GB 15193.4-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌回復(fù)突變試驗

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB151934—2014

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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌回復(fù)突變試驗

2014-12-24發(fā)布2015-05-01實施

中華人民共和國發(fā)布

國家衛(wèi)生和計劃生育委員會

GB151934—2014

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替鼠傷寒沙門氏菌哺乳動物微粒體酶試驗

GB15193.4—2003《/》。

本標(biāo)準(zhǔn)與相比主要變化如下

GB15193.4—2003,:

標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌回復(fù)突變試驗

———“”;

修改了范圍

———;

增加了術(shù)語和定義

———;

修改了試驗?zāi)康暮驮?/p>

———;

修改了儀器

———;

修改了磷酸鹽貯備液的配制方法

———;

修改了組氨酸生物素溶液的配制方法

———-;

修改了對的要求

———DMSO;

修改了輔酶和葡萄糖磷酸鈉鹽溶液的配制要求

———-Ⅱ-6-;

修改了進(jìn)行菌株基因型鑒定的條件

———;

修改了對增菌培養(yǎng)的要求

———;

修改了受試物的特殊處理

———;

修改了選擇溶媒的要求

———;

修改了劑量設(shè)計的內(nèi)容

———;

修改了試驗菌株

———;

修改了試驗方法中對觀察結(jié)果所需時間的規(guī)定

———;

修改了對照組的設(shè)置

———;

增加了制備的方法生物素缺陷型菌株的鑒定結(jié)果判定的內(nèi)容試驗報告的要求試驗的

———S9、、、、

解釋

;

修改了附錄

———。

Ⅰ

GB151934—2014

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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌回復(fù)突變試驗

1范圍

細(xì)菌回復(fù)突變試驗包括鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗和大腸桿菌細(xì)菌回復(fù)突變試驗本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

。

了鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗的基本技術(shù)要求選擇大腸桿菌進(jìn)行細(xì)菌回復(fù)突變試驗時應(yīng)參閱有關(guān)

,

文獻(xiàn)

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于評價受試物的致突變作用

。

2術(shù)語和定義

21細(xì)菌回復(fù)突變試驗

.

以營養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物檢測基因突變的體外試驗常用的菌株有組氨酸營養(yǎng)缺陷

。

型鼠傷寒沙門氏菌和色氨酸營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌

。

22堿基取代型基因突變

.

多核苷酸鏈上某個堿基為另一個堿基取代引起堿基序列異常

DNA,DNA。

23移碼型基因突變

.

在堿基序列中插入或缺失了一個或幾個除了和的倍數(shù)堿基按三聯(lián)密碼連續(xù)閱讀的

DNA(33),

規(guī)則該部位以后的密碼子組成全部改變指導(dǎo)合成的多肽鏈也全部發(fā)生改變

,,。

3試驗?zāi)康暮驮?/p>

檢測受試物對微生物細(xì)菌的基因突變作用預(yù)測其遺傳毒性和潛在的致癌作用

(),。

細(xì)菌回復(fù)突變試驗利用鼠傷寒沙門氏菌和大腸桿菌來檢測點突變涉及的一個或幾個堿基

,DNA

對的置換插入或缺失見附錄鼠傷寒沙門氏菌和大腸桿菌的試驗菌株分別為組氨酸缺陷突變型和

、A。

色氨酸缺陷突變型在無組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上不能生長在有組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上才能正

,,

常生長致突變物存在時可以回復(fù)突變?yōu)樵B(yǎng)型在無組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上也可以生長故可

。,。

根據(jù)菌落形成數(shù)量來衡量受試物是否為致突變物

。

某些致突變物需要代謝活化后才能使上述細(xì)菌產(chǎn)生回復(fù)突變受試物要同時在有和沒有代謝活化

,

系統(tǒng)的條件下進(jìn)行試驗

。

4儀器和試劑

41儀器

.

實驗室常用設(shè)備低溫高速離心機(jī)低溫冰箱或液氮罐生物安全柜恒溫培