LC用戶現(xiàn)場培訓

島津高效液相色譜LC-20A維護保養(yǎng)島津企業(yè)管理（中國）有限公司培訓目的2認識儀器：了解儀器的構造組成，統(tǒng)一名稱，以便以后溝通。規(guī)范使用：能規(guī)范的使用儀器，充分發(fā)揮儀器的性能?；A規(guī)范維護：掌握LC日常維護及常見故障的排除方法。保障內容介紹3LC20A簡單介紹規(guī)范操作使用規(guī)范維護保養(yǎng)特別注意。LPGE清洗，乙腈閥現(xiàn)場討論認識儀器4C:\Users\IBM\Desktop\用戶培訓資料\部件解釋.pdf用戶培訓資料\部件解釋.pdf5壓力異常問題（壓力不上升、偏低、偏高、波動）漏液問題（泵，進樣器、檢測器）基線問題（漂移、噪聲、異常）進樣精度問題（面積重現(xiàn)差）保留時間精度問題（保留時間變化大）出峰問題(拖尾、變胖）液相色譜常見問題－總結6液相色譜常見問題－壓力

壓力是液相色譜中最重要的指標，反映儀器運行正常與否。保留時間的變化經常是由于壓力不穩(wěn)引起的。壓力與流動相的粘度有關。要關注壓力大小及其變化，記下儀器正常狀態(tài)時，在固定條件下（流動相、流速、溫度等）的壓力值。7液相色譜常見問題－壓力為零凸輪柱塞桿柱塞密封圈單向閥泵頭1_ad.flv1_at.flv8液相色譜常見問題－壓力為零泵頭中沒有液體，充滿氣泡單向閥完全堵死吸濾頭完全堵死排液閥沒關上管路漏液主板或者壓力傳感器泵體銹蝕，柱塞桿不動或折斷（兩根折斷）9液相色譜常見問題－壓力為零故障：寶石球沾在球座上。寶石球或球座受污染導致密封不好。球座磨損表現(xiàn)：不送液系統(tǒng)壓力波動大。更換周期：兩年。措施：推薦用注射器連接入口單向閥將其頂開。(附帶）單向閥的日常維護同流路清洗。拆下單向閥，放入純異丙醇中，超聲波清洗

15min以上。如果太臟，考慮用5％HNO3超聲清洗。10液相色譜常見問題－壓力低泵頭有氣泡柱塞密封墊漏液管路漏液單向閥輕度堵塞。單向閥磨損。吸濾頭堵塞排液閥沒關緊。排液閥鑼紋磨損或O圈磨損漏液傳感器故障1_ad.flv1_at.flv11液相色譜常見問題－壓力高吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動進樣器檢測器12液相色譜常見問題－壓力高保護柱泵的管路過濾器混合器預混合室過濾器某些細內徑的系統(tǒng)管路自動進樣器高壓閥和細內徑的出口管路（UFLC)。自動進樣器的進樣口到高壓閥管路（LC2010)手動進樣閥的定子堵塞。檢測器流通池半微量池的入口管和背壓管。自動進樣針堵塞（劣質進樣墊或不溶樣品）LC-20A壓力高的標準是什么？LC-20A新儀器系統(tǒng)壓力是多少？流動相是什么？流速是多少？參考標準：水1.0MP以下（1ml/min）（注：進樣器和檢測器之間接雙通）。注意柱子的壓差（真實壓力值）13液相色譜常見問題－壓力波動泵頭中有氣泡。（建議甲醇趕氣泡）單向閥臟、堵塞、磨損單向閥非耐乙腈型柱塞密封墊漏液柱塞桿磨損漏液流動相有氣泡吸濾頭臟脫氣機脫氣不良14液相色譜常見問題－漏液泵：柱塞密封墊（漏流動相）、排液閥、清洗墊（漏清洗液）手動進樣器:轉子密封墊自動進樣器:進樣墊樣品環(huán)柱子接頭處:接頭松動、接頭磨損、接頭不匹配）檢測器:流通池堵塞（墊片損壞、透鏡破碎）

