標(biāo)準(zhǔn)解讀

該標(biāo)準(zhǔn)GB/T 18980-2003規(guī)定了乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的檢測方法，具體采用的是免疫親和層析凈化技術(shù)和高效液相色譜法結(jié)合熒光光度法進(jìn)行測定。下面是對該標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的具體說明：

  1. 適用范圍：此標(biāo)準(zhǔn)適用于各類乳制品（包括牛乳、羊乳及其加工而成的乳粉）中黃曲霉毒素M1含量的測定。黃曲霉毒素M1是一種由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物，對人類健康構(gòu)成威脅。

  2. 檢測原理：

    • 免疫親和層析凈化：利用特異性抗體固定在固相載體上，形成免疫吸附柱。樣品經(jīng)過該柱時(shí)，黃曲霉毒素M1會被特異性抗體捕獲而其他雜質(zhì)被洗脫，實(shí)現(xiàn)樣品中黃曲霉毒素M1的高效率純化與濃縮。
    • 高效液相色譜法(HPLC)：凈化后的樣品通過HPLC分離，依據(jù)不同組分在色譜柱中的保留時(shí)間差異，實(shí)現(xiàn)黃曲霉毒素M1與其他成分的分離。
    • 熒光光度法：分離出的黃曲霉毒素M1在特定波長激發(fā)下發(fā)出熒光，通過檢測熒光強(qiáng)度來定量分析其濃度。

  3. 實(shí)驗(yàn)步驟： 包括樣品的前處理、免疫親和柱凈化、HPLC條件設(shè)定（如流動相的選擇、流速、柱溫等）、熒光檢測參數(shù)設(shè)置、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作及樣品測定等詳細(xì)操作流程。

  4. 精密度與準(zhǔn)確度：標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了重復(fù)性和再現(xiàn)性的要求，以及回收率試驗(yàn)來驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度，確保檢測結(jié)果的可靠性。

  5. 限值判定：雖然本標(biāo)準(zhǔn)未直接給出黃曲霉毒素M1的安全限量，但檢測結(jié)果可作為判斷乳和乳粉中黃曲霉毒素M1是否符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)或企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)。

  6. 注意事項(xiàng)：標(biāo)準(zhǔn)中還提及了實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意的事項(xiàng)，如防止樣品污染、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)量控制等，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可比性。


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  • 2003-02-21 頒布
  • 2003-08-01 實(shí)施
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GB/T 18980-2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法_第1頁
GB/T 18980-2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法_第2頁
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GB/T 18980-2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法-免費(fèi)下載試讀頁

文檔簡介

ICS67.100.10X04中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18980--2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M，的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法DeterminationofaflatoxinMcontentinmilkandmilkpowderCleanupbyimmunoaffinitvchromatogaphyanddeterminationbyhigh-performanceliquidchromatigraphyandfluorometer（ISO14501:1998,IDT)2003-02-21發(fā)布2003-08-01實(shí)施華中民共和發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T18980—2003本標(biāo)準(zhǔn)的免疫親和層析凈化一高效液相色譜法等同采用ISO14501:1998《乳和乳粉中黃曲霉毒素M，免疫親和層析凈化高效液相色譜法》。本標(biāo)準(zhǔn)免疫親和層析凈化一熒光光度法快速測定乳和乳粉中黃曲霉毒素M,。本標(biāo)準(zhǔn)中的附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出本標(biāo)準(zhǔn)由全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所、青島出入境檢驗(yàn)檢疫局、國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王品、張鵬、張藝兵、邵明武。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

GB/T18980—2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M，的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法免疫親和層析凈化高效液相色譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于乳、乳粉.以及低脂乳、脫脂乳、低脂乳粉和脫脂乳粉中黃曲霉毒素M，含量的測定乳粉中的坡低檢測限是0.08g/kg.乳中的最低檢測限是0.008gg/L.1.2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)1.2.1黃曲蛋毒素M，含量aflatoxinM，content通過本標(biāo)準(zhǔn)所測定出的本物質(zhì)的質(zhì)量含量。注：黃曲霉毒素M的含量以微克/升（Pg/L)或微克/千克（pg/kg)表示1.3原理試樣通過免疫親和柱時(shí),黃曲霉毒素M被提取。親和柱內(nèi)含有的黃曲霉毒素M，特異性單克隆抗體交聯(lián)在固體支持物上·當(dāng)樣品通過親和柱時(shí).抗體選擇性的與黃曲霉毒素M（抗原)鍵合，形成抗體-抗原復(fù)合體。用水洗柱除去柱內(nèi)雜質(zhì).然后用洗脫劑洗脫吸附在柱上的黃曲霉毒素M.收集洗脫液。用帶有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定洗脫液中黃曲霉毒素M，含量。1.4試劑除非特別聲明，所用試劑為分析純；使用蒸水、去離子水或其他相當(dāng)純度的水。1.4.1免疫親和柱：應(yīng)該含有黃曲霉毒素M，的抗體。親和柱的最大容量不小于100g黃曲霉毒素M（相當(dāng)于50mL濃度為22g/L的試樣),當(dāng)標(biāo)淮溶液含有4g黃曲霉毒素M（相當(dāng)于50mL濃度為80ng/L的試樣)時(shí)回收率不低于80%。應(yīng)該定期檢查親和柱的柱效和回收率,對于每個(gè)批次的親和柱至少檢查一次(見1.4.1.1和1.4.1.2).1.4.1.1柱效檢查用移液管(1.5.4)移取1.0mL的黃曲霉毒素M，儲備液（1.4.5.2)到20mL的錐形試管中（1.5.9)。用恒流的氮?dú)?1.4.3)將液體慢慢吹干，然后用10mL10%的乙腈(1.4.2.2)溶解殘?jiān)?用力搖蕩。將該溶液加人到40mL的水中.充分混勺.全部通過免疫親和柱。按說明書要求使用免疫親和柱淋洗免疫親和柱后，洗脫下黃曲霉毒素M.。將洗脫液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后.用高效液相色譜儀測定免疫親和柱鍵合的黃曲霉毒素M含量。計(jì)算黃曲霉毒素M，的回收率.將其結(jié)果與1.4.1中所要求的指標(biāo)進(jìn)行比較1.4.1.2回收率檢查用移液管(1.5.4)移取0.8mL0.0052g/mL的黃曲霉毒素M，標(biāo)準(zhǔn)工作液(1.4.5.3)到10mL的水中.充分混勾.全部通

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