藥物分析07第七章 芳香胺類藥物的分析1

第七章芳香胺類藥物的分析AnalyticalofAromaticamines芳香胺

(Aromaticamines)

芳胺類

芳烴胺類（1）（2）氨基苯甲酸酯類藥物苯胺的?；苌锉揭野奉愃幬铮?）（2）

苯丙胺類藥物

Page2第一節(jié)芳胺類藥物的分析結(jié)構(gòu)

(Structure)1.

芳伯氨基：重氮化－偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成希夫（Schiff）堿；易氧化變色2.水解：受光線、熱、堿的影響；鹽酸丁卡因→氨基苯甲酸3.

弱堿性：叔胺氮原子，生物堿沉淀劑反應(yīng)，非水溶劑滴定4.

溶解性：游離堿，油狀液體或低熔點(diǎn)固體難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；鹽酸鹽白色結(jié)晶粉末，具一點(diǎn)的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑?；瘜W(xué)性質(zhì)

(Feature)苯佐卡因(benzocaine),鹽酸普魯卡因(procainehydrochloride),鹽酸丁卡因(tetracainehydrochloride).1.對(duì)氨基苯甲酸酯類都含有對(duì)氨基苯甲酸酯的結(jié)構(gòu)母體

Page32.酰胺類對(duì)乙酰氨基酚醋氨苯砜鹽酸羅哌卡因1.

水解后顯芳伯氨基特性2.

醋酸乙醇/硫酸醋酸乙酯3.酚羥基特性4.弱堿性：叔胺氮原子＋生物沉淀劑→沉淀5.酰胺氮原子與金屬離子絡(luò)合顯色鹽酸妥卡尼結(jié)構(gòu)

(Structure)化學(xué)性質(zhì)

(Feature)對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol),醋氨苯砜(acedapsone),鹽酸利多卡因(lidocainehydrochloride),鹽酸布比卡因(bupivacainehydrochloride).(共性)(特性)共性是具有芳酰胺基

Page4芳伯氨基：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺

NaNO2/HCl堿性β-萘酚有色偶氮染料（橙黃到猩紅色）（一）重氮化－偶合反應(yīng)鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page5潛在芳伯氨基：對(duì)乙酰氨基酚、醋氯苯砜鹽酸或硫酸加熱水解NaNO2/HCl堿性β-萘酚有色偶氮染料（紅色）區(qū)別鹽酸丁卡因：（乳白色）（一）重氮化－偶合反應(yīng)鑒別試驗(yàn)

(Identification)N-亞硝基化合物↓

Page6（二）與三氯化鐵反應(yīng)（藍(lán)紫色）鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page7（三）與金屬離子反應(yīng)與銅和鈷離子反應(yīng)（具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸利多卡因）硫酸銅/碳酸鈉試液→藍(lán)紫色配合物→氯化鈷/酸性溶液→亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀↓顯黃色（溶于氯仿）鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page8（三）與金屬離子反應(yīng)2.

羥肟酸鐵鹽反應(yīng)（具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸普魯卡因胺）濃過氧化氫/加熱至沸羥肟酸三氯化鐵羥肟酸鐵（紫紅色→暗棕色至棕黑色。）鑒別試驗(yàn)

(Identification)++3+3HCl

羥肟酸鐵

Page9（三）與金屬離子反應(yīng)3.

與汞離子反應(yīng)芳酰胺類，如鹽酸利多卡因硝酸汞/硝酸，煮沸對(duì)氨基苯甲酸酯類，如苯佐卡因硝酸汞/硝酸，煮沸黃色紅色或橙黃色鑒別試驗(yàn)

(Identification)與對(duì)氨基苯甲酸酯類可區(qū)別。

Page10（四）水解產(chǎn)物反應(yīng)（酯鍵結(jié)構(gòu)）1.鹽酸普魯卡因＋10％氫氧化鈉溶液→白色↓（加熱變?yōu)橛蜖钗铮├^續(xù)加熱蒸氣（二乙氨基乙醇）↑（能使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色）加熱至油狀物消失放冷、加鹽酸白色↓（能溶于過量的鹽酸）2.苯佐卡因＋氫氧化鈉試液煮沸乙醇加入碘試液/加熱黃色↓（碘仿臭氣）

鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page11（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1.鹽酸利多卡因三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因（mp.228~232℃）

鹽酸布比卡因三硝基苯酚布比卡因（mp.194℃）2.鹽酸丁卡因25％硫氰酸銨溶液/5％醋酸溶液丁卡因硫氰酸鹽（mp.131℃）鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page12（六）紫外特征吸收光譜藥物溶劑濃度(μg/mL)λmax(nm)備注對(duì)乙酰氨基酚HCl(10.3g/L)-甲醇(1:99)0.4%NaOH10249860～980BP2003,8257715Chp2005用于含量測(cè)定苯佐卡因氯仿278USP24與對(duì)照吸收相同，兩者之差不超過3.0%鹽酸丁卡因pH6磷酸鹽緩沖液10310同上，兩者之差不超過2.0%鹽酸普魯卡因胺0.1mol/LNaOH10273580～610BP2003水5280Chp2005，片劑和注射劑鑒別醋氨苯砜無水乙醇5256，284Chp2005鑒別試驗(yàn)