15液相色譜常見問題－基線噪音大流動相污染，使用低純度溶劑流動相、檢測器流通池內有氣泡通過檢測池的能量低(光路臟、氘燈老化、流動相、池子臟）波長設定短（220nm以下）電源電壓波動幾十伏沒接好地線儀器振動－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－基線噪音標準：SPD-10Avp/20A20uv流動相純水250nmSPD-M20A50uv流動相純水250nm600nm16液相色譜常見問題－基線不穩(wěn)流動相污染，使用低純度溶劑檢測器的溫度受到環(huán)境波動（風口，空調口）沖洗平衡柱子時間不夠（半小時），柱子沒恒溫柱子或管路太臟波長設定短（220nm以下）特殊流動相溫控影響。（離子對試劑需要恒溫較穩(wěn)定）檢測器要預熱30min以上基線漂移標準：SPD-10Avp/20A:600uv/hour純水250nmSPD-M20A:2mv/hour純水250nm600nm17液相色譜常見問題－面積重現(xiàn)性差1手動進樣閥7725i進樣量不合適（10ul）進樣針定量不準。（不熟練）進樣針有氣泡。（慢提快打）進樣口轉子針密封松動（用橡皮頂緊）進樣針太細，插不緊轉子密封墊臟、磨損、漏液定量環(huán)堵塞廢液管堵塞或者位置不對進樣的方法不正確進樣針用完以后要及時清洗，否則針會粘住。CV：10ul6針面積RSD1％18液相色譜常見問題－面積重現(xiàn)性差2自動進樣器沒有排氣（purge）或排氣時間（25min)不夠清洗液干了。（瓶子或管路）清洗液沒脫氣。（沒有在線脫氣機情況）高壓閥轉子密封墊堵塞或磨損進樣墊堵塞或磨損漏液非島津的瓶及瓶墊針或定量環(huán)漏液或堵塞室溫波動色譜柱性能降低

10ul6針面積RSDSIL-10ADvpSIL-20A0.3%SIL-10AF模式A0.5%模式F1%SIL-10AP1.0%19液相色譜常見問題－保留時間重現(xiàn)性差泵輸液送液不正常（壓力波動、氣泡）柱溫的變化（室溫變化小于2度）流動相組分揮發(fā)變化（封口膜）流動相的PH值不同，緩沖能力不夠（樣品影響）（低波長用磷酸鹽，普通波長用醋酸鹽。）色譜柱平衡時間不夠（C18,15cm30min-60min）梯度洗脫未回初始流動相濃度比例或時間不夠純有機試劑與高鹽流動相混合柱子問題低壓梯度閥不良密封墊漏液，排液閥沒擰緊

6針RT.

RSD0.5%20液相色譜常見問題－峰形異常色譜柱性能降低（污染、堵塞、塌陷、化學保留）色譜柱選擇不合適流動相緩沖不足或不合適樣品溶劑選擇不當，與流動相之間極性差異太大樣品過載泵和色譜柱之間的管路連接顛倒流路連接中存在死體積流路漏液采樣針管或管路中出現(xiàn)阻塞流動相組成變化管線公螺母死體積溶解樣品的溶劑選擇不當最好不要選擇高溶解性的試劑作為溶解樣品的溶劑甲醇作為溶劑20μLCaffeine乙醇作為溶劑20μLCaffeine乙醇作為溶劑10μLCaffeine最好注入少量樣品溶解性效應低溶解性溶劑高溶解性溶劑23液相色譜常見問題－鬼峰流動相被污染進樣閥殘余峰樣品中未知物色譜柱中的污染物所用樣品瓶臟無清洗液清洗液體積[RINSEVOL]參數(shù)太低未注入樣品時空白梯度的色譜圖水中不純物的出峰水中的不純物保留在柱中，隨之被乙腈洗脫使用好儀器24

根據典記，魏文王曾求教于名醫(yī)扁鵲：“你們家兄弟三人，都精于醫(yī)術，誰是醫(yī)術最好的呢？”扁鵲：“大哥最好，二哥差些，我是三人中最差的一個?！蔽和醪唤獾卣f：“請你介紹的詳細些。”

扁鵲解釋說：“大哥治病，是在病情發(fā)作之前，那時候病人自己還不覺得有病，但大哥就下藥鏟除了病根，使他的醫(yī)術難以被人認可，所以沒有名氣，只是在我們家中被推崇備至。我的二哥治病，是在病初起之時，癥狀尚不十分明顯，病人也沒有覺得痛苦，二哥就能藥到病除，使鄉(xiāng)里人都認為二哥只是治小病很靈。我治病，都是在病情十分嚴重之時，病人痛苦萬分，病人家屬心急如焚。此時，他們看到我在經脈上穿刺，用針放血，或在患處敷以毒藥以毒攻毒，或動大手術直指病灶，使重病人病情得到緩解或很快治愈，所以我名聞天下。”魏王大悟。

