《土壤中分解尿素的細菌的分離與計數》試題庫

《土壤中分解尿素的細菌的分離與計數》試題庫題組11．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、瓊脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、尿素、瓊脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水[答案]A[解析]根據題意可知，該培養(yǎng)基中必須要有尿素，故可排除B、D；而培養(yǎng)基中必須含有有機物作為碳源，又可排除C，故只有A符合題意。2．某同學在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數為2760、295、和46，則菌落總數(個/mL)為()A．×104 B．×104C．×104 D．×104[答案]C3．在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有()①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基污染③由于操作失誤④沒有設置對照A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②③④[答案]A4．請選出下列正確的步驟()①土壤取樣②稱取10g土壤放入盛有90g無菌水的錐形瓶中③吸取進行平板涂布④依次稀釋101、102、103、104、105、106、107稀釋度A．①→②→③→④ B．①→③→②→④C．①→④→②→③ D．①→②→④→③[答案]D5．自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將他們分離提純，然后進行數量的測定。下面是對大腸桿菌進行數量測定的實驗，請回答有關問題。步驟如下：A．制備稀釋倍數為102、103、104、105、106的系列稀釋液B．為了得到更加準確的結果，你選用________(稀釋混合平板法、稀釋涂布平板法)接種樣品C．適宜溫度下培養(yǎng)結果分析：(1)測定的大腸桿菌數，再對應稀釋倍數的106的培養(yǎng)基，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確可信的是A．一個平板，統(tǒng)計的菌落數是23B．兩個平板，統(tǒng)計的菌落數是22和26，取平均值24C．三個平板，統(tǒng)計的菌落數是21、5和52，取平均值26D．四個平板，統(tǒng)計的菌落數是21、30、24和25，取平均值25(2)一同學在稀釋倍數的106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數的平均值為，那么每毫升樣品中的菌落數是________。(3)用這種方法測定密度，實際活菌數量比測得的數量________，因為________________________。(4)某同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？為什么？___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________[答案]步驟B：稀釋混合平板法。結果分析：(1)D(2)×108(3)多，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落。(4)不能；因為不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程。1．關于土壤取樣的敘述錯誤的是()A．土壤取樣，應選取肥沃濕潤的土壤B．先鏟去表層土3cm左右，再取樣C．取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D．應在火焰旁稱取土壤[答案]C[解析]在土壤取樣過程中，取樣用的小鐵鏟和信封在使用前也要滅菌。2．PCR技術要求使用耐高溫的DNA聚合酶，這種酶要能忍受93℃左右的高溫。如果請你尋找這種耐高溫的酶，你會去哪里尋找()A．土壤中 B．海水中C．熱泉中 D．冷庫中[答案]C[解析]熱泉中才可能有這種耐高溫的酶。3．需要在火焰旁操作的有()①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤④涂布平板⑤微生物的培養(yǎng)A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④[答案]D4．可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是()A．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹紅Ⅲ試劑D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑[答案]A[解析]以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。5．探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數。實驗原理農田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表土制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離開來。材料用具農田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9mL無菌水的大試管若干、無菌移液管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿，盛90mL無菌水的錐形瓶、酒精燈、恒溫箱。方法步驟(1)倒平板。分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應在________操作。(2)制備土壤稀釋液。取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌移液管吸取上清液1mL，轉至9mL無菌水的大試管中，依次稀釋到107倍稀釋度。為實現無菌操作，試管口和移液管應在離火焰________cm處。(3)涂布。按照107～103稀釋度的順序分別吸取進行平板涂布。每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基至少涂布________個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布________個平板。(4)培養(yǎng)。放入恒溫箱內，在適宜溫度條件下培養(yǎng)3d～4d。一般每隔________小時統(tǒng)計一次，選取________時的記錄作為結果，這樣可以防止________________________________________________________________。(5)細菌的計數。當菌落數目穩(wěn)定時，選取菌落數在________的平板進行計數。如果測試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數是________。(稀釋度是105)(6)預期結果。相等稀釋度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落數________(填“多于”或“少于”)無氮培養(yǎng)基上的數目。理由是_______________________________________________________。[答案](1)酒精燈火焰旁(2)1～2(3)31(4)24菌落數目穩(wěn)定因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的數目(5)30～3005×107(6)多于無氮培養(yǎng)基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類的生存[解析]考查微生物的分離及計數。要分離自生固氮菌，采用選擇培養(yǎng)基分離的方法，缺乏氮源的培養(yǎng)基可用來分離自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生長。實驗步驟一般是：配制無氮培養(yǎng)基→滅菌→倒平板→系列稀釋→涂布平板→培養(yǎng)→觀察并計數。實驗中要注意無菌操作和設計對照等。題組21.將硝化細菌接種到下列培養(yǎng)基中,其中可以長出硝化細菌菌落的是()A.無氮培養(yǎng)基,試管密閉B.無氮培養(yǎng)基,試管口用棉塞塞住C.含氮培養(yǎng)基,試管密閉D.含氮培養(yǎng)基,試管口用棉塞塞住解析:硝化細菌需要氮源,因此培養(yǎng)硝化細菌需要含氮的培養(yǎng)基;硝化細菌是需氧型微生物,因此試管口用棉塞塞住以便于通氣。答案:D2.下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細菌的生長,S、C、M為簡單培養(yǎng)基;U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質。該細菌不能合成()培養(yǎng)基生長狀態(tài)S、C、M-S、C、M+V+Z-S、C、M+U+Y+S、C、M+Z+X-S、C、M+V+Y+S、C、M+U+X-S、C、M+Y+Z+ 解析:該細菌在簡單培養(yǎng)基上不能生長,但只要在簡單培養(yǎng)基中含有Y物質,細菌就能正常生長,因此該細菌無法合成Y物質。答案:C3.下列方法可以鑒定出分解尿素的細菌的是()A.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析:分解尿素的細菌能分解尿素,產生氨,氨能使pH升高,酚紅指示劑變紅。答案:A4.