實驗動物質量控制

實驗動物質量控制第一頁，共二十九頁，2022年，8月28日實驗動物是實驗中的試劑，沒有標準化的實驗動物將不可能得到正確的實驗結果。質量控制包括遺傳、微生物、環(huán)境、營養(yǎng)等四個方面。概述第二頁，共二十九頁，2022年，8月28日遺傳學控制不同品種品系動物反應不同實驗動物分：近交系、突變系、系統(tǒng)雜交系、封閉群等。第三頁，共二十九頁，2022年，8月28日實驗動物被稱為“活的試劑”。遺傳背景清楚，微生物控制、環(huán)境、營養(yǎng)、飼養(yǎng)等符合規(guī)定的標準。標準化實驗動物第四頁，共二十九頁，2022年，8月28日實驗動物的分類同基因型動物：近交系動物近交同類系動物突變同類系動物重組同類系動物雜交F1代動物不同基因型動物：封閉群第五頁，共二十九頁，2022年，8月28日（一）近交系動物近交系動物的歷史近交系動物的定義經至少20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內所有個體都可以追溯到起源于第20代或以后代數的一對共同祖先，該品系稱近交系。經連續(xù)20代以上親代與子代交配與全同胞兄妹交配有同等效果。近交系動物的命名

一般以大寫英文字母命名，亦可以用大寫英文字母加阿拉伯數字命名，符號應盡量簡短。例：A系、TA1系。第六頁，共二十九頁，2022年，8月28日（1）亞系亞系的形成近交系的亞系分化是指一個近交系內各個分支的動物之間，已經發(fā)現(xiàn)或十分可能存在遺傳差異。a.F20-40b.分開繁殖100代以上c.

遺傳差異第七頁，共二十九頁，2022年，8月28日（2）亞系的命名在原品系的名稱后加一道斜線后表明亞系的符號。1.數字名稱例：DBA/1，DBA/22.培育或產生亞系的單位或人的縮寫英文名稱第一個字母大寫，隨后字母小寫。例：CBA/J3.當一個保持者保持的一個近交系具有兩個以上的亞系時，可用在數字后再加保持者的縮寫英文名稱來表示亞系。例：C57BL/6J，C57BL/10J亞系命名方法例外情況一些建立及命名較早，且人們所知的近交系，亞系名稱可用小寫英文字母表示。例：BALB/c第八頁，共二十九頁，2022年，8月28日（3）支系支系的形成：一個近交系或亞系內部由于存在各種差異而出現(xiàn)的支系。包括環(huán)境、母方、細胞質、可能（極?。┻z傳上差異等。支系的命名1.經人為技術處置形成的支系，應在原品系名稱后附加一個小寫英文字母標明處理方式。具體符號：子移植e;巢移植o;奶母代乳f;人工喂養(yǎng)h;人工喂養(yǎng)+奶母代乳fh

例：C3HfC57BL/6或C3HfB，表示由C57BL/6品系代乳的C3H近交系2.由引種形成的支系，在原品系或亞系名稱后加一斜線，然后標明引入單位的英文縮寫名稱。例：NC/S3.用代乳等人為技術處置的目的之一是去除或植入垂直感染的病毒。當去除或植入的病毒十分明確時，用下面方法表示。在品系名稱后加一橫線，以大寫英文字母標明病毒的名稱，最后加上一個“+”或“-”的符號分別表示植入或去除。例：C3H/HeN－MTV+第九頁，共二十九頁，2022年，8月28日（4）近交系動物的特性a、同和性在一個近交系內所有動物的所有基因位點都是純合子，個體之間、祖代個體與后代個體之間都是純合子。b、同基因性一個近交系中所有個體在遺傳上是同源的，所有個體都可追溯到一對共同祖先。個體之間可進行器官移植、皮膚移植、腫瘤移植。c、一致性近交系動物任何可遺傳的體征都是一致的，如血型、組織型、形態(tài)上的特征、行為的類型。如個體間出現(xiàn)差異，是環(huán)境不均一造成的。d、長期的遺傳穩(wěn)定性近交系動物在遺傳上是穩(wěn)定的。遺傳變異或基因突變的機率極低，并及時清楚遺傳變異的動物。第十頁，共二十九頁，2022年，8月28日e、可分辨性近交系動物在遺傳上已有分型，可根據這些位點的分型很快地將兩個外貌相似的近交系分辨出來。f、個體性從整個近交系動物來看，每個品系在遺傳上都是獨立的，在某些情況下，品系間的差別顯示在量上，而不在質上。便于篩選。g、

