不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線B.不依賴Cq值轉(zhuǎn)換,直接定量C.檢測(cè)靈敏度低至1拷貝靶標(biāo)核酸分子,動(dòng)態(tài)范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)D.樣本必須為DNA,不能直接對(duì)RNA分子定量(正確答案)11.關(guān)于數(shù)字PCR技術(shù),以下說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A.dPCR以油包水微滴作為微PCR反響器B.油包水微滴之間彼此是獨(dú)立的C.每個(gè)微滴要么不含靶標(biāo)序列,要么僅含有1個(gè)拷貝的靶標(biāo)序列(正確答案)D.油包水微滴體積的均一性對(duì)于定量結(jié)果準(zhǔn)確性很重要.關(guān)于新羿數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)PCR擴(kuò)增儀的要求,下面說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是A.微滴PCR擴(kuò)增對(duì)PCR儀無(wú)特殊要求B.推薦使用帶有溫度梯度的PCR儀,便于反響條件優(yōu)化C.基本上與普通PCR擴(kuò)增程序無(wú)異D.升降溫速度在5℃/s為宜(正確答案).下面哪種檢測(cè)屬于三級(jí)出生缺陷防治檢測(cè):()A.新生兒耳聾基因突變篩查(正確答案)B.成年人婚前遺傳病篩查C.游離DNA檢測(cè)胎兒耳聾基因突變D.孕前隱性遺傳病攜帶者篩查14.以下哪一項(xiàng)不是微液滴數(shù)字PCR的技術(shù)優(yōu)勢(shì)()A.高靈敏度、高特異性B.真正意義上的絕對(duì)定量,可統(tǒng)計(jì)突變率C.可以發(fā)現(xiàn)未知突變(正確答案)D.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析便捷多項(xiàng)選擇題15.假陽(yáng)性(FalsePositive)的來(lái)源包括()A.樣本間交叉污染、氣溶膠(正確答案)B.非特異性擴(kuò)增(正確答案)C.生化反響的隨機(jī)性(正確答案)D.樣本的來(lái)源及類型.對(duì)于EGFRT790M的液體活檢,采血需要注意()A.采血至少8ml(正確答案)B.顛倒混勻充分,防止劇烈震蕩血樣(正確答案)C.嚴(yán)格血液質(zhì)控,嚴(yán)格防止溶血(正確答案)D.全血4℃儲(chǔ)存,保存期不超過(guò)5天E.及時(shí)對(duì)全血進(jìn)行血漿別離或采用streck管保存(正確答案).目前的研究發(fā)現(xiàn)ctDNA陽(yáng)性檢出率與哪些因素有關(guān)()A.癌癥分期(正確答案)B.手術(shù)后檢測(cè)時(shí)間(正確答案)C.用藥(靶向/放化療)干預(yù)(正確答案)D.采血量、保存和提取方法(正確答案)E.一天內(nèi)的采血時(shí)間點(diǎn)(早、中、晚),年齡、性別(正確答案).確保液體活檢可靠性的關(guān)鍵是嚴(yán)格的質(zhì)控,必須做到()A.使用專用的采血管(正確答案)B.使用專用的cfDNA提取試劑盒(正確答案)C.使用穩(wěn)定可靠的dPCR檢測(cè)試劑盒(正確答案)D.嚴(yán)格設(shè)置對(duì)照,包括陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、NTC對(duì)照(正確答案)19.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)有效防止交叉污染的措施有()A.微滴一旦生成,核酸分子就穩(wěn)定包裹在每個(gè)微滴中,外界的核酸分子無(wú)法進(jìn)入微滴,而微滴中的核酸分子也不能逃逸到外界。(正確答案)B.微液滴生成芯片和微液滴檢測(cè)芯片上8個(gè)通道彼此獨(dú)立不交叉。(正確答案)C.微液滴在8聯(lián)排管中生成加蓋密封墊之后,無(wú)需手工移液,PCR擴(kuò)增、微液滴檢測(cè)均無(wú)開(kāi)蓋操作,全程封閉。(正確答案)D.微液滴檢測(cè)后進(jìn)入微液滴檢測(cè)芯片廢液池,不進(jìn)入生物芯片分析儀,與其他批次樣本無(wú)交叉污染可能性。(正確答案)20.