專(zhuān)題07 綠葉中色素的提取和分離(解析版)

專(zhuān)題07綠葉中色素的提取和分離教材實(shí)驗(yàn)回顧1?提取綠葉中的色素原理：綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇中。步驟取材：稱(chēng)取5g新鮮綠葉研磨：剪碎葉片，放入研缽中，加少許二氧化硅和碳酸鈣，再加入10mL無(wú)水乙醇，迅速、充分研磨過(guò)濾：漏斗基部放一塊單層尼龍布，將研磨液迅速倒入玻璃漏斗中進(jìn)行過(guò)濾收集：用小試管收集色素濾液，及時(shí)將試管口用棉塞塞嚴(yán)2?分離綠葉中的色素原理：不同色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，反之則慢。步驟剪濾紙條濾紙條鉛筆畫(huà)線剪濾紙條濾紙條鉛筆畫(huà)線<制備濾紙條在距濾紙條去角的一端1cm處用鉛筆畫(huà)一條細(xì)的橫線取濾液：用毛細(xì)吸管吸取少量濾液<J畫(huà)濾液細(xì)線畫(huà)線：沿鉛筆線均勻地畫(huà)出一條細(xì)線重復(fù)畫(huà)線：待濾液干后，重復(fù)畫(huà)細(xì)線1?2次分離綠葉中的色素：將適量的層析液倒入試管中，將濾紙條（有濾液細(xì)線的一端朝下）輕輕插入層析液中，隨后用棉塞塞緊試管口觀察并記錄結(jié)果：濾紙條上出現(xiàn)4條色素帶

色素種類(lèi)色素顏色色素含量溶解度擴(kuò)散速度胡蘿卜素橙黃色最少最高鍛快葉黃素黃色較少較高較快「葉綠素找藍(lán)綠色最多較低較慢-葉綠素b黃緑色較多最低最慢3.實(shí)驗(yàn)中的材料試劑及操作目的過(guò)程操作內(nèi)容操作目的提取色素材料葉片要新鮮、深綠使濾液中色素含量高試劑二氧化硅利于綠葉的充分研磨碳酸鈣防止研磨過(guò)程中色素被破壞無(wú)水乙醇溶解色素關(guān)鍵步驟研磨要迅速、充分提取較多色素、防止溶劑揮發(fā)盛濾液的試管口加棉塞防止溶劑揮發(fā)用單層尼龍紗布過(guò)濾而不用濾紙防止色素吸附在濾紙上分離色素試劑層析液分離色素關(guān)鍵步驟濾紙條的一端剪去兩角防止層析液在濾紙條的邊緣處擴(kuò)散過(guò)快濾液細(xì)線重復(fù)畫(huà)若干次，且要求細(xì)、直、齊使分離的色素帶清晰濾液細(xì)線不能觸及層析液防止色素溶解到層析液中實(shí)驗(yàn)考點(diǎn)講解考點(diǎn)一：實(shí)驗(yàn)的基本原理和過(guò)程分析例一、甲、乙、丙、丁四位同學(xué)，在利用新鮮綠色菠菜葉為實(shí)驗(yàn)材料，用層析法進(jìn)行葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于操作不同，得到了四種不同的層析結(jié)果(如圖所示)。下列分析錯(cuò)誤的是( )點(diǎn)樣處 距腐E|l點(diǎn)樣處 距離點(diǎn)樣處 距腐E|l點(diǎn)樣處 距離色索和時(shí)含董L1L11I.r.點(diǎn)樣處 距離甲可能誤用蒸餾水作提取液和層析液乙可能是因?yàn)檠心r(shí)加入無(wú)水乙醇過(guò)多丙可能是正確操作得到的理想結(jié)果丁可能是研磨時(shí)未加入CaCO3【答案】C【解析】甲圖中看不到色素帶，葉綠體中的色素屬于有機(jī)物，易溶于酒精等有機(jī)溶劑，難溶于水，所以出現(xiàn)甲圖結(jié)果可能是誤用蒸餾水作提取液和層析液導(dǎo)致的，A項(xiàng)正確；乙圖中每種色素都有，但含量很少，可能是無(wú)水乙醇過(guò)多，色素濃度太低導(dǎo)致的,B項(xiàng)正確；丙圖中每種色素都有，但是胡蘿卜素和葉黃素含量較多，葉綠素a和葉綠素b含量較少，這不是正確操作得到的理想結(jié)果，C項(xiàng)錯(cuò)誤；丁結(jié)果中葉綠素a和葉綠素b含量很少，可能是研磨時(shí)未加入CaCO3，破壞了葉綠素類(lèi)物質(zhì)造成的，因?yàn)榕c類(lèi)胡蘿卜素相比，葉綠素更易受到破壞，D項(xiàng)正確?？键c(diǎn)二：實(shí)驗(yàn)異?，F(xiàn)象分析例一.