GB 15193.4-2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗

CS07.100C53中華人民共和國國家標準GB：15193.4一2003代替GB15193.4一1994鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗Salmonellatyphimurium/mammalsmicrosomalenzymetest(Amestest)2003-09-24發(fā)布2004-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

GB15193.4—2003前本標準全文強制。本標準代替GB15193.4一1994《鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗》本標準與GB15193.4一1994相比主要修改如下：a）在"范圍”中增加了受試物的具體內(nèi)容：食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學(xué)、生物和物理因素，檢驗對象包括食品添加劑(含營養(yǎng)強化劑）、食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設(shè)備、洗滌劑、消毒劑農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等;增加本標準的不適用范圍：b增加對照組的設(shè)置；在“培養(yǎng)基制備及試劑的配制"中將-1.5%瓊脂培養(yǎng)基的配制方法中將“加蒸雷水400mL”改為“加蒸水至400mL"；-0.5mmol/L組氨酸-生物素溶液（誘變試驗用)配制方法中的L-組氨酸加入量由“17.4mg”改為"19.5mg”-頂層培養(yǎng)基制備方法中每100mL頂層瓊脂中"加10mL10.5mol/L”改為“加10mL0.5mmol/L";-將L-組氨酸溶液和0.5mol/LD-生物素溶液（鑒定菌株用)中的"0.5mol/L”改為“0.5mmol/L”,其后面內(nèi)容中的“0.5mol/L生物素”的濃度均改為“0.5mmol/L”。將原標準"7受試物劑量、溶劑和特殊處理”標題改為“試驗設(shè)計及受試物的特殊處理”.并增加對照組設(shè)置內(nèi)容；刪除"Ames試驗報告”的內(nèi)容e）本標準的附錄A為規(guī)范性附錄。自本標準實施之日起,GB15193.4—1994同時廢止。本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標準起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、北京醫(yī)科大學(xué)、浙江醫(yī)科大學(xué)，本標準主要起草人：戴寅、丁蘭、金鐘初、郭世萍本標準于1994年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。

GB15193.4—2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗范圍本標準規(guī)定了Ames試驗的基本技術(shù)要求本標準適用于評價食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學(xué)生物和物理因素的致突變作用，檢驗對象包括食品添加劑（含營養(yǎng)強化劑)食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設(shè)備、洗滌劑、消毒劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等。本標準不適用于具有殺菌和/或抑菌作用的受試物.不適用于具有妨礙哺乳動物細胞復(fù)制系統(tǒng)的受試物2原理鼠傷寒沙門氏菌的突變型(即組氨酸缺陷型)菌株在無組氨酸的培養(yǎng)基上不能生長,在有組氨酸的培養(yǎng)基上可以正常生長。但如在無組氨酸的培養(yǎng)基中有致突變物存在時,則沙門氏菌突變型可回復(fù)突變?yōu)橐吧?表現(xiàn)型),因而在無組氨酸培養(yǎng)基上也能生長，故可根據(jù)菌落形成數(shù)量，檢查受試物是否為致突變物。某些致突變物需要代謝活化后才能使沙門氏菌突變型產(chǎn)生回復(fù)突變,代謝活化系統(tǒng)可以用多氯聯(lián)苯(PCB)誘導(dǎo)的大鼠肝勾漿（S-9)制備的S-9混合液3儀器實驗室常用設(shè)備3.1低溫高速離心機，低溫冰箱（-3.2(－80℃)或液氮罐，潔凈工作臺，恒溫培養(yǎng)箱，恒溫水浴，蒸氣壓力鍋.勺漿器等。4試劑培養(yǎng)基成分或試劑除說明外至少應(yīng)是化學(xué)純.無誘變性。避免重復(fù)高溫處理,選擇適當(dāng)保存溫度和期限，如肉湯保存于4℃不超過六個月，其他詳見下述各培養(yǎng)基及溶液說明。4.1營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基牛肉膏2.58陜陳(或混合蛋白陳)5.0g氯化鈉2.5g磷酸氫二鉀(K.HPO，·3H.O)1.3g蒸餡水500mL加熱溶解,調(diào)pH至7.4.分裝后0.103MPa20min滅菌,普通冰箱保存?zhèn)溆茫４嫫诓怀^半年4.2營養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基用作基因型鑒定