分布的廣泛性大部分近交系動物分布在世界各地，不同地區(qū)、不同國家的科學家有可能去重復或驗證已取得的理論和數據。h、背景資料和數據較為完善近交系動物在培養(yǎng)和保存過程中都有詳細的記錄。對于設計新的實驗和解釋所得結果提供了便利條件。（4）近交系動物的特性第十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日（二）近交同類系動物（同源導入近交系、

同源導入系）

定義：通過雜交—互交或回交等方式將一個基因導入到近交系中，由此形成的一個新的近交系，與原來的近交系只是在一個很小的染色體片段上的基因不同。命名：在接受導入基因的近交系和提供基因的近交系的復合符號（名稱）中間用英文句號分開，后面加一橫標，導入基因的符號。例：B6?AKR—H-2k第十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日（三）突變同類系動物（同源突變近交系、

同源突變系）

定義：兩個近交系，除了在一個指明位點等位基因不同外，其他遺傳基因全部相同。命名：

1.在發(fā)生突變的近交系名稱后加突變符號。例：129—dy/dy。

2.當突變基因必須以雜合子形式保持時，用“+”號代表野生型基因。例：129—+/dy

第十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日（四）重組近交系

定義：將兩個無關的近交系動物進行交配產生F2代后，經過連續(xù)20代以上的全同胞兄妹交配而育成的近交系，稱為重組近交系。命名：用“x”號將兩個親代近交系動物的縮寫符號連在一起后，按順序冠以ABC…字母，或加上一波折號，標上阿拉伯數字。如：CXBDCXB-1（BALB/c×C57BL/6）第十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日重組近交系第一近交系第二近交系

AAbb×aaBB

F1代AaBb×AaBbF2代AABBAABbAAbbAaBBAaBbAabbaaBBaaBbaabb

（連續(xù)20代以上的全同胞兄妹交配）第十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日

（五）雜交F1代動物定義：由兩個無關的近交系雜交而繁殖的第一代動物。主要特性：

1、基因型相同；

2、表現(xiàn)型一致，變異低；

3、有雜種優(yōu)勢，生活力和抗病力強；

4、試驗反應均一；

5、具有雙系雙親的特性，要通過不同雜交組合的對比觀察，從中篩選出最理想的雜交組合。命名：兩個親代近交系的名稱中間加大寫英文字母X，雌性近交系在前，雄性近交系在后，再在后寫上F1符號。親代雌性品系×親代雄性品系F1。如：C57BL/6×DBA/2F1第十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日F1代動物AAbbcc（♀）×aaBBCC（♂）近交系近交系

F1代AaBbCc

F2代AaBbCcAABbCcaaBbCcAabbCcAaBBCcAAbbCcAABBCcaabbCcaaBBCc……第十七頁，共二十九頁，2022年，8月28日（六）近交系的應用

