紫外－可見分光光度法

一.光的性質(zhì)

及物質(zhì)對光的吸收性質(zhì)：波粒兩象性橫波、光量子流波譜：分析中常用UV~Vis、IRUV~Vis屬電子光譜，靈敏度較高（10-4～10-6）物質(zhì)對光的吸收吸收光譜的產(chǎn)生（吸收曲線）λ(nm),A(T)二.基本概念(一)電子躍遷類型價(jià)電子分子軌道價(jià)電子：原子殼層中最外層電子僅需考慮未滿殼層中的電子分子軌道成鍵軌道bondingorbitalsσ、π反鍵軌道antibondingσ*、π*非鍵軌道n分子軌道之間躍遷基態(tài)激發(fā)態(tài)基態(tài):能量最低狀態(tài)S0激發(fā)態(tài):電子處于反鍵軌道上為激發(fā)態(tài)1.σ→σ*躍遷吸收峰在遠(yuǎn)紫外區(qū)飽和烴類＜150nm在200～400nm沒有吸收甲烷λmax=125nm2.π→π*躍遷孤立的π→π*，200nm，ε＞104乙烯，165nm1，3丁二烯217nm（ε2100）（共軛）3.n→π*躍遷含雜原子不飽和基團(tuán)，-C=O,-C=N，-N=N近紫外區(qū)(200～400nm)，ε小，約在10～100之間。丙酮的λmax=279nm4.n→σ*躍遷含一OH，一NH2，一S等基團(tuán)化合物λmax200nm左右二）常用術(shù)語：

1.發(fā)色團(tuán)（chromophore）含π→π*或n→π*躍遷的基團(tuán)如C=C、C=O、-N=N-、NO2、-C=S等2.助色團(tuán)(auxochrome)雜原子的飽和基團(tuán)與發(fā)色團(tuán)或飽和烴相連，吸收峰向長波方向位移。如-OH、-NH2、-Cl、-SR、-OR等。苯λmax=256nm（ε=220）苯酚λmax=270nm（ε=1450）3.長移、短移長移：長波方向移動，又稱紅移短移:短波方向移動，又稱藍(lán)（紫）移4.增色效應(yīng)和減色效應(yīng)吸收強(qiáng)度增加稱增色效應(yīng)或濃色效應(yīng)(hyperchromiceffect)：使吸收強(qiáng)度減弱稱減色效應(yīng)或淡色、效應(yīng)(hypochromiceffect)（三）影響吸收帶的因素1.位阻影響λmax208nm（10500）λmax295.5nm（29000）2.溶劑效應(yīng)影響吸收峰位置、吸收強(qiáng)度和光譜形狀一般應(yīng)注明所用溶劑稀溶液消除分子間力

3.體系pH值的影響λmax210.5nm，270nmλmax235nm，287nm三.定量原理一）

Beer-Lambert定律1729年，P·布古厄（Bouguer）觀察到入射光被介質(zhì)吸收的多少與介質(zhì)的厚度成正比。這后來又被J·H·蘭貝特（Lambert，1728—1777）所發(fā)現(xiàn)，他對單色光吸收所作的論述得到了關(guān)系式1852年，A·比爾（Beer）證實(shí)，許多溶液的吸收系數(shù)a與溶質(zhì)的濃度C成正比的。盡管比爾本人沒有建立那個(gè)指數(shù)吸收定律公式但仍被叫做比爾定律，這個(gè)名稱似乎在1889年就開始使用1.Lambert-Beer定律A=-logT=logI0/I=abcA為吸光度

a吸光系數(shù)T透光率2.吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)：ε百分吸光系數(shù)：二）偏離Beer定律的因素1.化學(xué)因素溶液中溶質(zhì)可因濃度改變而有離解、締合與溶劑間的作用等原因2.光學(xué)因素(1)非單色光(2)雜散光(3)散射光和反射光(4)非平行光紫外—可見分光光度計(jì)光源→單色器→吸收池→檢測器→記錄儀主要部件1.光源：強(qiáng)、穩(wěn)定、連續(xù)光譜(1)鎢燈和鹵鎢燈(2)氫燈或氘燈：150～400nm2.單色器連續(xù)光譜→按波長順序色散→單色光單色器由進(jìn)口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、