(Identification)

Page13（七）紅外吸收光譜鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因胺波數(shù)cm-1

波數(shù)cm-1

鑒別試驗(yàn)

(Identification)酯羰基υC=O1692－酯基υC-O1271,1170,1115－二乙胺鹽υN-H25852645（略向高波數(shù)）－1550（δN-H酰胺Ⅱ帶）－1280（υN-H酰胺Ⅲ帶）

Page14（一）對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)工藝：對(duì)乙酰氨基酚有色氧化產(chǎn)物乙醇溶液的澄清度與顏色：中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物在乙醇中顯橙紅色或棕色。（比濁，比色）有關(guān)物質(zhì)：中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物（例：對(duì)氨基酚、對(duì)氯乙酰苯胺、O-乙?；鶎?duì)乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等）藥典規(guī)定：以對(duì)氯乙酰苯胺為對(duì)照品，TLC限度檢查。對(duì)氨基酚的檢查特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)

Page15對(duì)氨基酚乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)引起水解－毒性較大并有色澤檢查方法：取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50μg用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.005%）。注：對(duì)氨基酚對(duì)照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)（亞硝基鐵氰化鈉）（藍(lán)色）

Page16（二）鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查限度：水解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，不得超過1.2%。檢查方法：TLC法，對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品對(duì)照，對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液顯色。黃色特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)氨基苯甲酸苯胺

Page17容量分析方法色譜法分光光度法亞硝酸鈉滴定法非水溶液滴定法含量測(cè)定(Assay)spectrometrysodiumnitritemethodnon-aqueoustitrimetryvolumetricanalysischrometography

Page18亞硝酸鈉滴定法

sodiumnitritemethod原理：芳香胺類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中與亞硝酸鈉成重氮鹽，可用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。

Page19亞硝酸鈉滴定法

sodiumnitritemethod測(cè)定主要條件：加入適量溴化鉀加快反應(yīng)加入過量鹽酸加速反應(yīng)重氮化反應(yīng)加快；重氮鹽在酸中穩(wěn)定；可防止生成偶氮氨基化合物。反應(yīng)溫度

重氮化反應(yīng)速度與溫度成正比。

滴定速度為避免亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定管尖端插入液面下滴定在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3

Page20

永停滴定法

終點(diǎn)前：無過量無電流

HNO2

終點(diǎn)時(shí)：有過量有電流（使指針偏離零

HNO2永停在某一位置）

永不回復(fù)。即為滴定終點(diǎn)。

Page21非水溶液滴定法

non-aqueoustitrimetry鹽酸丁卡因鹽酸利多卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮側(cè)鏈哌啶環(huán)的叔胺氮弱堿性高氯酸非水滴定注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氫鹵酸的干擾鹽酸丁卡因－加醋酐以突出終點(diǎn)；例：鹽酸利多卡因的非水滴定反應(yīng)過程：指示劑：結(jié)晶紫指示劑：萘酚苯甲醇鹽酸布比卡因

Page22分光光度法

(spectrometry) 對(duì)乙酰氨基酚在257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，中國藥典2005版采用百分吸收系數(shù)（）法，測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量。【含量測(cè)定】取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，照紫外－可見分光廣度法（藥典Chp2005版附錄ⅣA），在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)（）為715計(jì)算，即得。例：對(duì)乙酰氨基酚、片劑、咀嚼片、注射液、栓劑、膠囊、顆粒劑

Page23比色法芳伯氨基的重氮化－偶合反應(yīng)生成有色偶氮染料 －－專屬性差鹽酸普魯卡因與1,2-萘醌-4-磺酸鈉溶液反應(yīng)生成棕紅色化合物 －－適用于鹽酸普魯卡因及其制劑的常規(guī)分析快速熒光測(cè)定鹽酸普魯卡因胺結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基與熒胺反應(yīng)，生成熒光物， 可在λ400nm、λ485nm波長(zhǎng)處測(cè)定熒光強(qiáng)度 －－較重氮化法靈敏、簡(jiǎn)便，適用于普魯卡因胺制劑的測(cè)定。

Page24以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因注射液中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸（PABA），不需分離提取，準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。

色譜條件（色譜柱、流動(dòng)相、檢測(cè)器）

測(cè)定方法（供試品溶液、對(duì)照品溶液的制備，進(jìn)樣量，計(jì)算方法）高效液相色譜法(HPLC)

Page25體內(nèi)藥物分析應(yīng)用示例：對(duì)乙酰氨基酚急性中毒的血藥濃度測(cè)定色譜條件：Nova-PackC18柱（4μm,150mm×3.9mm），Nova-PackC18預(yù)柱 柱溫：25℃，流動(dòng)相為甲醇－水（50:50）流速：0.8ml/min

二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm血漿樣品制備：取靜脈血3～4ml，置含肝素抗凝劑的離心管中，離心分離 5min(3000rpm)，上清液為待測(cè)血漿。吸取上述血漿