某同學在稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數的平均值為234,那么每克樣品中的菌落數是(涂布平板時所用稀釋液的體積為mL)() 解析:根據計算方法“每克樣品中的菌落數=(C÷V)×M”,則(234÷×106=×109。答案:B5.下列關于微生物分離和培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行消毒B.測定土壤樣品中的細菌數目,常用菌落計數法C.分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度D.分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析:微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行滅菌,而不是消毒;測定土壤樣品中的細菌數目,常用菌落計數法而一般不用活菌計數;分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數在30~300的平板進行計數;分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。答案:A6.實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應時,用3種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線(3條線均與圖中的鏈霉素帶接觸),將平板置于37℃條件下恒溫培養(yǎng)3天,結果如圖所示。從實驗結果分析,下列敘述不正確的是()A.鏈霉素能阻止結核菌的生長B.鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒解析:由圖可知,鏈霉素對傷寒菌沒有抑制作用,因此不能用于治療傷寒。答案:D7.用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數時,通過統(tǒng)計平板上的菌落數就能推測出樣品中的活菌數。原因是()A.平板上的一個菌落就是一個細菌B.菌落中的細菌數是固定的C.此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌D.此方法統(tǒng)計的菌落數一定與活菌的實際數相同解析:用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數時,平板上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌,但偶爾也能來自兩個或多個細菌,所以此方法統(tǒng)計的菌落數可能比活菌的實際數偏小。答案:C8.統(tǒng)計菌落數目的方法有()①稀釋涂布平板法②重量法③直接計數法④比濁法⑤生理指標法⑥膜過濾法A.①②③⑥ B.③④⑤⑥C.① D.①③解析:各種方法均可反映細菌數目的多少,但能形成菌落的只有稀釋涂布平板法。答案:C9.用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數,在對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結果,正確的是()A.涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數是230B.涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數是215和260,取平均值238C.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是21、212和256,取平均值163D.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是210、240和250,取平均值233解析:在設計實驗時,一定要涂布至少3個平板作為重復組,才能增強實驗的說服力與準確性,所以A、B兩項不正確。C項雖涂布了3個平板,但是,其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠,說明在操作過程中可能出現了錯誤,此時,不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值。答案:D10.下列關于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,不正確的是()A.利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進行計數B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少解析:稀釋涂布平板法既可以分離微生物,同時也可以對微生物進行計數。答案:A11.下列是關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述,其中錯誤的()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀釋液和無菌水各mL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置,37℃恒溫培養(yǎng)24~48hD.確定對照組無菌后,選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數解析:在細菌計數時,為保證結果準確,一般選擇菌落數目在30~300的平板進行計數。答案:D12.幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集樣本并制成菌液后,進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下:(1)在配制培養(yǎng)基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因為Hp含有,它能以尿素為氮源;若有Hp,則菌落周圍會出現色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是滅菌。A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射%酒精浸泡 D.過濾(3)步驟X表示。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是獲得菌落。(4)在培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在中。(5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將14C標記的分解為NH3和14CO2。解析:(1)幽門螺桿菌含有脲酶,能分解尿素為菌體提供氮源,因此在配制培養(yǎng)基時要加入尿素;加入酚紅指示劑的目的是檢驗是否有Hp存在,若有Hp存在,它會分解尿素,培養(yǎng)基pH會升高,酚紅指示劑將變紅。(2)由于尿素在高溫下會分解,所以對尿素溶液的滅菌要采用G6玻璃漏斗過濾的方法。(3)在實驗操作過程中要先滅菌、倒平板,再進行接種。接種時先將菌液稀釋,以獲得單菌落,再涂布到培養(yǎng)基平面上。(4)培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫箱中培養(yǎng),倒置培養(yǎng)的目的也是獲得單一菌落。(5)如果人體感染了Hp,能將尿素分解為NH3和CO2,因而標記尿素中的C,可通過呼吸產物CO2來判斷是否感染Hp。答案:(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱(5)尿素13.為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用,設計了以下實驗,并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示,實驗步驟如下圖所示。請分析回答下面的問題。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂ggg1g10g15g將上述物質溶解后,用蒸餾水定容到1000mL(1)簡述土壤中可分解尿素的細菌的鑒定方法及原理。。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和,實驗中需要振蕩培養(yǎng),目的是。(4)轉為固體培養(yǎng)基時,常采用接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)實驗結束后,使用過的培養(yǎng)基應該進行處理后,才能倒掉。解析:尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源,因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培養(yǎng)基上生長。由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH升高,故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑將變成紅色;這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,可篩選目的菌。目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖。振蕩培養(yǎng)的目的是提供氧氣。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時的接種方法常用稀釋涂布平板法或平板劃線法。倒掉培養(yǎng)基之前應對其進行滅菌處理。答案:(1)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,細菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH升高,使酚紅指示劑變?yōu)榧t色(2)目的菌選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(4)稀釋涂布平板法(或平板劃線法)(5)滅菌14.