GB/T 14926.56-2008實驗動物狂犬病病毒檢測方法

犐犆犛６５．０２０．３０

犅４４

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜１４９２６．５６—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５６—２００１

實驗動物狂犬病病毒檢測方法

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２００８１２１０發(fā)布２００９０３０１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜１４９２６．５６—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１４９２６《實驗動物》共５４個部分，為不同微生物和病毒檢測技術(shù)方法。

本部分自實施之日起代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５６—２００１《實驗動物狂犬病病毒檢測方法》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１４９２６．５６—２００１相比主要技術(shù)差異如下：

ａ）刪除原標準中“２引用標準”內(nèi)容；

ｂ）對原標準中“３原理”中所有內(nèi)容改為“在微孔板上預包被純化狂犬病毒抗原，使免疫反應在

固相載體上進行。當被檢血清中有狂犬病病毒抗體存在時，則與孔壁上的抗原形成抗原抗體

復合物，再與抗犬ＩｇＧ酶標記物反應，最后通過測定酶作用底物催化后的產(chǎn)物，進行定性

檢測”；

ｃ）刪除原標準中所有關(guān)于血凝抑制試驗的試劑、方法及結(jié)果判定；

ｄ）對原標準中所有關(guān)于酶聯(lián)免疫吸附試驗的內(nèi)容進行修改，包括試劑、方法及結(jié)果判定等；

ｅ）對原標準中“６結(jié)果判定”中增加了“６．３基礎級犬群體免疫抗體合格率：免疫抗體合格率＝

（被檢動物抗體陽性數(shù)／被檢動物總數(shù)）×１００％?；A級犬群體免疫抗體合格率達到７０％以

上可判為該犬群免疫合格”內(nèi)容。

本部分由全國實驗動物標準化技術(shù)委員會提出并歸口。

本部分由全國實驗動物標準化技術(shù)委員會負責起草。

本部分主要起草人：田克恭、陳西釗、曹振、王傳彬、何秀敏、湯漢文。

本部分所代替標準的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１４９２６．５６—２００１。

Ⅰ

書

犌犅／犜１４９２６．５６—２００８

實驗動物狂犬病病毒檢測方法

１范圍

ＧＢ／Ｔ１４９２６的本部分規(guī)定了狂犬病病毒（ＲＶ）的檢測方法、試劑等。

本部分適用于犬ＲＶ的檢測。

２原理

在微孔板上預包被純化狂犬病毒抗原，使免疫反應在固相載體上進行。當被檢血清中有狂犬病病

毒抗體存在時，則與孔壁上的抗原形成抗原抗體復合物，再與抗犬ＩｇＧ酶標記物反應，最后通過測定酶

作用底物催化后的產(chǎn)物，進行定性檢測。

３主要試劑和器材

３．１試劑

犬狂犬病毒ＩｇＧ抗體檢測試劑盒（定性），包括：

ａ）預包被狂犬病毒抗原的微孔板；

ｂ）狂犬病毒ＩｇＧ酶標記物；

ｃ）狂犬病毒ＩｇＧ陽性對照；

ｄ）狂犬病毒ＩｇＧ臨界對照；

ｅ）狂犬病毒ＩｇＧ陰性對照；

ｆ）顯色液Ａ：磷酸氫＝鈉檸檬酸緩沖液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ５．０）１０００ｍＬ，３０％過氧化氫Ｈ２Ｏ２

（ＭＷ３４．０）３．５ｍＬ；

ｇ）顯色液Ｂ：檸檬酸１．０５２ｇ，乙二胺四乙酸二鈉（ＥＤＴＡＮａ２）０．１８６ｇ，四甲基聯(lián)苯胺（ＴＭＢ）

０．２５ｇ，二甲基亞砜（ＤＭＳＯ）８．０ｍＬ，純化水９９２ｍＬ；

ｈ）終止液：９８％硫酸２７．８ｍＬ，純化水９７２．２ｍＬ；

ｉ）１０倍濃縮洗滌液：ＰＢＳ（０．１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．２～７．４）９９５ｍＬ，吐溫２０，５ｍＬ；

ｊ）樣品稀釋液：硼酸鹽緩沖液（０．０１ｍｏｌ／ＬｐＨ８．０）９５６．０ｍＬ，甘油（ＭＷ９２．０９）４０．０ｍＬ，酪蛋白

（ｃａｓｅｉｎ）１０％硫柳汞鈉溶液２．０ｍＬ，吐溫２０，１．０ｍＬ１％酚紅溶液，１．０ｍＬ。

試劑在使用前應恢復至室溫（１８℃～２５℃）。

３．２器材

器材包括：

ａ）精密移液器１０μＬ～１００μＬ；