GB/T 18644-2020豬囊尾蚴病診斷技術(shù)

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18644—2020

代替

GB/T18644—2002

豬囊尾蚴病診斷技術(shù)

Diagnostictechniquesforporcinecysticercosis

2020-12-14發(fā)布2020-12-14實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T18644—2020

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

縮略語

3……………………1

顯微鏡檢查

4………………1

試劑

4.1…………………1

儀器設(shè)備

4.2……………1

蟲體采集

4.3……………2

壓片制備

4.4……………2

顯微鏡檢查

4.5…………………………2

顯微鏡檢查結(jié)果判定

4.6………………2

法

5PCR……………………2

試劑

5.1…………………2

儀器設(shè)備

5.2……………2

引物

5.3…………………3

樣品

5.4…………………3

操作程序

5.5PCR………………………3

擴(kuò)增產(chǎn)物電泳檢測

5.6…………………4

試驗(yàn)成立條件

5.7………………………4

結(jié)果判定

5.8PCR………………………4

間接

6ELISA………………4

試劑

6.1…………………4

儀器設(shè)備

6.2……………4

樣品

6.3…………………5

試驗(yàn)步驟

6.4……………5

試驗(yàn)成立條件

6.5………………………6

結(jié)果判定

6.6ELISA……………………6

7Dot-ABC-ELISA…………………………6

試劑

7.1…………………6

儀器設(shè)備

7.2……………7

樣品

7.3…………………7

試驗(yàn)步驟

7.4……………7

試驗(yàn)成立條件

7.5………………………8

結(jié)果判定

7.6Dot-ABC-ELISA…………8

綜合判定

8…………………8

Ⅰ

GB/T18644—2020

附錄規(guī)范性附錄生理鹽水及豬囊尾蚴頭節(jié)形態(tài)特征

A()……………9

附錄規(guī)范性附錄引物位置溶液配制及電泳結(jié)果

B()PCR、…………10

附錄規(guī)范性附錄試劑及其配制

C()ELISA……………12

附錄資料性附錄豬囊尾蚴重組蛋白的制備

D()TS-CC18…………14

附錄資料性附錄間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的加樣

E()…………………16

附錄資料性附錄豬囊尾蚴和烯醇化酶單克隆抗體的制備

F()TS-CC18…………17

附錄資料性附錄相關(guān)試劑配制及結(jié)果判定

G()Dot-ABC-ELISA…………………20

Ⅱ

GB/T18644—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)代替豬囊尾蚴病診斷技術(shù)與相比除編輯性修

GB/T18644—2002《》,GB/T18644—2002,

改外主要技術(shù)變化如下

,:

范圍部分增加了和技術(shù)見第章

———PCRDot-ABC-ELISA(1);

增加了縮略語部分見第章

———(3);

增加了病原的檢測方法見第章

———PCR(5);

修改了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的檢測抗原和檢測步驟直接對血清樣品進(jìn)行抗體檢測見第章

———,(6,

年版的第章

20023);

增加了檢測循環(huán)抗原的方法見第章

———Dot-ABC-ELISA(7);

增加了綜合判定見第章

———(8);

增加了生理鹽水及豬囊尾蚴頭節(jié)圖片見附錄引物位置溶液配制及電泳圖片見附

———(A),PCR、(

錄試劑及其配制見附錄年版的附錄豬囊尾蚴重組蛋白的

B),ELISA(C,2002A),TS-CC18

制備見附錄間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)加樣示例見附錄豬囊尾蚴和烯醇化

(D),(E),TS-CC18

酶單克隆抗體的制備見附錄相關(guān)試劑配制及結(jié)果判定見附錄

(F),Dot-ABC-ELISA(G)。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人才學(xué)鵬駱學(xué)農(nóng)張少華鄭亞東郭愛疆侯俊玲

:、、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為

:

———GB/T18644—2002。

Ⅲ

GB/T18644—2020

引言

豬囊尾蚴病是由豬帶絳蟲Taeniasolium的幼蟲所引起的一種危害嚴(yán)重的

(porcinecysticercosis)()

人獸共患寄生蟲病世界動物衛(wèi)生組織將該病列為需申報(bào)的疾病之一目前該病廣泛存在于發(fā)展中

。。,

國家而且發(fā)達(dá)國家的病例也有逐年增加的趨勢不僅影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失而且還

,,,,

嚴(yán)重威脅人類健康

。

豬囊尾蚴病的診斷包括病原學(xué)診斷與血清學(xué)診斷病原學(xué)診斷的目的在于確定臨床剖檢樣本中蟲

。

體的形態(tài)特征在顯微鏡下觀察頭節(jié)頂突上有內(nèi)外兩圈排列整齊的小鉤即可判為豬囊尾蚴若囊尾蚴

,,。

主要寄生于肝臟則要注意與亞洲帶絳蟲囊尾蚴相區(qū)別目前該病的生前診斷主要采用血清學(xué)方法

,。,,

所用的抗原有蟲體抗原囊液抗原或分泌代謝抗原等雖然這些抗原的檢測敏感性較高但特異性差而

、,,,

且抗原來源非常有限鑒于以上原因本次對豬囊尾蚴病診斷技術(shù)的修訂除間

。,GB/T18644—2002《》,

接所用抗原改為豬囊尾蚴期特異性基因重組蛋白外還增加了血清循環(huán)抗原

ELISA18ku(TS-CC18),

檢測方法和病原的檢測方法以滿足豬囊尾蚴病流行病學(xué)調(diào)查藥物治療效果評價和動物

(CAg)PCR,、

流通風(fēng)險(xiǎn)評估等不同需求

。

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)提請注意聲明符合本文件時可能涉及到第章間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

,,6

相關(guān)的專利使用

(ELISA)。

本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)對于該專利的真實(shí)性有效性和范圍無任何立場

、。

該專利持有人已向本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)保證他愿意同任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下

,,

就專利授權(quán)許可進(jìn)行談判該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)備案相關(guān)信息可以通過以下

。。

聯(lián)系方式獲得

:

專利持有人姓名才學(xué)鵬張少華景志忠駱學(xué)農(nóng)郭愛疆鄭亞東竇永喜

:、、、、、、。

地址甘肅省蘭州市鹽場堡徐家坪號

:1。

請注意除上述專利外本文件的某些內(nèi)容仍可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專

,。

利的責(zé)任

。

Ⅳ

GB/T18644—2020

豬囊尾蚴病診斷技術(shù)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬囊尾蚴病的顯微鏡檢查聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法法間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)間

、(PCR)、(

接斑點(diǎn)生物素親和素復(fù)合物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷技術(shù)及綜合判定

ELISA)、-(Dot-ABC-ELISA)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬和野豬的囊尾蚴病診斷

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

基因擴(kuò)增領(lǐng)域檢測實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可指南

CNAS-GL029:2