藥物分析-第4章-藥物的檢查知識講解

藥物分析-第4章-藥物的檢查改變原料改變工藝新藥研究需檢查可能引入而未規(guī)定的雜質(zhì)雜質(zhì)（forin、impurities）有毒副作用的物質(zhì)無毒副作用影響藥物的穩(wěn)定性和療效無毒副作用不影響藥物的穩(wěn)定性和療效影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源

在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為

A.原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成

B.合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成

C.需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成

D.所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)

E.由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì)

例三、雜質(zhì)的分類

一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)按來源分一般雜質(zhì)：自然界是中分布較廣，容易引入的物質(zhì)。其方法收載在中國藥典的附錄

中。

特殊雜質(zhì)：指某一個或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)。雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標準中。水楊酸CH3COOH+水解一步硫酸臭味例阿司匹林水楊酸信號雜質(zhì)有害雜質(zhì)按危害性分Cl-、SO2-、Fe3+、H+、OH-、H2O…劇毒重金屬、砷鹽…

中國藥典（2015年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項目是

A.硫酸鹽檢查

B.氯化物檢查

C.溶出度檢查

D.重金屬檢查

E.砷鹽檢查

例（一）雜質(zhì)限量

指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示四、藥物的雜質(zhì)限量與檢查法雜質(zhì)量≤＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格雜質(zhì)限量

（二）藥物的雜質(zhì)檢查法

雜質(zhì)檢查法靈敏度對照法比較法

1.對照法需對照物質(zhì)

限量檢查法（LimitTest）

特點：不需知道雜質(zhì)的準確含量。

選擇待檢雜質(zhì)作對照供試品稀釋對照2.靈敏度法

系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下,不得有正反應(yīng)出現(xiàn)不需對照物質(zhì)50mlH2O+5滴HNO3不渾濁純水中Cl-合格

3.比較法

含量測定法：測定雜質(zhì)的絕對含量，如測定吸收度、pH值等。

特點：準確測定雜質(zhì)的量。不需對照物質(zhì)（三）雜質(zhì)限量的計算L=C標×V標/ms×100%

檢查某藥物中的砷鹽，取標準砷溶液2ml（每1ml相當(dāng)于1g的As）制備標準砷斑，砷鹽限量為0.00004％，應(yīng)取供試品的量為

A.0.50gB.5.0gC．0.050gD.2.50gE.0.250g一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則

《藥品檢驗操作標準》規(guī)定：

1.遵循平行操作原則

(1)儀器的配對性：如納氏比色管應(yīng)配對,刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致

(2)對照品與供試品的同步操作第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查

2.正確的取樣及供試品的稱量范圍1g不超過±2%，＞1g不超過±1%3.正確的比色、比濁方法4.檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時應(yīng)對供試管和對照管各復(fù)查二份二、氯化物檢查法（一）原理

對照法

（二）檢查方法

藥典附錄

1.除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。2.另取各藥品項下規(guī)定量的標準氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對照液。3.于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得（三）測定條件

1.標準NaCl溶液10gCl/ml，50ml溶液中含50～80g的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標準NaCl溶液5～8ml。

2.反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

（1）加速AgCl渾濁的形成；（2）產(chǎn)生較好的乳濁；（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。3.試劑：硝酸銀4.供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。6.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。7.平行操作原則（四）干擾及排除

1.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。（1）內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。在對照液中加一定量供試液。（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。

2.不溶于水的有機藥物

（1）加水振搖，過濾，取濾液進行檢查。（2）加熱，放冷，過濾，取濾液進行檢查。（3）溶于有機溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進行檢查。例一.藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（B）A.硫酸B.硝酸C.鹽酸D.醋酸E.磷酸

例2.中國藥典（2015年版）規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時，一般取用標準氯化鈉溶液（10μgCl－/ml）5～8ml的原因是（D）A.使檢查反應(yīng)完全B.藥物中含氯化物的量均在此范圍C.加速反應(yīng)D.所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E.避免干擾

