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動物遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四果蠅唾腺染色體的
制備和觀察
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.練習(xí)分離果蠅幼蟲唾腺的技術(shù),學(xué)習(xí)唾腺染色體的制片方法2.觀察了解果蠅唾腺染色體的形態(tài)學(xué)及遺傳學(xué)特征二、實(shí)驗(yàn)原理果蠅是雙翅目昆蟲,幼蟲期具有很大的唾腺細(xì)胞,其中的染色體是巨大的唾液腺染色體唾液腺染色體不斷地進(jìn)行自我復(fù)制而不分開,經(jīng)過許多次的復(fù)制形成約1000~4000拷貝的染色體絲,合起來達(dá)5mm寬,400mm長,比普通中期相染色體大得多(約100~150倍),所以又稱為多線染色體唾液腺染色體具有許多重要特征,為遺傳學(xué)研究的許多方面,如染色體結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成、基因差別表達(dá)等提供了獨(dú)特的研究材料三、實(shí)驗(yàn)材料與器具三齡幼蟲0.9%生理鹽水胭脂紅染色液解剖鏡解剖針吸水紙
四、實(shí)驗(yàn)步驟(1)
(1)剝離唾腺在一干凈的載玻片上滴一滴生理鹽水,選擇行動遲緩、肥大、爬在瓶壁上即將化蛹的三齡幼蟲,或者選擇經(jīng)低溫處理的果蠅三齡幼蟲置于載玻片上。每只手各持一個解剖針,在解剖鏡下進(jìn)行操作。果蠅的唾腺位于幼蟲體前1/3-1/4處,左手持解剖針按壓住蟲體后端三分之一的部位,固定幼蟲,右手持解剖針扎住幼蟲頭部口器部位,適當(dāng)用力向右拉唾腺腺體隨之而出。唾腺是一對透明的棒狀腺體,外有白色的脂肪組織(不透明)。去除幼蟲其它組織部分,并把唾腺周圍的白色脂肪剝離干凈。果蠅唾腺剝離示意圖四、實(shí)驗(yàn)步驟(2)(2)染色:吸去生理鹽水,注意操作時要邊觀察邊吸濕,最好用解剖針輕壓,防止連同唾腺一起吸走;滴加胭脂紅染色液,染色20-30min(3)壓片:染色完成后,蓋上干凈的蓋片,并覆一層濾紙。將片子放在實(shí)驗(yàn)臺上,用大拇指均勻用力壓片。(注意不要使蓋片移動。)五、注意事項(xiàng)1.一定加生理鹽水,否則唾腺易干。2.將脂肪組織清除干凈3.水不可太多,否則幼蟲會漂浮而且活躍4.染色時間不可過長,否則背景也著色5.壓片時要逐漸加力,用力要均勻6.染色完以后,將舊的染色液吸去,加新的染色液,再壓片7.吸水時勿將唾腺一起吸走六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察檢查你制作的制片,尋找形態(tài)良好、分散適中的
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