在做提取和分離葉綠體中的光合色素實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲、乙、丙、丁四位同學(xué)對(duì)相關(guān)試劑的使用情況如下表所示(“＋”表示使用，“－”表示未使用)，其余操作均正常，他們所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果依次應(yīng)為( )試劑甲乙丙丁無(wú)水乙醇一+++水+一一一CaCO3++一+SiO2+++一BB.②④①③D.③②①④①②③④C.④②③①【答案】B【解析】甲同學(xué)由于沒(méi)有加入提取劑無(wú)水乙醇，所以提取液中不會(huì)出現(xiàn)色素，色素分離的結(jié)果是②；乙同學(xué)操作正確，色素分離后得到的色素帶有四條，與④情況相符；丙同學(xué)由于未加CaCO3,所以葉綠素含量減少，所得到的色素帶中兩條葉綠素帶比正常的色素帶要窄，對(duì)應(yīng)①；丁同學(xué)由于未加SiO2，導(dǎo)致葉片研磨不充分，最終導(dǎo)致各種色素的含量均減少，對(duì)應(yīng)③。易錯(cuò)點(diǎn)擊破易錯(cuò)點(diǎn)一收集到的濾液綠色過(guò)淺的原因分析未加石英砂（二氧化硅），研磨不充分。使用放置數(shù)天的綠葉，濾液色素（葉綠素）太少。一次加入大量的無(wú)水乙醇，色素溶液濃度太低（正確做法：分次加入少量無(wú)水乙醇提取色素）。未加碳酸鈣或加入過(guò)少，色素分子被破壞。易錯(cuò)點(diǎn)二濾紙條色素帶重疊：沒(méi)經(jīng)干燥處理，濾液細(xì)線不能達(dá)到細(xì)、齊、直的要求，使色素?cái)U(kuò)散不一致。易錯(cuò)點(diǎn)三濾紙條看不到色素帶：①忘記畫(huà)濾液細(xì)線；②濾液細(xì)線接觸到層析液，且時(shí)間較長(zhǎng)，色素全部溶解到層析液中。易錯(cuò)點(diǎn)四濾紙條只呈現(xiàn)胡蘿卜素、葉黃素色素帶：忘記加碳酸鈣導(dǎo)致葉綠素被破壞或所用葉片為“黃葉”。實(shí)練挑戰(zhàn)挑戰(zhàn)真題：（2016?全國(guó)卷II,4）關(guān)于高等植物葉綠體中色素的敘述，錯(cuò)誤的是（）葉綠體中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑乙醇中構(gòu)成葉綠素的鎂可以由植物的根從土壤中吸收通常，紅外光和紫外光可被葉綠體中的色素吸收用于光合作用黑暗中生長(zhǎng)的植物幼苗葉片呈黃色是由于葉綠素合成受阻引起的【答案】C【解析】葉綠體中的色素能夠溶解在包括無(wú)水乙醇在內(nèi)的有機(jī)溶劑中，A正確；葉綠素分子中含有鎂元素，可以離子狀態(tài)由植物的根從土壤中吸收，進(jìn)而參與葉綠素的合成,B正確；一般情況下，光合作用所利用的光都是可見(jiàn)光，可見(jiàn)光不包括紅外光和紫外光,C錯(cuò)誤；葉綠素的合成需要光，黑暗中生長(zhǎng)的植物幼苗，因沒(méi)有光照而導(dǎo)致葉綠素合成受阻，使類(lèi)胡蘿卜素的顏色顯現(xiàn)出來(lái)，因而葉片呈黃色，D正確。

（2016?江蘇卷，17）下列用鮮菠菜進(jìn)行色素提取、分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（ ）應(yīng)該在研磨葉片后立即加入CaCO3，防止酸破壞葉綠素即使菜葉剪碎不夠充分，也可以提取出4種光合作用色素為獲得10mL提取液，研磨時(shí)一次性加入10mL乙醇研磨效果最好層析完畢后應(yīng)迅速記錄結(jié)果，否則葉綠素條帶會(huì)很快隨溶液揮發(fā)消失【答案】B【解析】CaCO3可防止酸破壞葉綠素，應(yīng)在研磨時(shí)加入，A錯(cuò)誤；即使菜中葉剪碎不夠充分，但色素并沒(méi)有減少，也可提取出4種光合作用色素，B正確；由于研磨時(shí)乙醇揮發(fā)，故為獲得10mL提取液，研磨時(shí)加入多于10mL乙醇，C錯(cuò)誤；葉綠素條帶不會(huì)隨層析液揮發(fā)消失，D錯(cuò)誤。（2015?江蘇卷，21）為研究高光強(qiáng)對(duì)移栽幼苗光合色素的影響，某同學(xué)用乙醇提取葉綠體色素，用石油醚進(jìn)行紙層析，下圖為濾紙層析的結(jié)果（I、II、III、W為色素條帶）。