苯酚是工業(yè)生產排放的有毒污染物質,自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,①為土壤樣品。請回答下列問題。(1)②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入作為碳源,②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基(A.影響;B.不影響)細菌的數量,如果要測定②中活細菌數量,常采用法。(2)④為對照,微生物在④中不生長,在⑤中生長,④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于;使用法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細菌時進行倒置培養(yǎng)的原因是。(3)實驗過程中如何防止其他微生物的污染?。解析:根據微生物對營養(yǎng)的需求,在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質以達到促進目的菌生長,抑制或阻止其他雜菌生長的目的,然后再用稀釋涂布平板法、平板劃線法或其他方法篩選出單個目的菌落,再接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。為防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生長,要將培養(yǎng)皿倒置。在設計實驗中要注意單一變量原則和對照原則,操作中要嚴格進行無菌操作。答案:(1)苯酚A稀釋涂布平板(2)④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源,⑤的培養(yǎng)基加入苯酚作為碳源稀釋涂布平板(或平板劃線)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(3)培養(yǎng)基滅菌,接種環(huán)滅菌,接種過程無菌操作題組31．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是(A)A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析：能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基必須是以尿素為唯一氮源，B、D不符合。C沒有有機碳源，分解尿素的微生物不能正常生長。2．從土壤中分離能分解尿素的細菌，可以利用選擇培養(yǎng)基，其成分中一定有(A)①尿素②有機氮化物③無機鹽④有機碳化物⑤水⑥無機碳化物A．①③④⑤B．②③④⑤C．①③⑤⑥D．②③⑤⑥解析：分離能分解尿素的細菌，故培養(yǎng)基中一定有尿素，一定沒有有機氮化物；另外，水、無機鹽和碳源、能源也是細菌生長所必不可少的。有機碳在這里既是碳源又是能源，因為分解尿素的細菌是異養(yǎng)微生物，不能利用無機碳化物。3．關于土壤取樣的敘述錯誤的是(C)A．土壤取樣，應選取肥沃、濕潤的土壤B．先鏟去表層土3cm左右，再取樣C．取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D．應在火焰旁稱取土壤4．取少量酵母菌液放入血球計數板直接記數，測得的數目是(D)A．活細胞數B．死細胞數C．菌落數D．細胞總數解析：顯微鏡直接計數法的缺點就是不能區(qū)分活菌和死菌。5．在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只篩選出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有(A)①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基被污染③由于操作失誤④沒有設置對照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④6．下列關于統(tǒng)計菌落數目的方法的敘述，不正確的是(C)A．采用平板計數法獲得的菌落數往往少于實際的活菌數B．當樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落C．為了保證結果準確，一般采用密度較大的平板進行計數D．在某一濃度下涂布三個平板，若三個平板統(tǒng)計的菌落數差別不大，則應以它們的平均值作為統(tǒng)計結果解析：當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目低。一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數，密度過大會使計數結果偏小，影響結果的準確性。涂布三個平板，作為重復組，取其平均值作為統(tǒng)計結果能增強試驗的說服力與準確性。7．請選出分離土壤細菌的正確操作步驟(C)①土壤取樣②稱取10g土壤，加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取mL進行平板涂布④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③解析：在分離土壤中某細菌時，應先選取土樣(10g)，然后加無菌水獲得土壤浸出液，并進行不同倍數稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng)，并分離和計數。8．下列有關土壤中微生物的分離與計數的說法中，錯誤的是(D)A．因為土壤中各類微生物的數量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數進行分離B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍不同C．如果得到了2個以上菌落數目在30～300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落解析：樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落的數目。實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落在30～300之間適于計數的平板。測定土壤中細菌的數量，一般選用104、105和106倍的稀釋液；測定放線菌的數量一般選用103、104和105倍的稀釋液；測定真菌的數量一般選用102、103和104倍的稀釋液。將菌液稀釋相同的倍數，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數目，從而說明選擇培養(yǎng)基的篩選作用。9．“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗中以土壤中的細菌為研究對象，要達到的目的是(B)①從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌②從土壤中分離出能夠分解氨的細菌③統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌④統(tǒng)計所取土壤樣品中究竟有多少分解尿素的細菌A．①②B．①③C．②④D．③④解析：該實驗是為了分離出能分解尿素的細菌，根據活菌計數法，計算出的是每克土壤樣品中的菌株數。10．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培養(yǎng)基時(D)A．葡萄糖在培養(yǎng)基中含量越多越好B．尿素在培養(yǎng)基中含量越少越好C．尿素分解菌有固氮能力，故培養(yǎng)基中尿素為無機氮D．尿素分解菌無固氮能力，故培養(yǎng)基中的尿素為有機氮解析：葡萄糖是微生物最常用的碳源，但在培養(yǎng)基中不能加入過多，否則，會使細胞無法吸水而死亡；尿素在培養(yǎng)基中可以作為氮源，要適量加入而非越少越好；同時尿素是分解菌的有機氮源，而不是無機氮源，在分解過程中，尿素會被尿素分解菌分解為氨。11．某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到了能高效降解化合物A的細菌(“目的菌”)。請分析回答下列問題。(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的__________，實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是__________。(3)培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量____________的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量__________。(4)可采用__________的方法將“目的菌”接種到固體培養(yǎng)基上，通過__________法對“目的菌”的數量進行統(tǒng)計，通常需要對菌落數為__________的平板進行計數。(5)實驗結束時，使用過的培養(yǎng)基應該進行__________處理后，才能倒掉。解析：(1)培養(yǎng)基中加入的磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素，不能作為碳源和氮源，可推測加入的化合物A提供微生物生存所需的碳源和氮源，這樣可以篩選出能夠降解化合物A的微生物，這種培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。(2)化合物A提供氮源和碳源，振蕩可以增加培養(yǎng)基中氧氣的含量，說明該微生物的代謝類型為異養(yǎng)需氧型。