例3.采用硝酸銀試液檢查氯化物時，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)B．消除某些弱酸鹽的干擾C．消除碳酸鹽干擾D．消除磷酸鹽干擾E．避免氧化銀沉淀生成例4.當(dāng)采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應(yīng)該選用的處理方法為（AB）A．內(nèi)消色法B．外消色法C．比色法D．差示比濁法

E．差示可見分光法

例5.下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件（ABC）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分鐘D.用硝酸銀標準溶液做對照E.在白色背景下觀察

三、硫酸鹽檢查法（一）原理

對照法（二）測定條件

1.標準K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg的所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標準K2SO4溶液1～5ml。

2.反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。3.試劑：氯化鋇

4.供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5.比濁方法：同置于黑色背景上自上向下觀察。

若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。（三）干擾及排除例：藥物中硫酸鹽檢查時，所用的標準對照液是（D）A.標準氯化鋇B.標準醋酸鉛溶液C.標準硝酸銀溶液D.標準硫酸鉀溶液

E.以上都不對

四、鐵鹽檢查法1.原理

對照法（一）硫氰酸鹽法

ChP(2005)、USP(24)2.檢查方法

藥典附錄

除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg,用水稀釋使成

35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標準鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項下規(guī)定量的標準鐵溶液,置50ml納氏比色管中,加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得3.測定條件

（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標準鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標準鐵溶液臨用前稀釋而成，標準鐵溶液10gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標準鐵溶液1.0～5.0ml

（2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。（3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進行（4）檢查Fe2+和Fe3+

（5）鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。4.干擾及排除(1)為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。

(2)具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。（二）巰基醋酸法對照法本法靈敏度較高，但試劑較貴例1.中國藥典（2015年版）規(guī)定鐵鹽的檢查方法為（A）A.硫氰酸鹽法B.巰基醋酸法C.普魯士藍法D鄰二氮菲法E.水楊酸顯色法例2.中國藥典（2015年版）規(guī)定，硫氰酸銨法檢查鐵鹽時，加入過硫酸按的目的是（AB）

A.使藥物中鐵鹽都轉(zhuǎn)變?yōu)镕e3+B.防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色

C.使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深

D．防止干擾

E．便于觀察、比較

例3.中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（D）A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不對

五、重金屬檢查法

以鉛為代表中國藥典（2015年版）共收載四法。第一法硫代乙酰胺法第二法熾灼殘渣法第三法硫化鈉法第四法微孔濾膜法（一）第一法硫代乙酰胺法1.原理對照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

2.測定條件

（1）用硝酸鉛配制標準鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標準鉛溶液臨用前稀釋而成，標準硝酸鉛標準溶液10gPb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20g的Pb2+。

（2）本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5。（3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑

(1)供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

3.干擾及排除（2）若供試品中有微量Fe3+存在,

會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫,干擾比色,加入抗壞血酸或鹽酸羥胺(0.5～1.0g)還原Fe3+為Fe2+,可消除干擾（3）若供試品為鐵鹽，

Fe3+在鹽酸中生成物用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查

(4)若藥物本身含有與S2-反應(yīng)的物質(zhì)時可加入掩蔽劑消除干擾。如Sb2+中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Sb2+后，依第三法檢查

（二）第二法熾灼殘渣法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機藥物。1.原理對照法

500～600℃熾灼后的殘渣，加硝酸處理后，依一法檢查。

2.操作方法

含鈉及氟的有機藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）

（三）第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

1.原理

對照法

2.測定條件

（1）NaOH堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉（四）第四法微孔濾膜法

適用于含2～5g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。依一法檢查，結(jié)果微孔濾膜過濾后比較色斑。P66-67例1．重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時溶液控制最佳的pH值是（B）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.5例2．微孔濾膜法是用來檢查（C）A.氯化物B.砷鹽C.重金屬D.硫化物E.氰化物例3.中國藥典(2015年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（BC）