下列敘述正確的是（多選）（）強(qiáng)光照導(dǎo)致了該植物葉綠素含量降低類(lèi)胡蘿卜素含量增加有利于該植物抵御強(qiáng)光照色素III、W吸收光譜的吸收峰波長(zhǎng)不同畫(huà)濾液線時(shí)，濾液在點(diǎn)樣線上只能畫(huà)一次【答案】.ABC【解析】本題主要考查光合色素的提取與分離，意在考查生物實(shí)驗(yàn)的相關(guān)知識(shí)，考查理解能力和綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析問(wèn)題的能力，難度較大。A項(xiàng)對(duì)，由圖示可知，強(qiáng)光下，III、W表示的葉綠素色素帶變窄，說(shuō)明葉綠體含量降低；B項(xiàng)對(duì)，類(lèi)胡蘿卜素可保護(hù)葉綠素免受強(qiáng)光降解；C項(xiàng)對(duì)，111是葉綠素a,W是葉綠素b,都是主要吸收藍(lán)紫光和紅光，但吸收光譜的吸收峰波長(zhǎng)不同；D項(xiàng)錯(cuò)，畫(huà)濾液線時(shí)，濾液在點(diǎn)樣線上畫(huà)2—3次。挑戰(zhàn)模擬題：一、單選題在綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，要使色素帶清晰又整齊，下列哪項(xiàng)措施與之無(wú)關(guān)（ ）A．定性濾紙要干燥B．剪去濾紙條一端的兩角C．濾液細(xì)線要畫(huà)得細(xì)、齊、直、均勻D．蓋上培養(yǎng)皿蓋【答案】D【解析】使色素帶清晰整齊的措施有定性濾紙要干燥，剪去濾紙條一端的兩角，畫(huà)濾液細(xì)線要畫(huà)得細(xì)、齊、直、均勻，不讓層析液觸及濾液細(xì)線，這些都是為了保證同種色素隨層析液擴(kuò)散時(shí)速度一致，色素帶整齊明顯。蓋上培養(yǎng)皿蓋是為了防止層析液揮發(fā)，與色素帶清晰、整齊無(wú)關(guān)。在“提取和分離葉綠體中的色素”實(shí)驗(yàn)中，正確的操作順序應(yīng)該是( )進(jìn)行紙層析-制取濾液-在濾紙條上畫(huà)線-將實(shí)驗(yàn)材料研磨制取濾液-進(jìn)行紙層析-在濾紙條上畫(huà)線-取濾液-再畫(huà)線將實(shí)驗(yàn)材料剪碎、研磨-在濾紙條上畫(huà)線-制取濾液-進(jìn)行紙層析將實(shí)驗(yàn)材料剪碎、研磨-制取濾液-在濾紙條上畫(huà)線-進(jìn)行紙層析【答案】D【解析】首先應(yīng)是提取色素，排除A項(xiàng)。制備濾液時(shí)，需要先將實(shí)驗(yàn)材料剪碎、研磨，故答案為Do下列對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)的描述中，錯(cuò)誤的是( )分離葉綠體中的色素時(shí)，不同色素隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度不同用低倍鏡觀察不到紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原過(guò)程觀察葉片細(xì)胞的葉綠體時(shí)，先在低倍鏡下找到葉片細(xì)胞再換高倍鏡觀察甲基綠染液可使人口腔上皮細(xì)胞的細(xì)胞核呈綠色【答案】B【解析】紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原過(guò)程可以通過(guò)低倍鏡觀察到，因?yàn)橐号莸捏w積比較大。如圖表示某同學(xué)做“綠葉中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)裝置，下列與之有關(guān)的敘述中，錯(cuò)誤的是( )A.應(yīng)向培養(yǎng)皿中倒入層析液應(yīng)將濾液滴在a處實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)是得到四個(gè)不同顏色的同心圓(近似圓形)實(shí)驗(yàn)得到的若干個(gè)同心圓中，最小的一個(gè)圓呈橙黃色