(3)培養(yǎng)若干天應該向消耗化合物A的培養(yǎng)基中加入新的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量逐漸增多。(4)可采用稀釋涂布平板法將“目的菌”接種到固體培養(yǎng)基上，通過計數平板中的菌落數推算出活菌的個數，通常應該對菌落數為30～300的平板進行計數，然后求其平均值作為活菌數。(5)實驗結束后對所使用的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理，防止污染環(huán)境和感染操作者本身。答案：(1)“目的菌”選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)減少增加(4)稀釋涂布平板活菌計數30～300(5)滅菌12．某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數，請回答與此實驗相關的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。(2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是____________________________________________________________。(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種________作為對照進行實驗。(4)培養(yǎng)20h后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細菌。一般說來，菌落總數越多，湖水遭受細菌污染的程度越____________。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐________________細菌，這種培養(yǎng)基被稱為________________。答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)無菌水(4)多高(5)鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基13．為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作。回答下列問題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_________________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數分別為39、38和37。據此可得出每升水樣中的活菌數為_________________。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是________________________________________________________________。(3)示意圖A和B中，__________________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的__________的含量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高__________的利用率。解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計數法的計算公式估算水樣中的活菌數：eq\f(C,V)×Meq\b\lc\(\rc\)(\a\vs4\al\co1(\f(接種計數結果平均值,接種體積)×稀釋倍數))＝eq\f(38,mL)×100(2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌體的數目逐漸減少，以便得到菌落。(3)由題圖可知B圖為平板劃線法接種的結果(菌落相對均勻分布)。(4)震蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進好氧型微生物的生長；另外震蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率。答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3．8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質題組41．取少量酵母菌液放入血球計數板直接記數，測得的數目是()A．活細胞數B．死細胞數C．菌落數D．細胞總數解析：顯微鏡直接計數法的缺點就是不能區(qū)分活菌和死菌。答案：D2．在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只篩選出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有()①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基被污染③由于操作失誤④沒有設置對照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④答案：A3．關于土壤取樣的敘述錯誤的是()A．土壤取樣，應選取肥沃、濕潤的土壤B．先鏟去表層土3cm左右，再取樣C．取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D．應在火焰旁稱取土壤答案：C4．土壤取樣時最好選擇哪種環(huán)境中的土壤做實驗()A．街道旁B．花盆中C．農田中D．菜園里解析：因為取樣要在肥沃、濕潤的土壤，農田土壤較硬且因噴灑農藥，導致微生物種類少，而菜園有中落葉爛葉形成腐殖土，富含纖維素。答案：D5．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水答案：A6．下列關于統(tǒng)計菌落數目的方法的敘述，不正確的是()A．采用平板計數法獲得的菌落數往往少于實際的活菌數B．當樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落C．為了保證結果準確，一般采用密度較大的平板進行計數D．在某一濃度下涂布三個平板，若三個平板統(tǒng)計的菌落數差別不大，則應以它們的平均值作為統(tǒng)計結果解析：當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目低。一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數，密度過大會使計數結果偏小，影響結果的準確性。涂布3個平板，作為重復組，取其平均值作為統(tǒng)計結果能增強試驗的說服力與準確性。答案：C7．將細菌放在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，它會繁殖并形成菌落(如下圖)。某實驗小組想檢驗兩種抗生素的殺菌作用，下列哪個實驗方案最合適()解析：本題的關鍵在于設計對照實驗，要檢驗A、B兩種抗生素的殺菌作用，則需要設計兩個實驗組，一個是菌液加抗生素A，另一組是菌液加抗生素B，為了更好觀察實驗效果，還需設置一個對照組，即只有菌液，不加抗生素。答案：C8．下列有關土壤中微生物的分離與計數的說法中，錯誤的是()。A．因為土壤中各類微生物的數量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數進行分離B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍不同C．如果得到了2個或2個以上菌落數目在30～300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落解析：樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落的數目。實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落在30～300之間適于計數的平板。測定土壤中細菌的數量，一般選用104、105和106倍的稀釋液；測定放線菌的數量一般選用103、104和105倍的稀釋液；測定真菌的數量一般選用102、103和104倍的稀釋液。將菌液稀釋相同的倍數，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數目，從而說明選擇培養(yǎng)基的篩選作用。答案：D9．“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗中以土壤中的細菌為研究對象，要達到的目的是()①從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌②從土壤中分離出能夠分解氨的細菌③統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌④統(tǒng)計所取土壤樣品中究竟有多少分解尿素的細菌A．①③B．②④C．①②D．③④解析：從土壤中分離出分解尿素的細菌并對其計數，統(tǒng)計的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細菌，用公式“每克樣品中菌株數＝(C/V)×M”進行推測。其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)、M代表稀釋倍數。答案：A10．在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實驗用氮源除含尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于()A．空白對照B．自身對照C．相互對照D．條件對照解析：本實驗甲組為實驗組，乙組為對照組，給實驗組某種處理，給對照組另一條件的處理，為條件對照。答案：D11．需要在火焰旁操作的有()A．土壤取樣B．