近交系動物個體之間極為一致，對實驗反應一致，在實驗組和對照組都只需較少量的動物。在某些涉及組織或腫瘤移植的實驗中，個體之間組織相容性一致與否是實驗成敗的關鍵。有些近交系腫瘤發(fā)病率，先天性異常是醫(yī)學研究的模型。多個近交系同時使用，可使研究者分析不同遺傳組成對某項實驗的影響，或觀察實驗結果是否具有普遍意義。第十八頁，共二十九頁，2022年，8月28日（七）封閉群動物定義：以非近親交配方式進行繁殖生產的一個實驗動物群，在不從其外部引入新的個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為封閉群動物，又稱近交系動物。命名：封閉群由2-4個大寫英文字母命名，種群名稱前標明保持者的英文縮寫命名，第一個字母需大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名稱之間用冒號分開（這是近交系動物命名中最顯著的區(qū)別）。如：N：NIH-nu/nuLAC：LACA例外：wistar大鼠ddy小鼠封閉群動物繁殖方法條件：1、隔離2、選擇3、有效群體大小方法：1、隨機交配方法2、循環(huán)交配方法第十九頁，共二十九頁，2022年，8月28日封閉群動物的應用

封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性在遺傳學中可作為現(xiàn)在實驗的基礎群體。封閉群原種具有類似于人類群體遺傳異質性的遺傳組成，因此，在人類遺傳研究、藥物篩選和毒性試驗等方面起著不可替代的作用。封閉群動物具有較強的繁殖力和生活力。生產容易、成本低廣泛應用于預試驗、一般性實驗。第二十頁，共二十九頁，2022年，8月28日同基因型動物與不同基因動物之間的比較特性

近交系

F1代

封閉群

F2代或雜種

同基因型

高

高

不高

低純合性

高低

低

低長期遺傳穩(wěn)定性

高高低低可檢定的客觀指標

高高中等低表型一致性

高較高

中等低獨特性高較高

中等低國際分布

很廣

很廣

有限極有限背景資料多

中等中等少第二十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日營養(yǎng)與飼料對實驗動物的影響標準化實驗動物必需有合理的營養(yǎng)和飼料供給。合理營養(yǎng)是指要滿足該種動物對各種營養(yǎng)素需要，并略有富裕。動物的食欲不同，對營養(yǎng)的要求不同。同一種動物，不同品系對營養(yǎng)的要求不同。同一品系動物，在不同生長期，對營養(yǎng)的需求不同。要做到飼料的原料組成和營養(yǎng)成份的比例穩(wěn)定、統(tǒng)一，這是使研究結果獲得比較一致的重要保證。第二十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日飼料中營養(yǎng)成份對動物的影響飼料中營養(yǎng)成份包括：蛋白質、脂肪、碳水化合物、無機鹽、維生素、水。蛋白質脂肪碳水化合物：1.無氮浸出物、淀粉、糖;2.粗纖維注：狗、貓不能利用生淀粉無機鹽（礦物質、微量元素）維生素豚鼠和猴在體內不能合成維生素C；無菌動物因腸道無正常菌絲，需補充各種維生素及脂肪。水動物體內損失20%的水分時，動物死亡。

第二十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日各種實驗動物的營養(yǎng)和飼料

大鼠和小鼠的飼料蛋白質20%以上特別補充V.A、V.E大鼠和小鼠每日耗料量和飲水量小鼠每日耗料量：占小鼠體重1/4每日飲水量：占小鼠體重1/4大鼠每日耗料量：占小鼠體重1/10

每日飲水量：占小鼠體重1/10第二十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日豚鼠和兔子的飼料

蛋白質20%粗纖維10～20%特別補充V.C或青飼料耗料量：成年兔子（體重2～3kg）每日耗料150克，約占體重1/15

成年豚鼠（體重約600g）每日耗料：精料30g（約占體重1/15）、青飼料若干第二十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日微生物控制普通動物清潔動物無特異病原體動物（SPF）無菌動物悉生動物第二十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日各種級別動物對實驗結果影響的比較類別無菌動物SPF動物清潔動物普通動物傳染病寄生蟲實驗結果應用動物數統(tǒng)計價值長期實驗死亡率長期實驗成活率實驗標準設計實驗結果討論價值無無少高明確可能好很低約100%可能很高無無少高明確可能好低約90%可能高無無較少較高基本明確