【答案】D【解析】圖示為綠葉中色素分離的實(shí)驗(yàn)裝置，所以應(yīng)把層析液倒入培養(yǎng)皿中，燈芯起到傳遞層析液的作用，把色素滴到a處讓其在定性濾紙上擴(kuò)散，四個(gè)圓圈中擴(kuò)散最慢的即為圓圈最小的，它應(yīng)該是呈黃綠色的葉綠素bo某生物興趣小組想探究蔬菜不同葉片在葉綠素含量上的區(qū)別，選擇了新鮮菠菜的“綠葉”、“嫩黃葉”，做“綠葉中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖，下列說(shuō)法正確的是（）選頃能紙條編號(hào)判刪證幗甲葉綠素出帶和葉媒艦b帶②撤黃町組甲葉綠盂也帶祁葉罄盍b曙③上起的籌一和第三眾留進(jìn)葉沮乙上起的第二枷幣三祭帶A．①B．②C．③D．④【答案】A【解析】綠葉較嫩黃葉含有更多的葉綠素a和葉綠素b。在濾紙條上，上起的第三和第四條帶分別代表葉綠素a和葉綠素b,綠葉組中葉綠素a和葉綠素b所代表的兩條色素帶更寬。如圖表示新鮮菠菜葉中四種色素的相對(duì)含量及在濾紙條上的分離情況。下列說(shuō)法不正確的是（A．乙在濾紙條上最寬是（A．乙在濾紙條上最寬)B．四種色素均可溶于有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇中C．四種色素在層析液中溶解度最大的是甲D．發(fā)黃的菠菜葉中色素含量顯著減少的是甲和乙【答案】C【解析】乙的相對(duì)含量最大，故其最寬。色素在層析液中的溶解度不同，溶解度大的在濾紙條上擴(kuò)散速度快，所以丁的溶解度最大，擴(kuò)散最快；菠菜葉發(fā)黃是由于葉綠體中的葉綠素被破壞而呈現(xiàn)類(lèi)胡蘿卜素的顏色所致。在圓形濾紙的中央點(diǎn)上，對(duì)葉綠體的色素濾液進(jìn)行色素分離，會(huì)得到近似同心環(huán)的四個(gè)色素圈，排列在最外圈的色素所呈現(xiàn)的顏色及其吸收的光分別是（ ）A．藍(lán)綠光，紅光，藍(lán)紫光B．黃綠色，紅光C．橙黃色，藍(lán)紫光D．黃色，紅光和藍(lán)紫光【答案】C【解析】最外圈的是胡蘿卜素，它的顏色為橙黃色，主要吸收藍(lán)紫光。某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進(jìn)行了紅光照射光吸收測(cè)定和色素層析條帶分析（從上至下），與正常葉片相比，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是（ ）A．光吸收差異顯著，色素帶缺第2條B．光吸收差異不顯著，色素帶缺第2條C．光吸收差異顯著，色素帶缺第3條D．光吸收差異不顯著，色素帶缺第3條【答案】B【解析】胡蘿卜素和葉黃素主要吸收藍(lán)紫光，所以缺少葉黃素時(shí)對(duì)紅光的吸收差異不顯著；葉綠體中色素層析后色素帶從上到下依次為胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b,所以本題正確答案為B。9?生態(tài)學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，植物群落中的類(lèi)胡蘿卜素和葉綠素的比率（黃/綠比率）與群落的P（光合作用）/R（呼吸作用）比率呈現(xiàn)一定的關(guān)系，這種關(guān)系如下圖所示。以下判斷正確的是（）蹇胡戒卜盤(pán)仙專(zhuān)畫(huà)（樹(shù)腺比琳］A．有機(jī)物積累逐漸增多，黃/綠比率有增高趨向B．人工林年平均黃/綠比率過(guò)高時(shí)，應(yīng)適當(dāng)采伐農(nóng)作物栽培時(shí)選擇b點(diǎn)比a點(diǎn)更適宜在作物收獲季節(jié)，群落的P/R值可能在a點(diǎn)【答案】B【解析】有機(jī)物積累逐漸增多，黃/綠比率有降低趨向，A錯(cuò)誤；人工林年平均黃/綠比率過(guò)高時(shí)，P/R過(guò)低，應(yīng)適當(dāng)采伐，B正確；據(jù)圖可知，a點(diǎn)的黃/綠比率小，P/R比率較大，光合作用明顯大于呼吸作用，農(nóng)作物栽培時(shí)應(yīng)該主要考慮作物的生長(zhǎng)，點(diǎn)比b點(diǎn)好，C錯(cuò)誤；農(nóng)作物在收獲季節(jié)，葉片變黃，光合作用減弱，黃/綠比率較大，P/R比率較小，應(yīng)該在b點(diǎn)附近，D錯(cuò)誤。