稀釋土壤溶液C．涂布平板D．微生物的培養(yǎng)答案：BC12．下列關于微生物分離和培養(yǎng)的有關敘述，正確的是()A．微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B．測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法C．分離土壤中不同的微生物，要采用相同的稀釋度D．分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法而一般不用活菌計數法；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數在30～300間的平板進行計數；分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。答案：BD13．某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數。請回答與此實驗相關的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。答案：氮源(碳源不作要求)碳源無機鹽水(2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是____________________________________________________。答案：高壓蒸汽滅菌(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于____________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種________作為對照進行實驗。答案：恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細菌。一般說來，菌落總數越多，湖水遭受細菌污染的程度越____________。答案：多高(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐________________細菌，這種培養(yǎng)基被稱為________________。答案：鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基14．下面是某同學做自生固氮菌分離實驗的方案和觀察結果：(注：自生固氮菌能以空氣中的氮氣為氮源)表1培養(yǎng)基的基本配方組分NaNO3KH2PO4KClMgSO4FeSO4蔗糖瓊脂蒸餾水含量2g1gggg30g15g1000mL實驗目的：略實驗材料和用具：略實驗方法和步驟：(1)接種。①接種前，準備好盛有上述配方的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)皿中并滅菌，供實驗用。②取10g土壤，放在無菌研缽中，注入5mL蒸餾水，并用無菌玻璃棒攪拌均勻，備用。③將接種環(huán)放在酒精燈的火焰上滅菌。將培養(yǎng)皿蓋輕輕放在桌面上，手拿培養(yǎng)皿，將接種環(huán)放在培養(yǎng)基邊緣處冷卻。然后，用接種環(huán)沾取少許泥漿，輕輕地點接在培養(yǎng)基的表面上，共點接15～20處。④接種后，輕輕地蓋上培養(yǎng)皿蓋，將培養(yǎng)皿放在實驗桌上。(2)培養(yǎng)。將接種的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內，在28～30℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。(3)觀察。3～4d后，取出培養(yǎng)皿，仔細觀察培養(yǎng)基上稀泥漿周圍出現的黏液。黏液最初為無色透明，之后為乳白色，最后變?yōu)楹稚?。這表明含有自生固氮菌。(4)鏡檢：略該實驗方案和觀察結果中有幾處明顯錯誤，請指出錯誤并改正。(至少三處)(1)錯誤：_____________________________________________________，應改為：_______________________________________________________。(2)錯誤：_________________________________________________________，應改為：__________________________________________________________。(3)錯誤：__________________________________________________________應改為：_________________________________________________________。解析：該實驗在操作過程中，有如下需注意的地方：(1)本實驗為自主固氮菌的分離實驗，所以培養(yǎng)液中不應當再含有N元素；(2)在本實驗操作中，應當嚴格做好無菌操作，所以應當使用無菌水，培養(yǎng)皿蓋也不能放在桌面上；(3)實驗步驟中沒有標注實驗內容，接種人的姓名和接種日期。答案：(1)培養(yǎng)基中含有NaNO3不含氮的鈉鹽(2)接種②中使用蒸餾水無菌水(3)接種③中將培養(yǎng)皿蓋放在桌面上略微打開培養(yǎng)皿蓋(4)接種④中未填寫實驗內容、接種人的姓名和接種日期并在頂蓋上寫明實驗內容、接種人的姓名和接種日期(在接種步驟④后面加上)(任選三點填寫)題組51.可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是()。A.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析:細菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨會使培養(yǎng)基的堿性增強,pH升高。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細菌后,如果pH升高,指示劑變紅,則說明該細菌能產生脲酶分解尿素。答案:A2.關于微生物的培養(yǎng),下列敘述錯誤的是()。A.細菌一般在30~37℃的溫度下培養(yǎng)1~2dB.放線菌一般在25~28℃的溫度下培養(yǎng)5~7dC.霉菌一般在25~28℃的溫度下培養(yǎng)3~4dD.不同種類的微生物,一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間解析:不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和時間。答案:D3.在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源),以分離出能分解尿素的細菌,這種加入尿素的培養(yǎng)基在功能上屬于()。A.選擇培養(yǎng)基 B.固體培養(yǎng)基C.液體培養(yǎng)基 D.半固體培養(yǎng)基解析:題中的培養(yǎng)基能分離出以尿素為唯一氮源的細菌,故從功能上講是一種選擇培養(yǎng)基。答案:A4.需要在火焰旁操作的有()。①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培養(yǎng)A.①②③④⑤ B.②③④⑤C.③④⑤ D.②③④解析:除了土壤取樣和微生物的培養(yǎng)不便于在火焰旁進行外,其他均要在火焰旁進行,以防止雜菌污染。答案:D5.以下關于分解尿素的細菌的說法,正確的是()。A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B.以尿素作為唯一的碳源C.環(huán)境中含有大量的尿素誘導該細菌產生了分解尿素的特性D.以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)該菌后不會使酚紅指示劑變紅解析:A項:酶具有專一性,分解尿素的細菌之所以能分解尿素是因為能合成分泌脲酶。B項:該菌能以葡萄糖作為碳源。C項:環(huán)境中含有大量的尿素對分解尿素的性狀起了選擇作用而非誘導作用。D項:該菌產生脲酶把尿素分解為氨后,使pH升高,酚紅指示劑變紅,但添加酸堿緩沖劑后,阻止了pH的升高,因此培養(yǎng)基不再使酚紅指示劑變紅。答案:D6.稀釋涂布平板法分離分解尿素的細菌時使用的涂布器應保存在體積分數為70%的酒精中,取出后又要放在酒精燈火焰上引燃,這兩步分別屬于什么技術?()A.滅菌、滅菌 B.消毒、消毒C.滅菌、消毒 D.消毒、滅菌解析:消毒和滅菌是不同的。往往消毒比較溫和,僅僅消滅危害健康的致病菌;而滅菌就比較強烈,如高壓蒸汽、灼燒等,它是殺死一切菌。因此本題前者屬消毒,后者屬滅菌。答案:D7.通常用來作為菌種鑒定的重要依據是()。A.菌落 B.細菌形態(tài)C.細菌體積 D.細菌結構解析:細菌個體非常小,不易直接觀察,而不同細菌菌落的形態(tài)特征不同,且可用肉眼觀察,常作為鑒定菌種的依據。答案:A8.下列關于微生物分離和培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()。A.微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行消毒B.測定土壤樣品中的細菌數目,常用菌落計數法C.分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度D.分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一氮源解析:微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行滅菌處理,要將所有微生物殺死;當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌;土壤中各類微生物的數量是不同的,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進行分離,同時還應當有針對性地提供選擇培養(yǎng)條件。