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文檔簡(jiǎn)介
1.試驗(yàn)原理:2.影響植物組織培育的因素專題3植物的組織培育專題4酶的探討與應(yīng)用一、植物組織培育的試驗(yàn)原理、影響因素、過(guò)程植物細(xì)胞的全能性影響植物組織培育的因素1.材料因素的影響不同的植物組織,培育的難易程度差別很大,簡(jiǎn)潔進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物也簡(jiǎn)潔進(jìn)行組織培育。同一種植物材料,材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短也有影響。幼齡、保存時(shí)間短的植物材料簡(jiǎn)潔培育成功。2.養(yǎng)分因素的影響學(xué).科.網(wǎng)zxxk.須要配制適宜的培育基,常用的一種培育基是MS培育基,其主要成分包括:大量元素、微量元素、有機(jī)物以及蔗糖等。3.激素的影響植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。植物激素的濃度、運(yùn)用的先后依次以及用量的比例等,都會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。(1)依據(jù)不同的依次運(yùn)用這兩種激素,會(huì)得到不同的試驗(yàn)結(jié)果有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化細(xì)胞既分裂又分化分化頻率提高(2)兩種用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向
4.pH、溫度、光照等條件的影響不同的植物對(duì)各種條件的要求往往不同。有利于根的分化,抑制芽的形成有利于芽的分化,抑制根的形成促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)3、植物組織培育過(guò)程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素≈生長(zhǎng)素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素>生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素<生長(zhǎng)素再分化不須要光須要光1.植物組織培育是指()A.離體的植物器官、組織或細(xì)胞培育成愈傷組織B.愈傷組織培育成植株學(xué).科.網(wǎng)zxxk.C.離體的植物器官、組織或細(xì)胞培育成完整植物體D.愈傷組織形成并液泡化【答案】C2.利用植物組織培育的方法可快速、大量繁殖植物,在培育過(guò)程中,取該植物的花芽并將其分別培育在含有不同比例的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培育基中,花芽的生長(zhǎng)狀況如下表所示:(1)在此過(guò)程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽是________組。從試驗(yàn)結(jié)果可以看出,能誘導(dǎo)新的花芽形成的條件是________________________。(2)上述試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,在植物組織培育過(guò)程中,誘導(dǎo)芽和根形成的關(guān)鍵是___________________________。在生產(chǎn)實(shí)踐中,欲快速大量獲得此植物的花芽,可選用________組的培育基進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)。培育基中細(xì)胞分裂素含量與生長(zhǎng)素含量之間的比例(或培育基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的濃度比B、C、D細(xì)胞分裂素濃度大于生長(zhǎng)素濃度D二、被子植物花粉的發(fā)育過(guò)程雙核期小孢子四分體時(shí)期單核期小孢子母細(xì)胞花粉母細(xì)胞小孢子減數(shù)分裂有絲分裂花粉管細(xì)胞核生殖細(xì)胞核有分絲裂精子1個(gè)養(yǎng)分細(xì)胞生殖細(xì)胞4個(gè)4個(gè)4個(gè)4個(gè)4個(gè)8個(gè)(小孢子四分體時(shí)期單核居中期單核靠邊期雙核期)三、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導(dǎo)生根體細(xì)胞胚(胚狀體):在組織培育過(guò)程中,某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚特殊相像的結(jié)構(gòu),發(fā)育過(guò)程亦與合子胚類似緣由:培育基中的激素種類及濃度配比試驗(yàn)操作:2、通過(guò)鏡檢來(lái)確定是否處于適宜的發(fā)育期。方法:醋酸洋紅法(將染色體染成紅色)
焙花青-鉻礬法(花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色)。1、從花藥看:從花粉看:
從花蕾看:
花藥(載玻片上)→1%的醋酸洋紅1滴→用鑷柄將花藥搗碎,蓋上蓋玻片→鏡檢(花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色)花藥(在卡諾氏固定液中處理20min)→取出,置于載玻片上→焙花青-鉻礬溶液染色→蓋上蓋玻片→鏡檢(花粉粒的細(xì)胞核被染成藍(lán)黑色)
單核期
月季的初花期
完全未開放的
(一)材料選?。ǘ┎牧系南?、無(wú)菌水沖洗3~5次花藥的外面有花萼、花瓣疼惜,通常處于無(wú)菌狀態(tài)1、花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30秒2、無(wú)菌水清洗3、無(wú)菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4分鐘(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液)(三)接種和培育1消毒后花蕾,要在下除去萼片和花瓣,并立刻將花藥接種到培育基上。3通常每瓶接種花藥,溫度限制在左右,。幼小植株形成后才。2在剝離花藥時(shí),要盡量(否則接種后,簡(jiǎn)潔從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織),同時(shí)還要徹底,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。一般經(jīng)過(guò)20-30天培育后,會(huì)發(fā)覺花藥開裂,長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織剛好轉(zhuǎn)移到分化培育基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株。4進(jìn)一步鑒定和篩選:常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變更無(wú)菌條件不損傷花藥去除花絲7-10個(gè)25℃不須要光照須要光照二、酶的探討與應(yīng)用1.影響果汁產(chǎn)量的物質(zhì)及處理方法(1)影響果汁產(chǎn)量的物質(zhì)①種類:②造成的問(wèn)題:(2)處理方法——常用的酶及其作用特點(diǎn)如下:纖維素、果膠。果肉的出汁率低,耗時(shí)長(zhǎng);果汁渾濁、黏度高,易發(fā)生沉淀。酶解法多聚半乳糖醛酸酶果膠分解酶果膠酯酶C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)催化果膠分解成為可溶性的半乳糖醛酸2.探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果(1)試驗(yàn)原理;酶的催化作用具有專一性,復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多,與單一加酶洗衣粉相比,對(duì)各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)試驗(yàn)變量①自變量:②無(wú)關(guān)變量:③試驗(yàn)步驟學(xué).