
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關(guān)于痰標(biāo)本痰標(biāo)本中需要檢測的主要致病菌:肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌(可引起原發(fā)性肺炎)、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌(各種器官的化膿性感染,呼吸道的有氣管炎、肺炎膿胸等)、銅綠假單胞菌(條件致病菌,院感主要病原菌之一,在人體抵抗力低下時可引起呼吸道感染等感染,該菌引起的慢性肺部感染占有較大比例)。非病原菌:酵母菌、草綠色鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌。省醫(yī)院對痰標(biāo)本的處理過程:1)每個接收的痰標(biāo)本進行痰涂片(老師稱之為痰質(zhì)控片),鏡下觀察痰標(biāo)本是否合格。合格的痰標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)為WBC>25/LP,EPC<10/LP或二者比值大于2.5。由于種種原因,不合格的痰標(biāo)本是不會退回的。痰質(zhì)控片記錄的相關(guān)信息包括:每低倍鏡下的WBC數(shù)和EPC數(shù),若查見細(xì)菌,報告細(xì)菌的種類(如G+C、G-b)、排列方式、數(shù)量(幾個+)。還要記錄真菌和孢子的鏡檢結(jié)果。不合格的痰標(biāo)本依然會接種(若申請單上有培養(yǎng))。痰質(zhì)控片的作用:在篩查標(biāo)本接種出來的平板時根據(jù)痰質(zhì)控片的結(jié)果進行相關(guān)分析。2)痰標(biāo)本接種:接種三種平板,分別是血平板、麥康凱平板、巧克力平板(安圖篩選嗜血桿菌的平板,名稱為CAH)。3)孵育和接種平板篩選:接收的痰標(biāo)本均要兩夜的孵育。第一夜過夜孵育后取出進行平板篩選,做好相關(guān)記錄。第二次過夜孵育后取出再篩選一次,和前一天的記錄相比較,記錄或改正相關(guān)篩選結(jié)果。孵育兩夜的意義在于防止某些生長緩慢的致病菌被漏檢。關(guān)于如何篩選需要進行下一步檢驗的標(biāo)本1)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)手工接種:血平板上第四區(qū)有5個菌落,表示有105,已經(jīng)達到治病的數(shù)量??梢岳^續(xù)往下做鑒定和/或藥敏。儀器接種:因使用消化液,計數(shù)需有107(痰標(biāo)本使用消化液,使很多胞內(nèi)菌釋放,上機前都是加過生理鹽水的,經(jīng)過這兩步那么這個判斷治病的數(shù)量級是如何得出的,經(jīng)驗,實驗結(jié)果?)。2)其他在微生物室的老師經(jīng)過一定時間的經(jīng)驗積累,對于常見的致病菌,根據(jù)其菌落形態(tài)就可以將其鑒別出來。比如通常情況下在血平板上G+菌的菌落較小,圓形,光滑,而G-菌的菌落較大,扁平,粗糙。而痰標(biāo)本接種后的血平板上哪些細(xì)菌需要進行下一步試驗不僅需要相應(yīng)的理論知識作基礎(chǔ)還需要經(jīng)驗積累。在血平板上達到量的細(xì)菌,還要看是否是優(yōu)勢生長和純量生長。但是優(yōu)勢生長的細(xì)菌并不一定是致病菌,如培養(yǎng)出來的全是口腔的正常菌群,相對來說,必定有優(yōu)勢生長得細(xì)菌。所以優(yōu)勢生長得細(xì)菌要是相關(guān)的致病菌。在引起呼吸道感染的G-b有肺炎克雷伯桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌等。是否痰標(biāo)本培養(yǎng)出G-b就一定是致病菌?答案是痰中出現(xiàn)革蘭陰性菌不一定就是致病菌。因為某些病人,如ICU病人,在呼吸道插管存在的情況下,呼吸道是與外界相通的,這時就會定植很多細(xì)菌,如銅綠假單胞菌,這些細(xì)菌只是定植但不會引起感染。如果一個病人來自ICU,且是第二次或者多次做痰培養(yǎng)的時候,培養(yǎng)出大量純量的銅綠假單胞菌或者鮑曼不動桿菌(這兩種菌常從ICU病人分離到)就需要考慮是定植菌。省醫(yī)院遇到這樣的情況只會報一個該細(xì)菌的量,而不是進行鑒定和/或藥敏。判斷一株細(xì)菌是不是致病菌,單獨在實驗室很難做到,必須與臨床聯(lián)系。有的時候,即使從痰標(biāo)本中只分離到根本不占優(yōu)勢幾個菌落的革蘭陰性或陽性菌,這種細(xì)菌也可能是真正引起感染的致病菌。痰標(biāo)本的培養(yǎng)、鑒定和藥敏結(jié)果通常情況下對臨床醫(yī)生只是起到一個輔助的作用,如果病人有癥狀,也分離到相應(yīng)的致病菌,那么可以幫助臨床醫(yī)生肯定診斷。如果培養(yǎng)結(jié)果和臨床癥狀不相符合,臨床醫(yī)生會從多方面考慮原因(送檢標(biāo)本不合格,某種細(xì)菌實驗室檢出能力低)并且經(jīng)驗性用藥(病人有明確的感染癥狀)??傊?,致病菌的篩選不僅需要檢驗工作者的豐富經(jīng)驗還需要多和臨床溝通,多了解
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