答案:A9.測定土壤中不同微生物的數量,要選用不同倍數的稀釋液進行平板培養(yǎng),請選出培養(yǎng)細菌時所用的稀釋倍數()。①102②103③104④105⑤106A.①②③ B.②③④C.③④⑤ D.①④⑤解析:土壤中細菌的數量非常多,一般選取的稀釋倍數比較高。答案:C10.實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應,用3種細菌在事先準備好的瓊脂平板上畫3條等長的平行線(3條線均與圖中的鏈霉素帶接觸),將平板置于37℃條件下恒溫培養(yǎng)3天,結果如下圖所示。從實驗結果分析,以下敘述不正確的是()。A.鏈霉素能阻止結核菌的生長B.鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人解析:從圖中可以看出,這是含有鏈霉素的選擇培養(yǎng)基,接種的3種細菌中,霍亂菌和結核菌都可以被殺滅,并且鏈霉素對結核菌殺滅的有效程度大于霍亂菌。而傷寒菌照常生長不受影響,所以選項D錯誤。答案:D11.下列有關土壤中微生物的分離與計數的說法,錯誤的是()。A.因為土壤中各類微生物的數量不同,所以,為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量,選用的稀釋范圍不同C.如果得到了3個或3個以上菌落數目在30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數目,說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落解析:樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落的數目。實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得菌落在30~300之間適于計數的平板。測定土壤中細菌的數量,一般選用104、105和106倍的稀釋液;測定放線菌的數量一般選用103、104和105倍的稀釋液;測定真菌的數量,一般選用102、103和104倍的稀釋液。將菌液稀釋相同的倍數,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數目,從而說明選擇培養(yǎng)基的篩選作用。答案:D12.馬丁培養(yǎng)基是實驗室常用的培養(yǎng)基之一。下表為馬丁培養(yǎng)基的化學成分,據此回答下列問題。成分含量成分含量KH2PO4·3H2Og葡萄糖1gMgSO4·7H2Og蛋白胨g%孟加拉紅溶液mL瓊脂~2g2%去氧膽酸鈉溶液2mLH2O100mL鏈霉素溶液(1×104μ/mL)mL—(1)該培養(yǎng)基中加入了鏈霉素,能抑制細菌和放線菌,但真菌可以在上面生長,因此培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基。(2)葡萄糖能給微生物生長提供和。(3)蛋白胨能給微生物生長提供和。(4)培養(yǎng)基中KH2PO4·3H2O可給微生物提供含的無機鹽。(5)瓊脂的作用是作為。解析:鏈霉素能抑制細菌和放線菌生長,真菌可以在上面生長,因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基。葡萄糖是一種含碳的有機物,既可給微生物提供碳源,又可給微生物提供能源。該培養(yǎng)基蛋白胨可以給微生物提供氮源和維生素。答案:(1)選擇(2)碳源能源(3)氮源維生素(4)K、P(5)凝固劑13.探究如何從土壤中分離自生固氮菌并計數。實驗原理:農田的表層土壤中,自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿,接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下,只有自生固氮菌才能生長繁殖。材料用具:農田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9mL無菌水的大試管若干、無菌移液管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90mL無菌水的錐形瓶、酒精燈、恒溫箱。方法步驟:(1)倒平板。分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板,應在操作。(2)制備土壤稀釋液。取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無菌移液管吸取上清液1mL,轉至9mL無菌水的大試管中,依次稀釋到107倍稀釋度。為實現無菌操作,試管口和移液管應在離火焰cm處。(3)涂布。按照由107~103稀釋度的順序分別吸取mL進行平板涂布,每個稀釋度下,無氮培養(yǎng)基應至少涂布個平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布個平板。(4)培養(yǎng)。放入恒溫箱內,在適宜溫度條件下培養(yǎng)3~4d。一般每隔h統(tǒng)計一次,選取時的記錄作為結果,這樣可以防止。(5)細菌的計數。當菌落數目穩(wěn)定時,選取菌落數在的平板進行計數。如果測試的平均值為50,則每克樣品中的菌株數是。(稀釋度是105)(6)預期結果。相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(填“多于”或“少于”)無氮培養(yǎng)基上的數目。理由是。解析:要分離自生固氮菌,采用選擇培養(yǎng)基分離的方法,缺乏氮源的培養(yǎng)基可用來分離自生固氮微生物,而其他微生物因缺乏氮源不能生長。實驗步驟一般是:配制無氮培養(yǎng)基→滅菌→倒平板→系列稀釋→涂布平板→培養(yǎng)→觀察并計數。實驗中要注意無菌操作和設計對照等。答案:(1)酒精燈火焰旁(2)1~2(3)31(4)24菌落數目穩(wěn)定因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的數目(5)30~3005×107(6)多于無氮培養(yǎng)基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類的生存14.某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到了能高效降解化合物A的細菌(“目的菌”)。請分析回答下列問題。(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的,實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是。(3)培養(yǎng)若干天后,應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數量。(4)可采用的方法將“目的菌”接種到固體培養(yǎng)基上,通過法對“目的菌”的數量進行統(tǒng)計,通常需要對菌落數為的平板進行計數。(5)實驗結束時,使用過的培養(yǎng)基應該進行處理后,才能倒掉。解析:(1)培養(yǎng)基中加入的磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素,不能作為碳源和氮源,可推測加入的化合物A提供微生物生存所需的碳源和氮源,這樣可以篩選出能夠降解化合物A的微生物,這種培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。(2)化合物A提供氮源和碳源,振蕩可以增加培養(yǎng)基中氧氣的含量,說明該微生物的代謝類型為異養(yǎng)需氧型。(3)培養(yǎng)若干天應該向消耗化合物A的培養(yǎng)基中加入新的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數量逐漸增多。(4)可采用稀釋涂布平板法將“目的菌”接種到固體培養(yǎng)基上,通過計數平板中的菌落數推算出活菌的個數,通常應該對菌落數為30~300的平板進行計數,然后求其平均值作為活菌數。(5)實驗結束后對所使用的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理,防止污染環(huán)境和感染操作者本身。答案:(1)“目的菌”選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)減少增加(4)稀釋涂布平板活菌計數30~300(5)滅菌題組61.在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗時，甲組實驗用只含尿素作氮源的培養(yǎng)基，乙組實驗用另加入硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作、培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于（）。A．空白對照B．標準對照C．相互對照D．條件對照2.下列有關微生物培養(yǎng)與應用的說法正確的是（）A.分離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源B.大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配置和純化大腸桿菌兩個階段C．平板劃線接種法中劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連D．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)3.若將酵母菌的線粒體DNA進行誘變，使其線粒體DNA不再具有自我復制能力，再將此突變的酵母菌接種在含有葡萄糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可觀察到的現象是（）A．因為子代中沒有線粒體，所以無菌落形成B．酵母菌仍能進行有機物的氧化分解，所以有小菌落形成C．