A.硫化氫試液

B.硫代乙酰胺試液

C.硫化鈉試液

D.氰化鉀試液

E.硫氰酸銨試液例4.現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進行重金屬檢查，應(yīng)采用《中國藥典》上收載的重金屬檢查的哪種方法（C）A.一法B.二法C.三法D.四法E.以上都不對六、砷鹽檢查法

（一）古蔡法ChP（2005）1.原理對照法

遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標準砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較2.操作方法P67-68（1）標準砷斑用2ml標準砷溶液制備（2）供試品需經(jīng)有機破壞，則標準砷溶液應(yīng)平行操作3.測定條件

(1)標準砷溶液臨用新配，1gAs/ml。(2)酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。

（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是:還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進行；C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；D.可抑制微量Sb的干擾。（4）醋酸鉛棉花的作用:

吸收硫化物，消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。（5）鋅粒應(yīng)無砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察4.干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，要先行有機破壞后再進行檢查。常用的有機破壞方法：堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查（4）供試品中有強氧化劑加H2SO4先行分解。

（5）本法適用于不含Sb或含Sb量小于

100g的供試品。

（二）Ag-DDC法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法）原理：對照法

２、操作：

砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，進行比較。用有機堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進行。

USP用吡啶,ChP用三乙胺例1.在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過百萬分之十的是（D）A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

例2.在用古蔡法檢查砷鹽時，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（C）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3例3.Ag—DDC法檢查砷鹽的原理為：砷化氫與Ag—DDC吡啶作用，生成的物質(zhì)是（E）A.砷斑B.銻斑C.膠態(tài)砷D.三氧化二砷E.膠態(tài)銀七、干燥失重測定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法：１、恒溫常壓干燥法２、恒溫減壓干燥法３、常溫減壓干燥法（一）常壓恒溫干燥法

１、定義:適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。干燥失重%＝失重/供試品重×100％２、操作:第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進行直至Mn－Mn-1<0.3mg為恒重。３、注意(1)供試品厚度：A.一般<5mm；

B.疏松<10mm；C.大粒結(jié)晶粒度<2mm。(2)干燥溫度：A.一般105；

B.含結(jié)晶水要提高溫度；

C.含水量大且熔點低要先低溫后105℃(3)特殊供試品：膏狀物＋粗砂粒及玻璃棒并均勻攪拌

（二）減壓干燥法（真空干燥）適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。１、測定方法(1)卡爾費休水分滴定法(費休法)：適用于加熱易破壞，不適于氧化劑/還原劑/水反應(yīng)的物質(zhì)。(2)甲苯法:適用顏色較深藥物/氧化劑還原劑/皂類/油類等。(3)甲醛法:不適于(1)(2)用(3)法。八、水分測定法２、費休法(1)原理:非水溶液中氧化還原滴定,標準滴定液即費休液(I2+SO2+吡啶+甲醇)①I2+SO2+H2OSO3+HI②SO3+HI+無水吡啶氫碘酸吡啶+

硫酸酐吡啶(不穩(wěn)定)③硫酸酐吡啶+無水甲醇甲基硫酸氫吡啶(穩(wěn)定)④總反應(yīng)方程式:I2+SO2+3C2H5N+CH3OH+H2O2C2H5N·HI+C2H5N·HSO4CH3

(2)操作①水分標定費休液：干燥具塞玻璃瓶中＋重蒸餾水30mg＋無水甲醇2～5ml＋費休試液滴至終點并用空白校正，得：F=W/(A-B)*(F=4.0為宜，F(xiàn)<3.0不宜再用)