事后控制不如事中控制，事中控制不如事前控制，可惜大多數(shù)的事業(yè)經營者均未能體會到這一點，等到錯誤的決策造成了重大的損失才尋求彌補。彌補得好，當然是聲名鵲起，但更多的時候是亡羊補牢，為時已晚。

25液相色譜常見問題－總結從以上常見故障的原因，可以看出規(guī)范操作非常重要：試劑達標嚴把關排除氣泡須徹底鹽析結晶要避免管路部件不污染定期保養(yǎng)是保障日資企業(yè)，臺資企業(yè)故障較少，嚴格遵照操作SOP。26關于流動相－脫氣流動相必須預先脫氣，否則容易在系統(tǒng)內逸出氣泡，影響泵的工作。影響色譜柱的分離效率及檢測器的靈敏度，基線穩(wěn)定溶解氧可能與樣品，流動相，甚至固定相反應可能引起PH的變化，給分離及分析結果帶來誤差溶解氧能與甲醇，四氫呋喃形成有紫外吸收的絡合物，提高背景吸收，降低靈敏度基線漂移或形成鬼峰熒光猝滅現(xiàn)象27關于流動相－脫氣常用脫氣法：吹氦脫氣法加熱回流法抽真空脫氣法超聲波脫氣法在線真空脫氣法28關于流動相－過濾所有溶劑使用前都必須用0.45μm（或0.22μm）濾膜過濾，以除去雜質微粒。濾膜類型：聚四氟乙烯濾膜（油膜）：適用于所有溶劑，酸和鹽（過濾水速度慢）。醋酸纖維濾膜(水膜）：不適用于有機溶劑（溶解），特別適用于水相。29關于流動相－貯存一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯容器內，不能貯存在其他塑料容器中。容器一定蓋嚴，防止揮發(fā)引起組成變化磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液極易長霉，應盡量現(xiàn)用現(xiàn)配。冷藏不超過3天。容器定期清洗，特別是盛水、緩沖鹽的瓶子，以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。甲醇具有防腐作用。規(guī)范操作___操作前準備30泵（LC-20AD）自動進樣器(SIL-20A)柱溫箱(CTO-20A)檢測器（SPD）打開/關閉電源操作前的準備檢查壓力值打開/關閉電源

準備清洗液和廢液瓶

清洗液的選擇

清除氣泡

準備樣品源打開/關閉電源設定操作溫度[SETTEMP

設定溫度上限[T.MAX操作注意事項打開/關閉電源規(guī)范操作___基本操作31清洗與流動相更換.pdf自動進樣器準備.pdfSPD-20A20AV注意事項.pdf32規(guī)范維修常見故障及應對方法.pdf泵的定期維護保養(yǎng).pdf以泵為例，介紹規(guī)范維修33定期保養(yǎng)34定期保養(yǎng)35定期保養(yǎng)在線過濾器228-48607-91老式228-35871-96整體式單向閥清洗步驟由于不斷輸送流動相，單向閥容易臟，所以建議分析結束后或者一段時間不用時用下面的方法清洗單向閥：用IPA清洗單向閥。連接一阻尼管(I.D.0.1mmx2m)到泵的出口，設置流速，使壓力至少10MPa(standard:1ml/min),清洗至少30minutes，這樣效果較好。關于LPGE的清洗：清洗比例閥

如果流動相中含有可能產生鹽析的成分，比如磷酸鹽緩沖液。當流動相變干或與有機相混合時，就會產生鹽析。鹽晶將會大大縮短比例閥及泵消耗品的壽命。所以，如果使用這些流動相，就需要定期的（大約一周），用純水PURGE所有的通道(A,B,C,andD)。接著設定濃度比例到每個通道各(A,B,C,andD)25%進行沖洗至少30分鐘，流量為1.0mL/min?？梢圆唤又踊蛘吲乓洪y打開。另外，如果系統(tǒng)將有一段時間不用的情況下，也需要立即清洗。注意事項有關緩沖溶液的注意點：①在使用緩沖液和有機溶劑預先混合好的溶液作為流動相時，需將有機溶劑慢慢倒入緩沖液容器內。溶劑混合后，目測確認是否有鹽析出。備注1：在有機溶劑