因為線粒體DNA對真核細胞不重要，所以有正常大小的菌落形成D．因為酵母菌對糖類的徹底氧化分解可不依賴線粒體，所以有正常大小的菌落形成4.下列關于生物技術實踐的說法正確的是（）A．蛋白質通過凝膠時，相對分子質量較大的移動速度較慢B．細菌能在液體培養(yǎng)基中以有絲分裂方式擴增C．自養(yǎng)微生物能在缺少有機碳源的培養(yǎng)基上生長D．參與果酒和果醋發(fā)酵的微生物都含有多種細胞器5.下列關于微生物的培養(yǎng)和應用的敘述，錯誤的是（）A．通過消毒不能殺死物體內所有的微生物B．根據培養(yǎng)皿中菌落數可以準確計算樣品中含有的活菌實際數目C．平板劃線法不可用于微生物的計數D．使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經過滅菌后才能丟棄6.鑒定分解纖維素的微生物要用剛果紅染色，加入剛果紅的操作可在（）①制備培養(yǎng)基時②梯度稀釋時③倒平板時④涂布時⑤培養(yǎng)基上長出菌落時A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤7.測定飲用水中大腸桿菌的數目可用()A.選擇培養(yǎng)基B.鑒別培養(yǎng)基C.基礎培養(yǎng)基D.加富培養(yǎng)基8.下列幾個圖形中（數字代表劃線區(qū)域順序，箭頭代表劃線方向），正確的平板劃線操作是（）ABCD9.消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒處理①皮膚②飲用水③牛奶④注射器⑤培養(yǎng)皿⑥接種環(huán)⑦培養(yǎng)基⑧果汁⑨醬油⑩手術刀A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩C．①②③④⑤⑥⑧D．以上全部10.通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細菌和放線菌的生長，在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌的生長。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出()A.大腸桿菌B.霉菌C.放線菌D.固氮細菌11.下表為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答成分含量成分含量NaNO33gFeSO4gK2HPO41g(CH2O)30g瓊脂15gH2O1000mLMgSO4·7H2Og青霉素萬單位(1)該培養(yǎng)基中的碳源是，依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。不論何種培養(yǎng)基，各成分在溶化分裝前，要進行的是。(2)若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，應除去的物質是，加入的物質是。(3)為檢測尿素分解菌的存在與否，還應加入，將呈反應。(4)細菌種群進化過程中，起主要作用的變異來源是。12.人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染．土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源．現對土壤中的這類細菌進行分離實驗，請回答下列問題：（1）分離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作，包括和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有（答2種）．（2）采用法將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)．在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在旁進行操作．接種后的培養(yǎng)皿于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)．（3）用培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．若培養(yǎng)基中存在有脲酶的細菌，其菌落周圍會出現紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產生的，遇培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑產生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力．（4）與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數．A．多B．少C．相等D．幾乎為零．參考答案1.【答案】D【解析】甲、乙組的自變量為是否僅以尿素作為培養(yǎng)基的氮源，因變量為是否特異性地分離出分解尿素的細菌，甲組為實驗組，乙雖然對培養(yǎng)基作了特殊的處理（另加入硝酸鹽），但這種處理起對照作用，叫條件對照。2.【答案】B【解析】3.【答案】B【解析】4.【答案】C【解析】5.【答案】B【解析】6.【答案】C【解析】7.【答案】B【解析】將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現黑色?？梢愿鶕囵B(yǎng)基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數量。伊紅美藍培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。8.【答案】C【解析】9.【答案】A【解析】10.【答案】A【解析】固氮微生物的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長；加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細菌和放線菌，則可收獲霉菌；加入酚的培養(yǎng)基使細菌和霉菌不能正常生長，而放線菌卻能利用酚作原料合成自身產物。11.【答案】(1)(CH2O)選擇調整pH(2)青霉素和NaNO3尿素(3)酚紅指示劑紅色(4)基因突變【解析】12.【答案】（1）接種工具和培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌、干熱滅菌（2）稀釋涂布平板法酒精燈火焰旁倒置（3）鑒別氨越強（4）B【解析】（1）用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具和培養(yǎng)基等都必須是無菌的；常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌．（2）采用稀釋涂布平板法將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)；為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁操作，為防止水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴，培養(yǎng)皿需要倒置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．（3）酚紅指示劑可用于鑒別微生物，所以含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基；尿素被分解成氨可使PH呈堿性，變色區(qū)域越大，說明其分解能力越強．（4）以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數少，因為其他微生物不能在該環(huán)境中生存．題組71．除了高溫加熱以外，其它滅菌方法還有()。A．紫外線照射 B．真空包裝C．用保鮮膜密閉 D．添加防腐劑解析此題考查滅菌的方法。滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細菌的蛋白質變性，核酸受破壞，是滅菌方法。答案A2．可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是()。A．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入剛果紅試劑D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析尿素在尿素分解菌的作用下分解產生氨和CO2，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，酚紅指示劑變紅。答案A3．下列關于微生物分離和培養(yǎng)的有關敘述，錯誤的是()。A．微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B．測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法C．分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D．分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法而一般不用活菌計數；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落在30～300間的平板進行計數；分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。答案A4．下列說法錯誤的是()。A．因為土壤中各類微生物的數量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數進行分離B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍不同C．