標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 17999.5-1999是一項(xiàng)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，全稱為《SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法對(duì)無(wú)特定病原體（Specific Pathogen Free, 簡(jiǎn)稱SPF）雞進(jìn)行檢測(cè)的詳細(xì)操作流程、要求及判定標(biāo)準(zhǔn)，旨在確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性，適用于SPF雞群中特定抗原或抗體的檢測(cè)。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽：

  1. 范圍：明確了本標(biāo)準(zhǔn)適用的對(duì)象是SPF雞，以及采用ELISA技術(shù)檢測(cè)的目標(biāo)，包括但不限于病毒、細(xì)菌等病原體的特異性抗體或抗原。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)時(shí)需要參考的其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)，這些文件對(duì)于理解與執(zhí)行測(cè)試至關(guān)重要。

  3. 術(shù)語(yǔ)和定義：解釋了在標(biāo)準(zhǔn)中使用的專業(yè)術(shù)語(yǔ)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、無(wú)特定病原體雞（SPF雞）等，確保讀者對(duì)基本概念有共同的理解。

  4. 試劑與材料：詳細(xì)說(shuō)明了進(jìn)行ELISA測(cè)試所需的各種試劑、抗體、酶標(biāo)板、洗液等的規(guī)格要求和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，確保實(shí)驗(yàn)材料的可靠性和一致性。

  5. 儀器設(shè)備：列舉了實(shí)施ELISA測(cè)試所必需的儀器設(shè)備，如酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)等，并對(duì)其性能指標(biāo)提出了具體要求。

  6. 樣品采集與處理：規(guī)定了如何從SPF雞采集血樣或其他樣本，以及樣本預(yù)處理的步驟，確保樣品的代表性且不影響檢測(cè)結(jié)果。

  7. 試驗(yàn)步驟：詳述了ELISA測(cè)試的操作流程，包括固相載體的準(zhǔn)備、樣本和標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋、加樣、孵育、洗滌、加入酶標(biāo)抗體、底物顯色、讀取吸光度等關(guān)鍵步驟。

  8. 結(jié)果判斷：提供了判斷陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法、臨界值確定原則以及結(jié)果解讀規(guī)則，確保檢測(cè)結(jié)果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

  9. 精密度與準(zhǔn)確度：描述了如何評(píng)估試驗(yàn)重復(fù)性、再現(xiàn)性以及與參考方法比較的準(zhǔn)確性，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方法的可靠性。

  10. 試驗(yàn)報(bào)告：規(guī)定了試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包含的信息，如樣品信息、試驗(yàn)條件、結(jié)果數(shù)據(jù)、結(jié)論及必要的解釋等，確保信息的完整性和透明度。


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  • 被代替
  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替，建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17999.6-2008
  • 1999-11-10 頒布
  • 2000-04-01 實(shí)施
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GB/T 17999.5-1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)_第1頁(yè)
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TCS.65.020.30B41中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17999.5-1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)SPFchickennzyme-linkedimmunosorbentassay1999-11-10發(fā)布2000-04-01實(shí)施國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

GB/T17999.5-1999酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是國(guó)外監(jiān)測(cè)SPF雞淋巴白血病病毒感染的通用方法。我國(guó)建立的淋巴白血病ELISA方法敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好,已廣泛用于商品種雞場(chǎng)淋巴白血病的凈化和SPF雞場(chǎng)淋巴白血病病毒感染的監(jiān)測(cè),本標(biāo)準(zhǔn)在此基礎(chǔ)上.規(guī)定了SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。SPF雞微生物學(xué)質(zhì)量控制國(guó)家系列標(biāo)準(zhǔn).包括SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)總則和9種SPF雞微生物學(xué)檢測(cè)方法。本標(biāo)準(zhǔn)為《SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)》。SPF雞微生物學(xué)檢測(cè)方法還包括以下部分：GB/T17999.1—1999SPF雞紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn);GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗(yàn)；GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗(yàn)；GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)；GB/T17999.6—1999SPF雞旺敏感試驗(yàn);GB/T17999.7—1999SPF雞雞白痛沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)：GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗(yàn)；GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部、國(guó)家科學(xué)技術(shù)部提出本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陳德威、張冰、趙立紅、黃進(jìn)、李軍。

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17999.5—-1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)SPFchicken--Enzyme-linkedimmunosorbentassay1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)所用試劑、材料,操作程序及結(jié)果判定等本標(biāo)準(zhǔn)適用于SPF雞感染淋巴白血病病毒后的群特異性抗原的監(jiān)測(cè)。2原理檢測(cè)SPF雞蛋清中禽白血病病毒主要群特異性抗原P27的方法為雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)先用抗P27抗體包被酶標(biāo)板，然后與蛋清作用，蛋清中的P27與包被抗體結(jié)合，洗去未結(jié)合的物質(zhì)。再加人日RP-兔抗P27抗體，作用后洗去未結(jié)合的酶標(biāo)物。加入底物溶液，出現(xiàn)顏色變化。顏色變化的速度及程度與樣品中P27的含量有關(guān)。3試劑和器材3.1試劑3.1.1包被抗體(免抗P27IG）.3.1.2陽(yáng)性抗原(P27)。3.1.3陰性抗原。3.1.4被檢蛋清。3.1.5HRP-兔抗P27。3.1.6包被液：0.05mol/L、pH9.6碳酸鹽緩沖液配制：碳酸鈉1.59g·碳酸氫鈉2.93g.蒸水加至1000mL3.1.7洗滌液：H7.4.PBS-TWeen20配制：0.01mol/L、pH7.4PBS1000ml,吐溫-200.5mL。3.1.8底物溶液；H5.0磷酸鹽-檸檬酸緩沖液-OPD-H.O。配制：0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液25.7mL.0.1mol/L檸檬酸溶液24.3mL·蒸雷水50mL·鄰苯二胺(OPD)40mg.30%H.O.0.15mL.3.1.9終止液：2mol/L硫酸。3.2器材3.2.1酶標(biāo)板3.2.2移液器3.2.3恒溫培養(yǎng)箱3.2.4ELISA讀數(shù)儀。保作程

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