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)相對(duì)于微孔芯片式數(shù)字PCR的優(yōu)勢(shì)在于()A.運(yùn)行本錢(qián)低(正確答案)B.能實(shí)現(xiàn)高通量,自動(dòng)化(正確答案)C.可采用普通96孔板PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增(正確答案)D.提高檢測(cè)靈敏度的潛力更大(正確答案)21.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)運(yùn)行使用所需消耗品包括()A.微液滴生成芯片、微液滴檢測(cè)芯片及相應(yīng)密封墊(正確答案)B.SuperMix/MasterMix預(yù)混液或一步法RTPCR預(yù)混液(正確答案)C.微液滴生成油和微液滴檢測(cè)油(正確答案)8聯(lián)排管、8聯(lián)排管蓋(正確答案)96孔PCR板和鋁膜22.對(duì)cfDNA樣品進(jìn)行分子檢測(cè)的挑戰(zhàn)與難點(diǎn)主要集中在()A.可擴(kuò)增的核酸片段含量低(正確答案)B.含有各種PCR擴(kuò)增的抑制劑(正確答案)C.血樣的保存及純化(正確答案)D.核酸分子的高度片段化(正確答案).腫瘤領(lǐng)域是目前數(shù)字PCR主要的應(yīng)用熱點(diǎn)之一,數(shù)字PCR可檢測(cè)的腫瘤分子標(biāo)志物包括()A.堿基突變(正確答案)缺失或拷貝數(shù)變異(CNV)(正確答案)C.microRNA/lncRNA(正確答案)D.基因融合/甲基化程度(正確答案)24.對(duì)于病毒的檢測(cè),數(shù)字PCR的優(yōu)勢(shì)包括()A.無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品即可絕對(duì)定量(正確答案)B.可實(shí)現(xiàn)病毒載量的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)(正確答案)C.對(duì)于耐藥突變毒株檢測(cè)靈敏度更高(正確答案)D.適合檢測(cè)序列變異性大的病毒25.液體活檢(LiquidBiopsy),對(duì)于癌癥病人的個(gè)性化醫(yī)療過(guò)程的多個(gè)環(huán)節(jié)具有重要意義,包括()A.早期診斷(正確答案)B.轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)或進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估(正確答案)C.療效實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)(正確答案)D.用藥靶點(diǎn)和耐藥機(jī)制的鑒定(正確答案)E.幫助探明腫瘤在病人中的轉(zhuǎn)移過(guò)程(正確答案)26.數(shù)字PCR不依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)絕對(duì)定量特點(diǎn),在病原微生物檢測(cè)的意義在于()A.用于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)定,具有計(jì)量學(xué)意義(正確答案)B.缺乏參考物質(zhì)時(shí),對(duì)病原微生物的定量檢測(cè)(正確答案)C.提供客觀、量化的可操作性強(qiáng)的判斷閾值(正確答案)D.可在不同實(shí)驗(yàn)室之間直接比擬定量結(jié)果(正確答案)27.數(shù)字PCR與二代測(cè)序(NGS)比擬,以下說(shuō)法正確的選項(xiàng)是()A.數(shù)字PCR(dPCR)可絕對(duì)定量,靈敏度更高、本錢(qián)更低(正確答案)B.數(shù)字PCR(dPCR)數(shù)據(jù)無(wú)需復(fù)雜的生物信息學(xué)分析(正確答案)C.數(shù)字PCR(dPCR)無(wú)需建庫(kù),可防止測(cè)序過(guò)程中文庫(kù)構(gòu)建中引入的偏差(正確答案)D.在腫瘤的精準(zhǔn)醫(yī)療實(shí)踐中,dPCR與NGS是很好的互補(bǔ)平臺(tái)(正確答案)28.數(shù)字PCR在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域涉及的應(yīng)用包括()A.腫瘤分子標(biāo)志物的定量檢測(cè)(正確答案)B.