GB/T 18644-2002豬囊尾蚴病診斷技術

IcS.11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T18644一2002豬囊尾蜘病診斷技術Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華人民共；和國發(fā)布國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18644-2002豬囊尾勤病(cysticercosiscellulosae）(俗稱豬囊蟲?。怯杉纳谌梭w小腸內的豬帶緣蟲（taeniasolium)的幼蟲(cysticercuscellulosae)所引起的,是一種危害嚴重的人獸互源性寄生蟲病。世界動物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeintentionaldesEpizootic(法).〇IE將該病列為B類疾病。目前,該病還廣泛存在于發(fā)展中國家，不僅嚴重地影響著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，造成巨大的經濟損失.而且還威脅著人類身體健康.乃至生命。因此，1993年聯(lián)合國衛(wèi)生組織將該病列為需要根除的六大疾病之-褚囊尾蜴病多不表現(xiàn)臨床癥狀。目前，該病的檢疫方法有舌檢查法和免疫學檢查法。前者僅適用于舌上寄生（27%～30%)的病豬。后者包括皮內變態(tài)反應、炭粒凝集試驗、間接紅細胞凝集試驗、補體結合反應、瓊脂擴散試驗、免疫電泳和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等等。其中.ELISA法具有高敏感性和特異性·是最常用的一種方法。本標準從病原分離、鑒定和血清學(ELISA方法)兩方面規(guī)定了豬囊尾蜘病檢查方法，結果更為可靠本標準規(guī)定的ELISA法，適用于感染豬的定性，最早可以檢出感染9天的囊尾勤病豬。也適用于免疫豬群抗體水平的評估。本標準的附錄A為標準的附錄本標準由中華人民共和國農業(yè)部提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術委員會歸口本標準起草單位：吉林農業(yè)大學。本標準主要起草人：韓宇、姜秀云、趙權

中華人民共和國國家標準豬囊尾蜘病診斷技術GB/T18644-2002Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae1范圍本標準規(guī)定了豬囊尾勤病的病原分離與鑒定和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)兩種診斷技術，本標準適用于豬囊尾勤病的診斷和流行病學調查以及檢疫病原分離與鑒定2.1病原分離2.1.1樣品采集采集豬的咬肌、舌肌、內腰肌、隔肌、肋間肌、肩腫肌等·亦可采集腦、心臟、肝臟、肺臟等.2.1.2樣品分離成熟的豬囊尾勤為長楠圓形(6mm～10mm)×5mm],半透明的囊壁內充滿液體,上有一個委粒大小的白色小結節(jié)即為頭節(jié)(scolex)和頸節(jié)(neck)。腦內寄生的則為圓球形8mm～10mm。將上述任何部位的囊尾勤，以手術刀和攝子剝離后，以生理鹽水洗凈,并用濾紙吸干。2.2病原鑒定2.2.1分離樣品的壓片制備以剪刀剪開囊壁，取出完整的頭節(jié)，再以濾紙吸干囊液后，將其置于兩張載玻片之間并壓片,于兩張載玻片間加入1～2滴生理鹽水后置于顯微鏡下鏡檢2.2.2鏡檢以低倍(物鏡8倍、目鏡5倍)觀察囊尾勤頭節(jié)的完整性2.2.3結果判定低倍鏡檢，可見到頭節(jié)的頂部有頂突，頂突上有內外兩圈排列整齊的小鉤，頂突的稍下方有四個均等的圓盤狀吸盤·即判為豬囊尾勤。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）3.1材料準備3.1.1器材ELISA反應板、酶聯(lián)免疫檢測儀、加樣器、洗瓶、10cm×lcm普通濾紙條等3.1.2試劑豬囊尾勤層析抗原、葡萄球菌A蛋白(SPA)辣根過氧化物酶(HRP)標記物(HRP-SPA)、豬囊尾蜘標準陰性和陽性全血濾紙片等。3.1.3被檢豬全血血片將10cmX1cm普通濾紙條的一端標記被檢豬號碼,另一端吸取被檢豬任何部位血液