只有得到了3個或3個以上菌落數目在30～300的平板，才說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數明顯大于選擇培養(yǎng)基的數目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落解析樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數目，土壤中各類微生物數量不同，含量最多的是細菌，大約占70%～90%，其次是放線菌，最少是真菌，所以為獲得不同類型的微生物，再按不同稀釋倍數進行分離；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數目在30～300的平板，就說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數；驗證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用，需設立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，若后者上的菌落數明顯大于前者，說明前者具有篩選作用。答案C5．人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源?，F對土壤中的這類細菌進行分離實驗，請回答下列問題。(1)分離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作，滅菌要求殺死體內外所有微生物，包括________和________。(2)雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、________________________________。(3)要將土壤樣品進行________操作，然后再進行接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在________旁進行操作。接種后的培養(yǎng)皿__________于37攝氏度的恒溫箱中培養(yǎng)。(4)用____________________培養(yǎng)基篩選出分解尿素細菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(5)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數________。 A．多 B．少C．相等 D．幾乎為零答案(1)芽孢孢子(2)氮源、碳源、無機鹽、生長因子(3)系列稀釋酒精燈火焰倒置(4)用尿素作為唯一氮源選擇(5)B課堂小結題組81．在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時又能抑制或者阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱做()。A．鑒別培養(yǎng)基 B．加富培養(yǎng)基C．選擇培養(yǎng)基 D．基礎培養(yǎng)基解析選擇培養(yǎng)基可選擇目標微生物，同時抑制或殺死其他微生物。答案C2．平板劃線法和稀釋涂布平板法是純化微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是 ()。A．都要將菌液進行一系列的梯度稀釋B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)D．都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落解析平板劃線法不需要進行梯度稀釋，稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。答案D3．本課題以土壤中的細菌為研究對象，要達到的目的是()。①從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌②從土壤中分離出能夠分解氨的細菌③統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌④統(tǒng)計所取土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌A．①③B．②④C．①②D．③④解析從土壤中分離分解尿素的細菌并對其計數，統(tǒng)計的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細菌，用公式“每克樣品中菌落數＝(C/V)×M”進行推測，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積/mL，M代表稀釋倍數。答案A4．下列關于土壤取樣的敘述，錯誤的是()。A．土壤取樣，應選取肥沃、濕潤的土壤B．先鏟去表層土3～8cm左右，再取樣C．取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D．應在火焰旁稱取土壤解析土壤取樣過程中，為防止雜菌污染，取樣用的小鐵鏟和信封在使用前必須滅菌。答案C5．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數，在對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確的是()。A．涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數是230B．涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數是215和260，取平均值238C．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是210、240和250，取平均值233解析在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值。答案D6．(10分)如表所示為分離分解尿素的細菌所用的培養(yǎng)基配方：KH2PO4gNa2HPO4gMgSO4·7H2Og葡萄糖g尿素g瓊脂g自來水定容至1000mL請根據以上配方，回答下列問題。(1)該培養(yǎng)基含有微生物所需要的________類營養(yǎng)物質。其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素。(2)該培養(yǎng)基按物理性質劃分是________培養(yǎng)基；按培養(yǎng)基的作用劃分是選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是________________________________________________________________________。(3)在該培養(yǎng)基中，可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解，依據的原理是_________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若用該培養(yǎng)基來鑒定某種細菌是否能夠分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入________指示劑，尿素被分解后指示劑變________色。(5)某同學嘗試使用罐頭瓶在常溫下制作果酒，開始時向消過毒的罐頭瓶中加入了新鮮的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是________________________________________________________________________，添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供_____________________。答案(1)4(2)固體該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖(3)在細菌分解尿素的過程中，細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高(4)酚紅紅(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌進行無氧呼吸產生酒精)所需的各種營養(yǎng)物質(或碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子)7．(10分)急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌、病毒通過消化道進入人體導致的。因此檢驗飲用水的細菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施，請回答下列與檢驗飲用水有關的問題。(1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數量，這種方法稱為__________________。如圖所示的四種菌落分布圖中，不可能是用該方法得到的是______。(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時是否需要設置對照組？______。為什么？______________________________________________________________。(3)如分別取mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數為______。(4)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產酸產氣，現提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？_____________________________