實(shí)驗(yàn)四果蠅唾腺染色體的制備和觀察

動(dòng)物遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四果蠅唾腺染色體的

制備和觀察

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.練習(xí)分離果蠅幼蟲(chóng)唾腺的技術(shù)，學(xué)習(xí)唾腺染色體的制片方法2.觀察了解果蠅唾腺染色體的形態(tài)學(xué)及遺傳學(xué)特征二、實(shí)驗(yàn)原理果蠅是雙翅目昆蟲(chóng)，幼蟲(chóng)期具有很大的唾腺細(xì)胞，其中的染色體是巨大的唾液腺染色體唾液腺染色體不斷地進(jìn)行自我復(fù)制而不分開(kāi)，經(jīng)過(guò)許多次的復(fù)制形成約1000～4000拷貝的染色體絲，合起來(lái)達(dá)5mm寬，400mm長(zhǎng)，比普通中期相染色體大得多（約100～150倍），所以又稱(chēng)為多線染色體唾液腺染色體具有許多重要特征，為遺傳學(xué)研究的許多方面，如染色體結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成、基因差別表達(dá)等提供了獨(dú)特的研究材料三、實(shí)驗(yàn)材料與器具三齡幼蟲(chóng)0.9%生理鹽水胭脂紅染色液解剖鏡解剖針吸水紙

四、實(shí)驗(yàn)步驟(1)

(1)剝離唾腺在一干凈的載玻片上滴一滴生理鹽水，選擇行動(dòng)遲緩、肥大、爬在瓶壁上即將化蛹的三齡幼蟲(chóng)，或者選擇經(jīng)低溫處理的果蠅三齡幼蟲(chóng)置于載玻片上。每只手各持一個(gè)解剖針，在解剖鏡下進(jìn)行操作。果蠅的唾腺位于幼蟲(chóng)體前1/3-1/4處，左手持解剖針按壓住蟲(chóng)體后端三分之一的部位，固定幼蟲(chóng)，右手持解剖針扎住幼蟲(chóng)頭部口器部位，適當(dāng)用力向右拉唾腺腺體隨之而出。唾腺是一對(duì)透明的棒狀腺體，外有白色的脂肪組織（不透明）。去除幼蟲(chóng)其它組織部分，并把唾腺周?chē)陌咨緞冸x干凈。果蠅唾腺剝離示意圖四、實(shí)驗(yàn)步驟(2)(2)染色：吸去生理鹽水，注意操作時(shí)要邊觀察邊吸濕，最好用解剖針輕壓，防止連同唾腺一起吸走；滴加胭脂紅染色液，染色20-30min(3)壓片：染色完成后，蓋上干凈的蓋片，并覆一層濾紙。將片子放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用大拇指均勻用力壓片。（注意不要使蓋片移動(dòng)。）五、注意事項(xiàng)1.一定加生理鹽水，否則唾腺易干。2.將脂肪組織清除干凈3.水不可太多，否則幼蟲(chóng)會(huì)漂浮而且活躍4.染色時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)，否則背景也著色5.壓片時(shí)要逐漸加力，用力要均勻6.染色完以后，將舊的染色液吸去，加新的染色液，再壓片7.吸水時(shí)勿將唾腺一起吸走六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察檢查你制作的制片，尋找形態(tài)良好、分散適中的