F---滴定度(相當(dāng)水重量/ml費休液)mg/mlW---重蒸餾水重量(mg)A---滴定消耗費休液容積(ml)B---空白消耗費休液容積(ml)②供試液測定：將①中重蒸餾水換上供試品，使終點由黃色至紅棕色/永停滴定法指示終點，得：供試品中水分含量%=(A-B)F/W×100%(3)注意①吡啶和甲醇即是反應(yīng)物又是溶劑②終點指示法可：Ａ.Ｉ2自身作指示劑Ｂ.永停滴定法指示：電流計突然偏轉(zhuǎn)且數(shù)分鐘不退回③費休試劑：要求純度高，含水量<0.1%

其中的I2干燥器中48hr；

SO2用濃H2SO4脫水后再配制④供試品取量：以消耗費休液1～5ml為宜⑤實驗條件：不宜在溫度高的環(huán)境中操作

檢查不含金屬的有機藥物或揮發(fā)性無機藥物中混入的無機雜質(zhì)(金屬氧化物或無機鹽類)。

1.原理樣品炭化/分解后+H2SO4濕潤→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘渣（硫酸灰分）限量一般為0.1%～0.2%

九、熾灼殘渣檢查法2.操作方法3.注意事項

（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘渣限量和稱量誤差決定。（2）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（3）若殘渣需留作重金屬檢查，則500～600℃熾灼至恒重。（4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機物炭化

例1.熾灼殘渣檢查法一般加熱恒重的溫度為（C）A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例2.熾灼殘渣檢查后，將殘渣留作重金屬檢查時，熾灼溫度應(yīng)為（A）A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例3.熾灼殘渣的限量一般為（E）A.1％B.0.5％～1％C.0.4％～0.5％D.0.2％～0.3％E.0.1％～0.2％例4.熾灼殘渣檢查時，炭化后經(jīng)硫酸處理后灰化至完全的稱為（C）A.灰分B.殘渣C.硫酸灰分D.熾灼灰分E.殘余灰分

十、溶液顏色檢查法控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。采用三種方法檢查：

第一法目視比色法即與標準比色液比較的方法，標準比色液的配制

第二法分光光度法單一波長定量第三法色差計法全波長范圍定量

本法是通過色差計直接測定溶液的透視三刺激值，對其顏色進行定量表述和分析的方法。測色儀器一般為光電積分型色差計十三、澄清度檢查法

檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項檢查。1.檢查方法對照法

2.濁度標準液的配制

中國藥典規(guī)定用濁度標準液作為澄清度檢查的標準。反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。操作：1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標準貯備液

濁度標準原液濁度標準液（5個級號）3.判斷：藥典中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5號濁度標準液。4.溶劑：水、酸、堿、有機溶劑*有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用“新沸過的冷水”

定義：

藥物生產(chǎn)和貯存過程中，據(jù)藥物自身性質(zhì)、生產(chǎn)方法、工藝條件可能引入的雜質(zhì)。第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查四、分光光度法：

利用雜質(zhì)與藥物對光選擇吸收差異，通常選藥物無吸收而雜質(zhì)有吸收的波長測Ａ<規(guī)定Ａ值

(一)紫外分光光度法１、藥物無吸收而雜質(zhì)有吸收：λ腎上腺素(藥物)腎上腺酮（雜質(zhì)）310nm無吸收有吸收規(guī)定在310nm處測Ａ<0.05２、藥物與雜質(zhì)在某一波長有重疊λ碘解磷定分解產(chǎn)物294nmＡmax無吸收262nmＡmin有吸收Ａx不含分解產(chǎn)物A294/A262＝Amax/Amin含分解產(chǎn)物A294/A262＝(Amax＋0)/(Amin+Ax)A294/A262≥3.1合格(二)比色法：

供試品＋試劑對照品＋試劑比色ＡAF710-3目視

比色計(三)紅外分光光度法：

常測藥物中無效/低效晶型。遵循朗伯－比爾定律數(shù)學(xué)表達式：A＝kbcA——吸光度；K——比例常數(shù)；B——基態(tài)原子層的厚度；C——蒸汽中基態(tài)原子的濃度?；驹?四)原子吸收分光光度法：