二、非選擇題分別在A、B、C三個(gè)研缽中加2克剪碎的新鮮菠菜綠葉，并按下表所示添加試劑，經(jīng)研磨、過(guò)濾得到三種不同顏色的溶液，即：深綠色、黃綠色（或褐色）、幾乎無(wú)色。處理ABC沁（少量）+++|CaCOsC少塑）十十95%ZLig（lC羸升）-4-+蒸雷水（10亳升）4-一注2心十卅表赤趴 表示不抑試回答下列問(wèn)題：（1）A處理得到的溶液顏色是 ，原因是 （2）B處理得到的溶液顏色是 ，原因是 。（3）C處理得到的溶液顏色是 ，原因是 。【答案】(1)黃綠色部分葉綠素受到破壞(2)幾乎無(wú)色葉綠素不溶于水(3)深綠色大量葉綠素溶于95%的乙醇中【解析】(1)因?yàn)锳中未加CaCO3,使其中的部分葉綠素受到破壞，所以溶液顏色為黃綠色。⑵B中加入了SiO2和CaCO3，研磨出的葉綠素等色素不能溶解于蒸餾水中，故溶液幾乎無(wú)色O(3)C中加入了SiO2和CaCO3,研磨出的葉綠素等色素能溶解于有機(jī)溶劑95%的乙醇中，故溶液為深綠色。綠葉中色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇中，因此實(shí)驗(yàn)室中用無(wú)水乙醇提取綠葉中的色素，能否用丙酮作為溶劑替代無(wú)水乙醇呢？請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，探究丙酮是否可以作為提取綠葉中色素的有機(jī)溶劑。材料用具：新鮮的綠色葉片，干燥的定性濾紙，尼龍布，丙酮，無(wú)水乙醇，層析液，二氧化硅，碳酸鈣等。方法步驟：提取綠葉中的色素。取2個(gè)研缽編號(hào)為1、2,分別在兩個(gè)研缽中加入5g剪碎的葉片，少許 ，1號(hào)研缽中加入 ，2號(hào)研缽中加入 ，迅速充分研磨后，進(jìn)行過(guò)濾，得濾液。制備濾紙條。將干燥的定性濾紙剪成2個(gè)略小于試管長(zhǎng)與直徑的濾紙條，編號(hào)1、2，一端剪去兩角，并在距該端1cm處用鉛筆畫(huà)線。 。用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線均勻畫(huà)一條直的濾液細(xì)線，分離綠葉中的色素。觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果預(yù)測(cè)及分析：2號(hào)濾紙條與1號(hào)均出現(xiàn)色素帶，并分離明顯，說(shuō)明 o ，說(shuō)明丙酮作為提取綠葉中色素的有機(jī)溶劑效果不佳。 【答案】方法步驟：(1)二氧化硅和碳酸鈣10mL無(wú)水乙醇10mL丙酮(3)畫(huà)濾液細(xì)線待濾液干后，再重復(fù)畫(huà)一兩次結(jié)果預(yù)測(cè)及分析：丙酮可以作為提取綠葉中色素的有機(jī)溶劑2號(hào)濾紙條與1號(hào)相比，現(xiàn)象不如1號(hào)明顯2號(hào)濾紙條無(wú)色素帶，說(shuō)明丙酮不能作為提取綠葉中色素的有機(jī)溶劑【解析】在提取綠葉中的色素時(shí)常選用有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇，丙酮能否代替無(wú)水乙醇作為提取色素的溶劑，需要通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探究。根據(jù)綠葉中色素的提取和分離的實(shí)驗(yàn)原理，可分別用無(wú)水乙醇和丙酮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，對(duì)比分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出相應(yīng)的結(jié)論。韭黃是利用綠色韭菜在避光條件下培養(yǎng)出來(lái)的。某同學(xué)利用所學(xué)知識(shí)研究韭黃葉片呈黃色的原因，其方法步驟如下：步驟一提取葉片中的色素1．分別稱(chēng)取5g韭菜葉片和韭黃葉片，剪碎，放入兩個(gè)研缽中。2．向兩個(gè)研缽中各加入少許二氧化硅，再加入10mL無(wú)水乙醇，進(jìn)行迅速、充分地研磨。3．將研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一塊單層尼龍布)中進(jìn)行過(guò)濾。將濾液收集到試管中，及時(shí)