人教版選修3專題2第2節(jié)第二課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體(共20張)

1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子是運(yùn)動(dòng)的。那么，如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合，以及動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？

兩個(gè)細(xì)胞正在融合受精作用2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)習(xí)目標(biāo)一：動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）1、概念：2、結(jié)果：形成單核的雜交細(xì)胞3、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性4、誘導(dǎo)方法物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒（最常用）“2個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞”→

“1”、“雜交單核細(xì)胞”思考：為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合，不滅活的話病毒會(huì)感染細(xì)胞，導(dǎo)致疾病。滅活喪失感染性，但保留融合活性。用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程：細(xì)胞核滅活病毒顆粒細(xì)胞核雜交單核細(xì)胞5、過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合（膜、質(zhì)、核融合）1個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB6、意義：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。7、應(yīng)用：強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞）記憶B細(xì)胞學(xué)習(xí)目標(biāo)二：?jiǎn)慰寺】贵wB淋巴細(xì)胞增殖分化受抗原刺激能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞）?？贵w的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法:抗原反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？單克隆抗體（雜交瘤技術(shù)）讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念人們發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。資料分析提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。學(xué)習(xí)目標(biāo)二：?jiǎn)慰寺】贵w一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞√體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖。單克隆抗體制備過(guò)程注射抗原效應(yīng)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體思考：此過(guò)程利用的原理和技術(shù)有哪些？免疫原理細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為_(kāi)_______過(guò)程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過(guò)程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無(wú)限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC1、下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案3、單克隆抗體的應(yīng)用：?jiǎn)慰寺】贵w的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備②應(yīng)用于運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。①作為診斷試劑（最廣泛的用途）：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并特異性結(jié)合優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速“生物導(dǎo)彈”＝單克隆抗體＋藥物

獲得雜種植株用途誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目原理比較植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞、制備單克隆抗體離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇滅活病毒小結(jié):三個(gè)重點(diǎn)過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的新方法

——滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞——雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)——單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的優(yōu)勢(shì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程細(xì)胞核移植過(guò)程P55：1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。1、在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）A、結(jié)果是相同的

B、雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同C、操作過(guò)程中酶的作用相同D、誘導(dǎo)融合的手段相同B2、單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