分析方法----標準曲線法

配制一組含有不同濃度被測元素的標準溶液，在與試樣測定完全相同的條件下，按濃度由低到高的順序測定吸光度值。繪制吸光度對濃度的校準曲線。測定試樣的吸光度，在校準曲線上求出被測元素的含量。分析方法Ａ：供試液+標準限量的待測元素

Ｂ：供試液先將Ａ液噴入火焰讀數(shù)a；再將Ｂ液噴入火焰讀數(shù)b。要求b<(a-b)為合格，此法可消除背景對檢測影響。基本操作光源—原子化器—單色器---檢測器—信號處理系統(tǒng)

由光源發(fā)出的光，通過原子化器產(chǎn)生的被測元素的基態(tài)原子層，經(jīng)單色器分光進入檢測器，檢測器將光強度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栕兓⒔?jīng)信號處理系統(tǒng)計算出測量結(jié)果。儀器構(gòu)造

光源作用：提供待測元素的特征波長光。光強應(yīng)足夠大，有良好的穩(wěn)定性，使用壽命長?？招年帢O燈是符合上述要求的理想光源，應(yīng)用最廣空心陰極燈：一個陽極：鎢棒

一個空心圓柱形陰極：待測元素的高純金屬或合金

一個帶有石英窗的玻璃管，管內(nèi)充入低壓惰性氣體

儀器構(gòu)造技術(shù)指標TAS-990原子吸收分光光度計高度的自動化可擴展火焰自動進樣器，石墨爐自動進樣器。先進的橫向加熱石墨爐技術(shù)質(zhì)量流量計控制燃氣流量完善的安全系統(tǒng)

儀器介紹五、色譜法TLCGCHPLC紙色譜吸附、分配、離子交換、排阻差異(一)紙色譜法

通常測極性較大的藥物雜質(zhì)/放射性藥物中雜質(zhì)缺點：擴散時間長、斑點呈擴散狀、展開劑受限等，故應(yīng)用不廣泛。(二)薄層色譜法

測有機藥物中與主藥密切關(guān)系的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等。此法簡便、快捷、靈敏，常定性分析。Rf(三)ＨＰＬＣ：含量分析（含雜質(zhì)檢查）色譜圖中各字母表示的含義：E/mV進空樣氣峰Ｗh/2

h

0tm

tR

t′R=tR-tmＷbtm：死時間tR：保留時間t′R：調(diào)整保留時間h：峰高Wb

：峰寬Wh/2

：半峰寬Agilent1100

高效液相色譜儀儀器構(gòu)造1、高壓輸液泵用于輸送流動相，由于色譜柱很細、為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm）、流動液的擴散系數(shù)遠小于氣體，故液體的流動相高速通過時，液體流動時阻力很大，必須要有很高的柱前壓力。壓力：150～350×105Pa，高壓、高速是高效液相色譜的特點之一。流量穩(wěn)定（影響重現(xiàn)性及分析精度）、流速可調(diào)應(yīng)具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、耐腐蝕等特性外梯度:

利用兩臺高壓輸液泵，將兩種不同極性的溶劑按一定的比例送入梯度混合室，混合后進入色譜柱。內(nèi)梯度:

一臺高壓泵,通過比例調(diào)節(jié)閥,將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。

2、梯度淋洗裝置注射器進樣裝置：微量進樣器刺過裝有彈性隔膜的進樣器，針尖直達固定相上端。缺點：不能承受高壓，須停流進樣；無法取得精確的保留時間高壓定量進樣閥：流路中為高壓力工作狀態(tài)，通常使用耐高壓的六通閥進樣裝置，其結(jié)構(gòu)如圖所示：優(yōu)點：進樣準確，重現(xiàn)性好，適于定量分析3、進樣裝置