科.網(wǎng)zxxk.不同種類的加酶洗衣粉其他條件相同且適宜(如溫度、pH等)一)固定化酶的應(yīng)用實(shí)例1).固定化酶的反應(yīng)柱示意圖:將酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到一個(gè)反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著很多小孔的篩板。酶顆粒無(wú)法通過(guò)篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。2).利用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的實(shí)例:高果糖漿的生產(chǎn)須要運(yùn)用葡萄糖異構(gòu)酶,它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖。生產(chǎn)過(guò)程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過(guò)反應(yīng)柱,與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的下端流出。3、酵母細(xì)胞的固定化反應(yīng)柱能連續(xù)運(yùn)用半年,大大降低了生產(chǎn)成本,提高果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。優(yōu)點(diǎn):概念:利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在確定空間的技術(shù)。包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法二)固定化酶技術(shù)和固定化細(xì)胞技術(shù)固定化酶或者固定化細(xì)胞分別適用哪些方法?緣由?適用于固定化酶適用于固定化細(xì)胞包埋法是指將微生物的細(xì)胞勻整包埋在不溶于水的多孔性載體中,常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、聚丙烯酰胺等?;瘜W(xué)結(jié)合法是指將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑的表面三)、固定化酶與固定化細(xì)胞(1)方法:包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。(2)比較一種一系列包埋法化學(xué)結(jié)合、物理吸附法法四)試驗(yàn)操作——酵母細(xì)胞的固定化(1)酵母細(xì)胞的活化:活化是指什么?方法?活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新復(fù)原正常的生活狀態(tài)。四)試驗(yàn)操作——酵母細(xì)胞的固定化(1)酵母細(xì)胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:用蒸餾水溶解,不用自來(lái)水溶解,以防止自來(lái)水中各種離子影響試驗(yàn)結(jié)果。四)試驗(yàn)操作——酵母細(xì)胞的固定化(1)酵母細(xì)胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:
(3)配制海藻酸鈉溶液:是最重要的環(huán)節(jié):假如海藻酸鈉濃度過(guò)高,留意事項(xiàng):加熱時(shí)要用小火,或者間斷加熱(目的?)(濃度要適宜?)假如濃度過(guò)低,將很難形成凝膠珠;形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少,影響試驗(yàn)效果。假如加熱太快,海藻酸鈉會(huì)發(fā)生焦糊。四)試驗(yàn)操作——酵母細(xì)胞的固定化(1)酵母細(xì)胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:(3)配制海藻酸鈉溶液:(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:必需將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫才能與酵母細(xì)胞進(jìn)行混合。為什么?攪拌的目的?海藻酸鈉溶液冷卻至室溫才能與酵母細(xì)胞進(jìn)行混合,以免溫度過(guò)高而殺死酵母菌。攪拌的目的使其混合勻整。四)試驗(yàn)操作——酵母細(xì)胞的固定化(1)酵母細(xì)胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:(3)配制海藻酸鈉溶液:(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:(5)固定化酵母細(xì)胞:CaCl2溶液的作用?所形成的凝膠柱在CaCl2溶液中浸泡的目的?使膠體聚沉。如何推斷固定化酵母細(xì)胞是否成功?---視察凝膠珠的顏色和形態(tài)若凝膠珠顏色過(guò)淺,說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,須要再作嘗試形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)這一階段成功與否呢?怎樣評(píng)價(jià)?視察發(fā)酵的葡萄糖溶液;利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡,同時(shí)會(huì)聞到酒味。3(江蘇高考·T3)下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述,正確的是()A.固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢(shì)明顯B.固定化酶的應(yīng)用中,要限制好pH、溫度和溶解氧C.利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥,需供應(yīng)適宜的養(yǎng)分條件D.利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,糖類的作用只是作為反應(yīng)底物【答案】A4.下列關(guān)于固定化酶技術(shù)的說(shuō)法正確的是()A.固定化酶技術(shù)就是固定反應(yīng)物將酶依附著載體圍繞反應(yīng)旋轉(zhuǎn)的技術(shù)B.固定化酶的優(yōu)勢(shì)在于能催化一系列的酶促反應(yīng)C.固定化酶中的酶無(wú)法重復(fù)利用D.固定化酶是將酶固定在確定空間內(nèi)的技術(shù)【答案】D (1)果膠酶和纖維素酶都是復(fù)合酶,并不特指某一種酶,而是一類酶的總稱。(2)固定化細(xì)胞運(yùn)用的都是活細(xì)胞,在應(yīng)用時(shí)要留意為其供應(yīng)適宜的生存條件。固定化細(xì)胞由于保證了細(xì)胞的完整性,因而酶的環(huán)境變更小,所以對(duì)酶活性影響較小。5、 (2009年高考江蘇卷)下列關(guān)于植物組織培育的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.培育基中添加蔗糖的目的是供應(yīng)養(yǎng)分和調(diào)整滲透壓B.培育基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C.離體器官或組織的細(xì)胞都必需通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織D.同一株綠色開花植物不同部分的細(xì)胞經(jīng)培育獲得的愈傷組織基因相同【答案】D6、下列關(guān)于加酶洗衣粉的說(shuō)法不正確的是()A.干脆將酶制劑添加洗衣粉中制成加酶洗衣粉B.加酶洗衣粉效果的
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