醫(yī)院環(huán)境微生物監(jiān)測

環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測范圍空氣物體表面醫(yī)護人員手滅菌后物品使用中的消毒劑及滅菌劑采樣和檢查原則

《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》采樣后應(yīng)盡快對樣品進行相應(yīng)指標的檢測送檢時間不得超過4h若樣品保存于0℃～4℃時送檢時間不得超過24h采樣和檢查原則

《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》不推薦醫(yī)院常規(guī)開展滅菌物品的無菌檢查當流行病學調(diào)查懷疑醫(yī)院感染事件與滅菌物品有關(guān)時，進行相應(yīng)物品的無菌檢查常規(guī)監(jiān)督檢查可不進行致病性微生物檢測涉及疑似醫(yī)院感染暴發(fā)、醫(yī)院感染暴發(fā)調(diào)查或工作中懷疑微生物污染時應(yīng)進行目標微生物的檢測空氣監(jiān)測醫(yī)院空氣環(huán)境分類Ⅰ類環(huán)境：采用空氣潔凈技術(shù)的診療場所，分潔凈手術(shù)部和其他潔凈場所Ⅱ類環(huán)境：非潔凈手術(shù)部（室）；產(chǎn)房；導管室；

血液病區(qū)、燒傷病區(qū)等保護性隔離區(qū)；重癥監(jiān)護病房；新生兒室等Ⅲ類環(huán)境：消毒供應(yīng)中心的檢查包裝滅菌區(qū)和無菌物品存放區(qū)；母嬰同室；

血液透析中心（室）；其他普通住院病區(qū)Ⅳ類環(huán)境：感染性疾病科門診和病區(qū)；

普通門急診及其檢查、

治療（注射、換藥等）室

空氣凈化方法1通風2集中空調(diào)通風系統(tǒng)3空氣潔凈技術(shù)6靜電吸附式空氣消毒器4紫外線消毒5循環(huán)風紫外線空氣消毒器7化學消毒法人員要求：著無菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手衛(wèi)生所帶物品清潔后方可帶入手臂及頭部不可越過打開的培養(yǎng)皿上方行動及放置動作要輕盡量減少對空氣流動狀態(tài)的影響每次采樣人員不得超過2人采樣時間：

消毒后操作前2、未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）消毒、通風換氣后操作前1、采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間（Ⅰ）潔凈系統(tǒng)自凈后操作前3、懷疑空氣與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時空氣消毒效果監(jiān)測浮游菌法采用沉降法：

室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線三點，內(nèi)、外點應(yīng)距墻壁1m處；

室內(nèi)面積＞

30m2，設(shè)四角及中央五點，四角的布點位置應(yīng)距墻壁1m處。未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間的空氣消毒效果監(jiān)測

室內(nèi)面積＞30m2。室內(nèi)面積≤30m2

Ⅰ級手術(shù)室(手術(shù)區(qū)百級，周圍千級）：手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.9m

兩端至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域Ⅱ級手術(shù)室(手術(shù)區(qū)千級，周圍萬級）：手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.6m

兩端至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域Ⅲ級手術(shù)室（手術(shù)區(qū)域萬級，周圍十萬級）：手術(shù)臺四邊至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域Ⅳ級手術(shù)室（三十萬級）：不分手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)周邊區(qū)：除去手術(shù)區(qū)以外的其他區(qū)域手術(shù)區(qū)：手術(shù)臺及其周圍的區(qū)域潔凈手術(shù)室

空氣消毒效果監(jiān)測方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ9cm）放置各采樣點，采樣高度為距地面0.8m-1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平板邊延，暴露規(guī)定時間后蓋上平皿蓋及時送檢?！淌直墼竭^平皿×皿蓋朝上×√空白對照采樣時，必須有2次空白對照第1次對用于檢測的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做對比試驗每一批做一個對照皿第2次是在檢測時，每區(qū)或每室1個對照皿對操作試驗做對照試驗?zāi)M操作過程但培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條打開后又迅速封蓋兩次對照試驗都必須為陰性整個操作過程都必須無菌操作暴露時間采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間暴露30min未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間Ⅱ類環(huán)境暴露15min

Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境暴露5min注意事項消毒前，關(guān)好門、窗；消毒機、空調(diào)停止至少10分鐘方可采樣。在無人走動的情況下，靜止10分鐘進行采樣。放培養(yǎng)皿時從里到外，收培養(yǎng)皿時從外到里。平板收好后，在蓋上注明“里、中、外”及科室，五點布點的標“東、南、西、北、中”等級手術(shù)室名稱空氣潔凈度級別沉降法/浮游菌細菌最大平均濃度手術(shù)區(qū)周邊區(qū)手術(shù)區(qū)周邊區(qū)I特別潔凈手術(shù)室百級千級0.2個/（30min·90皿）0.4個/（30min·90皿）5個/m310個/m3Ⅱ標準潔凈手術(shù)室千級萬級0.75個/（30min·90皿）1.5個/（30min·90皿）25個/m350個/m3Ⅲ一般潔凈手術(shù)室萬級十萬級2個/（30min·90皿）4個/（30min·90皿）75個/m3150個/m3Ⅳ準潔凈手術(shù)室三十萬級5個/（30min·90皿）175個/m3結(jié)果判定:

Ⅰ類環(huán)境潔凈手術(shù)部：要求符合GB50333要求結(jié)果判定:

Ⅱ類環(huán)境細菌菌落總數(shù)標準非潔凈手術(shù)部（室）、產(chǎn)房、新生兒室、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房等空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu/（15min·直徑9cm）結(jié)果判定：

Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境細菌菌落總數(shù)標準兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu/（5min·直徑9cm）。實驗室結(jié)果計算：平均暴露法按平均沒皿的菌落數(shù)報告：

CFU/（皿·暴露時間）物體表面消毒效果監(jiān)測物體表面消毒效果監(jiān)測采樣時間在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時進行采樣。物體表面消毒效果監(jiān)測采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積被采表面＜100cm2，取全部表面被采面積≥100cm2，取100cm2打開試管，燒試管口與橡膠塞用棉簽蘸取中和劑用5cm×5cm的滅菌標準規(guī)格板，放在被檢物體表面在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次5cm橫豎往返各五次剪除、掰斷或燒斷手接觸前部分燒試管口與橡膠塞物體表面的消毒效果監(jiān)測注意事項

1、根據(jù)物品表面是否規(guī)則選用規(guī)格板或直接涂擦的方法進行采樣。2、嚴格注意無菌操作，采樣前采樣者洗手戴帽子口罩。3、強調(diào)采樣前物品表面，已經(jīng)作過消毒處理。4、用棉簽蘸取含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液時，注意不要將手指伸入試管中。（可適當傾斜試管）物體表面的消毒效果監(jiān)測注意事項5、避免采樣時跨越采樣區(qū)域，避免采樣過程中污染。6、一只棉簽連續(xù)采樣4個。7、強調(diào)用充分浸濕棉簽，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返涂擦各5次。8、采樣過程中要轉(zhuǎn)動棉簽。9、剪斷或燒斷手接觸的棉簽。物體表面消毒效果監(jiān)測結(jié)果判定潔凈手術(shù)部、非潔凈手術(shù)部（室）、、產(chǎn)房、新生兒室、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房等；物體表面細菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2

兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等；物體表面細菌菌落總數(shù)≤10cfu/cm2小型物體表面的結(jié)果計算，用cfu/件表示物體表面菌落總數(shù)（

CFU/cm2）實驗室結(jié)果計算：醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測采樣時間

采取手衛(wèi)生后，在接觸患者、進行診療活動前采樣。醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測采樣方法

被檢者五指并攏，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指端到指根再到指端為往返1次，共往返涂擦2次，一只手涂擦面積約30cm2，涂擦過程中同時轉(zhuǎn)動棉拭子將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，及時送檢醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測醫(yī)務(wù)人員手消毒效果監(jiān)測注意事項1、對雙手的指曲面進行采樣。2、強調(diào)用充分浸濕棉簽，在雙手的指曲面從指根到指端往返涂擦2次。采樣過程中要轉(zhuǎn)動棉簽。3、剪斷或燒斷手接觸的棉簽。衛(wèi)生手清毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應(yīng)≤10cfu/㎝2外科手消毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應(yīng)≤5cfu/㎝2

不能檢出致病性微生物手的消毒效果監(jiān)測醫(yī)務(wù)人員手菌落總數(shù)（CFU/cm2）實驗室結(jié)果計算使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測

采樣時間：開瓶后使用中的消毒、滅菌劑。采樣方法：用無菌注射器按無菌操作方法吸取1.0mL被檢消毒液，加入9mL中和劑中混勻使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測監(jiān)測頻率：皮膚黏膜消毒液、消毒劑每季度監(jiān)測一次滅菌劑每月監(jiān)測一次（如戊二醛）結(jié)果判斷：使用中滅菌劑：無菌生長使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml注意事項：采樣后及進送檢實驗室結(jié)果計算：消毒液染菌數(shù)（CFU/mL）

=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)消毒、滅菌后物品監(jiān)測消毒、滅菌后物品監(jiān)測采樣時間在消毒或滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣滅菌后物品監(jiān)測可用破壞性方法取樣的，如一次性輸液（血）器、注射器和注射針等參照《中華人民共和國藥典》《無菌檢查法》進行。對不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，應(yīng)在100級潔凈實驗室，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2；然后將采樣棉拭子進行無菌檢查。牙科手機采樣：應(yīng)在100級潔凈實驗室將每支手機分別置20-25mL采樣液的無菌大試管（內(nèi)徑25mm）中，液面高度為4.5cm，于旋渦混合器上洗滌震蕩30s，取洗脫液進行無菌檢查。清潔用品的消毒效果監(jiān)測（新增）

清潔用品的消毒效果監(jiān)測（新增）采樣時間：消毒后、使用前進行采樣

采樣方法：布巾、地巾等物品可用無菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入5ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水中，及時送檢。每季度一次。結(jié)果判定：未檢出致病菌為消毒合格中和劑在微生物殺滅實驗中，用以消除試驗微生物與消毒劑的混懸液中和微生物表面上殘留的消毒劑，使其失去對微生物的抑制和殺滅作用的試劑本身對菌無影響確能去除殺菌因子生成物對菌無影響臨床采樣用試管內(nèi)相應(yīng)中和劑及含量注：配制各種中和劑除物表、手表監(jiān)測中和劑外，其余均使用磷酸鈉鹽緩沖液（PBS）為基礎(chǔ)溶劑。PBS：吐溫-801g，蛋白胨10g，氯化鈉8.5g，蒸餾水1000ml。消毒劑相應(yīng)中和劑濃度（%）物表、手生理鹽水含氯消毒劑硫代硫酸鈉0.2—1.0復(fù)合含氯消毒劑硫代硫酸鈉+吐溫