標準解讀
GB/T 16285-1996 是一項中國國家標準,全稱為《食品中葡萄糖的測定方法——酶-比色法和酶-電極法》。該標準規(guī)定了兩種檢測食品中葡萄糖含量的方法:酶-比色法和酶-電極法,旨在為食品工業(yè)、檢驗機構及相關部門提供統(tǒng)一、準確的葡萄糖檢測手段,以確保食品安全與質量控制。
酶-比色法
該方法基于葡萄糖在特定條件下與酶(如葡萄糖氧化酶)反應產生可檢測顏色變化的原理。具體步驟包括:
- 樣品處理:首先對食品樣本進行適當?shù)那疤幚?,去除可能干擾檢測的雜質。
- 酶促反應:將處理后的樣品與葡萄糖氧化酶及過氧化物酶等酶混合,在適宜的pH和溫度下反應,促使葡萄糖轉化為其他產物,同時生成過氧化氫。
- 顯色反應:加入顯色劑(如4-氨基安替比林和鐵氰化鉀),過氧化氫與顯色劑反應形成有色化合物。
- 比色測定:通過分光光度計測量該有色化合物在特定波長下的吸光度,吸光度的大小與樣品中葡萄糖的濃度成正比,從而計算出葡萄糖含量。
酶-電極法
這種方法利用固定化酶膜電極來直接測量葡萄糖。主要步驟包括:
- 傳感器準備:使用含有葡萄糖氧化酶的電極,該電極能選擇性地催化葡萄糖反應,并產生與葡萄糖濃度相關的電信號。
- 樣品測試:將處理好的樣品直接施加到電極表面,葡萄糖在酶的作用下發(fā)生氧化反應,伴隨電子轉移產生電流。
- 信號讀取:通過測量產生的電流強度,根據預設的標準曲線或方程,即可確定樣品中葡萄糖的濃度。
標準適用范圍
本標準適用于各類食品中葡萄糖含量的測定,但不包括高度復雜的樣品或者存在大量干擾物質的情況,這些情況下可能需要額外的凈化步驟或采用其他更特異的方法。
注意事項
- 實驗過程中需嚴格控制實驗條件,如溫度、pH值,以確保檢測結果的準確性與重復性。
- 使用前應校準儀器,確保測量的準確性。
- 對于不同類型的食品樣品,可能需要調整前處理步驟,以有效提取并去除干擾成分。
該標準為食品行業(yè)提供了科學、規(guī)范的葡萄糖檢測方法,有助于保障食品質量和安全評估的準確性。
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文檔簡介
ICS67.040X04中華人民共和國國家標準GB/T16285-1996食品中葡萄糖的測定方法酶-比色法和酶-電極法Methodfordeterminationofglucoseinfood-Enzyme-colorimetricmethodandenzyme-electrodemethod1996-04-10發(fā)布1996-12-01實施國家技術監(jiān)督局發(fā)布
日次前言·…………·范圍……2酶-比色法3酶-電極法附錄A(標準的附錄)前萄糖氧化酶、過氧化物酶的技術要求、試驗方法及判定規(guī)則附錄B(標準的附錄)葡萄糖氧化酶酶膜圈性能判定方法
GB/T16285-1996食品中葡萄糖的測定方法,一般采用《國際食糖分析方法統(tǒng)一委員會》規(guī)定的"蘭-埃農法"(LaneandEynon'smethod)和“姆松-華爾格法”(MunsonandWalker'smethod).即菲林氏溶液氧化還原滴定法。此法雖沿用已久,但測定結果只是近似值。因使用菲林氏溶液滴定葡萄糖(還原糖)時,其他具有還原能力的單糖會干擾測定結果。本標準采用的酶-比色法和酶-電極法是在檢索了近20年107篇園外文獻的基礎上,經過反復實驗、驗證而制定的。酶-比色法和酶-電極法使用的葡萄糖氧化酶(GOD)具有專-性,只能催化葡萄糖水溶液中的βD-葡萄糖起反應(被氧化),因此測定結果是真實值。本標準的酶-比色法為仲裁法;酶-電極法為快速法。本標準的附錄A、附錄B都是標準的附錄。本標準由全國食品工業(yè)標準化技術委員會提出并歸口。本標準起草單位:中國農墾北方食品監(jiān)測中心(酶-比色法)山東省科學院生物研究所(酶-電極法)本標準經全國食品工業(yè)標準化技術委員會秘書處審核。本標準主要起草人:張宗城、劉寧、馮德榮、孫士青、宋家華、郝煜
中華人民共和國國家標準食品中葡萄糖的測定方法GB/T16285-1996酸-比色法和酶-電極法Methodfordeterminationofglucoseinfood-Enzyme-colorimetricmethodandenzyme-electrodemethod1范園本標準規(guī)定了用酶-比色法和酶-電極法測定食品中葡萄糖的方法本標準適用于各類食品中葡萄糖的測定;亦適用于食品中其他組分轉化為葡萄糖的測定.本標準酶-比色法的最低檢出限量為0.01″g(葡萄糖)/mL(試液),酶-電極法的最低檢出限量為1.0mg/100mL.酶比色法2.1原理葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧條件下,催化β-D-葡萄糖(葡萄糖水溶液狀態(tài))氧化,生成D-葡萄糖酸-8-內酯和過氧化氫。受過氧化物酶(POD)催化,過氧化氫與4-氮基安替比林和苯酚生成紅色配亞胺。在波長505㎡m處測定配亞胺的吸光度,計算食品中葡萄糖的含量GODC.Hi:O:+0:二2C.HieO,+H.O.2.2試劑2.2.1組合試劑盒1號瓶:內含0.2mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH=7.0)100mL,其中4-氨基安替比林為0.00154mol/L2號瓶;內含0.022mol/L萊酚溶液100mLi3號瓶:內含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)400U(活力單位)過氧化物酶(辣根.peroxidase)1000U(活力單位)。1、2、3號瓶須在4℃左右保存。2.2.2酶試劑溶液:將1號瓶和2號瓶的物質充分混合均勾,再將3號瓶的物質溶解其中,輕輕搖動(勿劇烈搖動),使葡萄糖氧化酶和過氧化物酶完全溶解。此溶液須在4℃左右保存,有效期1個月。2.2.30.085mol/L亞鐵氰化鉀溶液;稱取3.7g亞鐵氰化鉀K.Fe(CN)。·3H.O,GB1273,分析純,溶于100mL重蒸窗水中,播勺。2.2.40.25mol/L硫酸鋅溶液;稱取7.7g硫酸鋅(ZnSO,·7H.O,GB666,分析純)溶于100mL重蒸德水中,搖勾。2.2.50.1mol/L氫氧化鈉溶液;稱取4g氫氧化鈉(GB629,分析純)溶于1000mL重蒸水中,
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