遺傳疾病的檢測(cè)(正確答案)C.病原微生物的檢測(cè)(正確答案)D.器官移植的早期排異風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)(正確答案).腫瘤的液態(tài)活檢對(duì)于個(gè)性化用藥的意義主要在于()A.可實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)條件下的檢測(cè)(正確答案)B.一定程度上解決組織活檢中存在的異質(zhì)性問(wèn)題(正確答案)C.可實(shí)現(xiàn)腫瘤的重復(fù)檢測(cè),為療效評(píng)估和復(fù)發(fā)進(jìn)展預(yù)測(cè)提供信息(正確答案)D.微小殘留病的監(jiān)測(cè)(正確答案).數(shù)字PCR在PCR終點(diǎn)檢測(cè)熒光信號(hào),與qPCR相比具有如下優(yōu)勢(shì)()A.對(duì)PCR擴(kuò)增效率變異敏感度相對(duì)降低(正確答案)B.對(duì)PCR抑制劑的耐受度相對(duì)提高(正確答案)C.不再需要標(biāo)準(zhǔn)品(正確答案)D.不易受干擾,重復(fù)性更好(正確答案).目前可在數(shù)字PCR平臺(tái)上開(kāi)展的液態(tài)活檢樣品包括()A.血漿(正確答案)B.口腔拭子(正確答案)C.腦脊液(正確答案)D.胸水(正確答案).新羿生物TD-1數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)和qPCR測(cè)試實(shí)驗(yàn)的無(wú)縫對(duì)接,以下說(shuō)法正確的選項(xiàng)是()dPCR測(cè)試實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)原那么可比照qPCR,但是更為嚴(yán)格和復(fù)雜TagMan、MolecularBeacon等探針?lè)椒ňm用于dPCR(正確答案)C.新羿生物TD-1數(shù)字PCR兼容EvaGreen染料法(正確答案).數(shù)字PCR的操作流程包括()A.微液滴生成(正確答案)微液滴擴(kuò)增(正確答案)C.微液滴檢測(cè)(正確答案)D.數(shù)據(jù)分析(正確答案).數(shù)字PCR用于單基因病無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)的優(yōu)勢(shì):()A:檢測(cè)周期短(正確答案)B:操作流程和數(shù)據(jù)分析簡(jiǎn)易(正確答案)C:更低本錢(qián)檢測(cè)(正確答案)D:可以檢測(cè)未知基因突變.數(shù)字PCR在疾病檢測(cè)種可兼容多種復(fù)雜類型樣本,如血液、尿液、唾液、口腔拭子等,其原因是:()A:檢測(cè)靈敏度高,對(duì)模板量要求低(正確答案)B:通過(guò)微流控芯片分割成不同微液滴,獨(dú)立進(jìn)行反響,抗干擾能力強(qiáng)(正確答案)C:對(duì)PCR抑制劑具有較強(qiáng)耐受性(正確答案)D:定量穩(wěn)定性好(正確答案).目前,微滴式數(shù)字PCR的市場(chǎng)應(yīng)用有哪些?()A.拷貝數(shù)變異分析(正確答案)B.稀有突變檢測(cè)(正確答案)C.基因表達(dá)分析(正確答案)D.測(cè)序文庫(kù)定量(正確答案).新羿生物生物芯片分析儀采用的“準(zhǔn)共焦”光路系統(tǒng)的原理是:()A.激光在“離焦”的狀態(tài)下激發(fā)微液滴,以獲取更強(qiáng)的熒光(正確答案)B.激光在“共焦”的狀態(tài)下激發(fā)微液滴,以獲取更強(qiáng)的熒光C.液滴熒光在“離焦”的狀態(tài)下被采集,以獲得更低的背景噪聲D.液滴熒光在“共焦”的狀態(tài)下被采集,以獲得更低的背景噪聲(正確答案).與熒光成像法相比,“準(zhǔn)共焦”熒光檢測(cè)系統(tǒng)具備哪些特點(diǎn):()A.可采用熒光收集效率更高的物鏡(正確答案)B.具備更高的靈敏度(正確答案)C.具備更高的信噪比(正確答案)D.同一時(shí)刻檢測(cè)液滴數(shù)目更多.相比其他現(xiàn)有方法,新羿生物數(shù)字PCR系統(tǒng)采用的基于分水嶺的液滴熒光自動(dòng)分類算法具備哪些特點(diǎn):OA.可廣泛適應(yīng)各種assay(正確答案)B.分類正確率更高(正確答案)C.

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