標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 16285-1996 是一項(xiàng)中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，全稱為《食品中葡萄糖的測(cè)定方法——酶-比色法和酶-電極法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了兩種檢測(cè)食品中葡萄糖含量的方法：酶-比色法和酶-電極法，旨在為食品工業(yè)、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)及相關(guān)部門提供統(tǒng)一、準(zhǔn)確的葡萄糖檢測(cè)手段，以確保食品安全與質(zhì)量控制。

酶-比色法

該方法基于葡萄糖在特定條件下與酶（如葡萄糖氧化酶）反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)顏色變化的原理。具體步驟包括：

  1. 樣品處理：首先對(duì)食品樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)那疤幚?，去除可能干擾檢測(cè)的雜質(zhì)。
  2. 酶促反應(yīng)：將處理后的樣品與葡萄糖氧化酶及過(guò)氧化物酶等酶混合，在適宜的pH和溫度下反應(yīng)，促使葡萄糖轉(zhuǎn)化為其他產(chǎn)物，同時(shí)生成過(guò)氧化氫。
  3. 顯色反應(yīng)：加入顯色劑（如4-氨基安替比林和鐵氰化鉀），過(guò)氧化氫與顯色劑反應(yīng)形成有色化合物。
  4. 比色測(cè)定：通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)量該有色化合物在特定波長(zhǎng)下的吸光度，吸光度的大小與樣品中葡萄糖的濃度成正比，從而計(jì)算出葡萄糖含量。

酶-電極法

這種方法利用固定化酶膜電極來(lái)直接測(cè)量葡萄糖。主要步驟包括：

  1. 傳感器準(zhǔn)備：使用含有葡萄糖氧化酶的電極，該電極能選擇性地催化葡萄糖反應(yīng)，并產(chǎn)生與葡萄糖濃度相關(guān)的電信號(hào)。
  2. 樣品測(cè)試：將處理好的樣品直接施加到電極表面，葡萄糖在酶的作用下發(fā)生氧化反應(yīng)，伴隨電子轉(zhuǎn)移產(chǎn)生電流。
  3. 信號(hào)讀取：通過(guò)測(cè)量產(chǎn)生的電流強(qiáng)度，根據(jù)預(yù)設(shè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線或方程，即可確定樣品中葡萄糖的濃度。

標(biāo)準(zhǔn)適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中葡萄糖含量的測(cè)定，但不包括高度復(fù)雜的樣品或者存在大量干擾物質(zhì)的情況，這些情況下可能需要額外的凈化步驟或采用其他更特異的方法。

注意事項(xiàng)

  • 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，如溫度、pH值，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。
  • 使用前應(yīng)校準(zhǔn)儀器，確保測(cè)量的準(zhǔn)確性。
  • 對(duì)于不同類型的食品樣品，可能需要調(diào)整前處理步驟，以有效提取并去除干擾成分。

該標(biāo)準(zhǔn)為食品行業(yè)提供了科學(xué)、規(guī)范的葡萄糖檢測(cè)方法，有助于保障食品質(zhì)量和安全評(píng)估的準(zhǔn)確性。


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  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替，建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16285-2008
  • 1996-04-10 頒布
  • 1996-12-01 實(shí)施
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ICS67.040X04中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16285-1996食品中葡萄糖的測(cè)定方法酶-比色法和酶-電極法Methodfordeterminationofglucoseinfood-Enzyme-colorimetricmethodandenzyme-electrodemethod1996-04-10發(fā)布1996-12-01實(shí)施國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

日次前言·…………·范圍……2酶-比色法3酶-電極法附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)前萄糖氧化酶、過(guò)氧化物酶的技術(shù)要求、試驗(yàn)方法及判定規(guī)則附錄B(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)葡萄糖氧化酶酶膜圈性能判定方法

GB/T16285-1996食品中葡萄糖的測(cè)定方法，一般采用《國(guó)際食糖分析方法統(tǒng)一委員會(huì)》規(guī)定的"蘭-埃農(nóng)法"（LaneandEynon'smethod）和“姆松-華爾格法”（MunsonandWalker'smethod）.即菲林氏溶液氧化還原滴定法。此法雖沿用已久，但測(cè)定結(jié)果只是近似值。因使用菲林氏溶液滴定葡萄糖(還原糖)時(shí)，其他具有還原能力的單糖會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果。本標(biāo)準(zhǔn)采用的酶-比色法和酶-電極法是在檢索了近20年107篇園外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)、驗(yàn)證而制定的。酶-比色法和酶-電極法使用的葡萄糖氧化酶(GOD)具有專-性，只能催化葡萄糖水溶液中的βD-葡萄糖起反應(yīng)(被氧化）,因此測(cè)定結(jié)果是真實(shí)值。本標(biāo)準(zhǔn)的酶-比色法為仲裁法;酶-電極法為快速法。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)農(nóng)墾北方食品監(jiān)測(cè)中心(酶-比色法)山東省科學(xué)院生物研究所(酶-電極法）本標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)秘書(shū)處審核。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張宗城、劉寧、馮德榮、孫士青、宋家華、郝煜

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中葡萄糖的測(cè)定方法GB/T16285-1996酸-比色法和酶-電極法Methodfordeterminationofglucoseinfood-Enzyme-colorimetricmethodandenzyme-electrodemethod1范園本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用酶-比色法和酶-電極法測(cè)定食品中葡萄糖的方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中葡萄糖的測(cè)定；亦適用于食品中其他組分轉(zhuǎn)化為葡萄糖的測(cè)定.本標(biāo)準(zhǔn)酶-比色法的最低檢出限量為0.01″g(葡萄糖)/mL(試液),酶-電極法的最低檢出限量為1.0mg/100mL.酶比色法2.1原理葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧條件下，催化β-D-葡萄糖(葡萄糖水溶液狀態(tài))氧化，生成D-葡萄糖酸-8-內(nèi)酯和過(guò)氧化氫。受過(guò)氧化物酶(POD)催化，過(guò)氧化氫與4-氮基安替比林和苯酚生成紅色配亞胺。在波長(zhǎng)505㎡m處測(cè)定配亞胺的吸光度，計(jì)算食品中葡萄糖的含量GODC.Hi:O:+0：二2C.HieO,+H.O.2.2試劑2.2.1組合試劑盒1號(hào)瓶：內(nèi)含0.2mol/L磷酸鹽緩沖溶液（pH=7.0)100mL,其中4-氨基安替比林為0.00154mol/L2號(hào)瓶；內(nèi)含0.022mol/L萊酚溶液100mLi3號(hào)瓶：內(nèi)含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)400U（活力單位）過(guò)氧化物酶(辣根.peroxidase）1000U(活力單位)。1、2、3號(hào)瓶須在4℃左右保存。2.2.2酶試劑溶液：將1號(hào)瓶和2號(hào)瓶的物質(zhì)充分混合均勾，再將3號(hào)瓶的物質(zhì)溶解其中，輕輕搖動(dòng)(勿劇烈搖動(dòng))，使葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化物酶完全溶解。此溶液須在4℃左右保存，有效期1個(gè)月。2.2.30.085mol/L亞鐵氰化鉀溶液;稱取3.7g亞鐵氰化鉀K.Fe(CN)?！?H.O,GB1273,分析純，溶于100mL重蒸窗水中，播勺。2.2.40.25mol/L硫酸鋅溶液;稱取7.7g硫酸鋅(ZnSO,·7H.O,GB666,分析純）溶于100mL重蒸德水中，搖勾。2.2.50.1mol/L氫氧化鈉溶液;稱取4g氫氧化鈉(GB629,分析純）溶于1000mL重蒸水中，

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