細(xì)辛精油和化學(xué)藥劑對(duì)茄子枯萎病菌生長(zhǎng)的抑制,植物保護(hù)論文

細(xì)辛精油和化學(xué)藥劑對(duì)茄子枯萎病菌生長(zhǎng)的抑制,植物保護(hù)論文茄子〔SolanummelongenaL.〕是一種重要的蔬菜，在我們國(guó)家栽種面積達(dá)20余萬(wàn)hm2。近年來(lái)，茄子病害日益嚴(yán)重，華而不實(shí)茄子枯萎病〔Fusariumoxysporumf.sp.melongenaeMatuoetlshigamiSchlecht.〕是一種常見(jiàn)的土傳性病害，可引起維管束病變，造成植株死亡，使病田減產(chǎn)20％~30％，嚴(yán)重時(shí)高達(dá)50％~60％，甚至絕產(chǎn)。生產(chǎn)綠色有機(jī)蔬菜時(shí)，防治病害應(yīng)主要采用生物防治方式，以減少農(nóng)藥對(duì)環(huán)境和人畜的危害，防止病原菌產(chǎn)生抗藥性及再泛濫。細(xì)辛〔Asarumhet-erotropoidesFr.Schmidtvar.Mandshuricum〔Maxrm〕Kitag.〕屬常用中草藥，其活性物質(zhì)主要為揮發(fā)油精油。王桂清等的研究表示清楚，細(xì)辛精油具有廣譜抑菌活性，對(duì)玉米、黃瓜、果樹(shù)、棉花、木本花卉等多種植物病害致病菌具有抑制作用。以茄子枯萎病菌為靶標(biāo)病原菌、細(xì)辛精油為研究對(duì)象、3種化學(xué)藥劑為對(duì)照，研究細(xì)辛精油和化學(xué)藥劑對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑菌效果，為將細(xì)辛精油開(kāi)發(fā)成植物源殺菌劑提供理論根據(jù)。1材料與方式方法1.1供試菌種茄子枯萎病菌來(lái)源于聊城大學(xué)農(nóng)學(xué)院病理實(shí)驗(yàn)室。該病原真菌病樣采集于聊城市許營(yíng)村蔬菜大棚，經(jīng)分離、純化、鑒定后保存?zhèn)溆谩?.2供試制劑細(xì)辛精油采用超臨界CO2萃取法獲得，密封保存于4℃冰箱中。惡霉靈70%可濕性粉劑〔WP〕由山東煙臺(tái)鑫潤(rùn)精細(xì)化工有限公司生產(chǎn)；撲海因500g/L懸浮劑〔SC，有效成分通用名稱為異菌脲〕由拜耳杭州作物科學(xué)有限公司生產(chǎn)；嘧霉胺30%懸浮劑〔SC〕由山東京博農(nóng)化有限公司生產(chǎn)。1.3制劑配制1〕菌絲生長(zhǎng)抑制液：用少量二甲基亞砜溶解細(xì)辛精油〔不超過(guò)總體積的2％〕，然后用無(wú)菌水配制成10000mg/L的母液，采用二倍稀釋法配成10000，5000，2500，1250，625mg/L等5個(gè)濃度梯度；3種化學(xué)藥劑分別用無(wú)菌水配制成2000，1000，500，250，125mg/L等5個(gè)濃度梯度。2〕孢子萌發(fā)抑制液：細(xì)辛精油的配制方式方法同1〕；3種化學(xué)藥劑的5個(gè)濃度梯度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L。1.4生物測(cè)定方式方法1〕生長(zhǎng)速率法。采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定細(xì)辛精油和3種化學(xué)藥劑對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用，培養(yǎng)基為含藥PDA，空白對(duì)照不加藥，3次重復(fù)。細(xì)辛精油終濃度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L，3種化學(xué)藥劑終濃度分別為200.0，100.0，50.0，25.0，12.5mg/L。2〕孢子萌發(fā)法。采用孢子萌發(fā)法測(cè)定細(xì)辛精油和3種化學(xué)藥劑對(duì)茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制作用，3次重復(fù)。細(xì)辛精油終濃度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L，3種化學(xué)藥劑終濃度分別為100.00，50.00，25.00，12.50，6.25mg/L。1.5數(shù)據(jù)處理及毒力回歸曲線建立應(yīng)用MicrosoftExcel軟件處理數(shù)據(jù)；采用SPSS10.0軟件建立毒力回歸曲線，將抑菌的百分率轉(zhuǎn)換成幾率值，濃度轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)，進(jìn)行幾率值分析，分別求出細(xì)辛精油和3種化學(xué)藥劑的抑制中濃度〔EC50〕；利用DPSv7.05專業(yè)版軟件，根據(jù)Duncar新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。2結(jié)果與分析2.1細(xì)辛精油對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用供試條件下，細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果見(jiàn)表1和表2。由表1和表2能夠看出：細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)均有抑制作用，且隨著制劑濃度的升高，抑制率逐步增加；一樣濃度條件下，不同藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果不同；當(dāng)濃度100mg/L時(shí)，嘧霉胺、撲海因和惡霉靈三者的抑菌效果差異性顯著，華而不實(shí)撲海因的效果最佳，當(dāng)濃度為50mg/L時(shí)，其抑菌率超過(guò)了50％；濃度為200mg/L時(shí)，撲海因和嘧霉胺的抑菌效果差異性不顯著，抑菌率分別為86.42％和88.01％；當(dāng)細(xì)辛精油濃度為1000mg/L時(shí)，其對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率到達(dá)61.48％。由表2能夠看出：細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果存在差異，3種化學(xué)農(nóng)藥中撲海因的抑制效果最佳，EC50和EC90分別為41.08mg/L和155.76mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分別為58.30mg/L和216.25mg/L；惡霉靈的效果較差，EC50為827.07mg/L，EC90到達(dá)了18146.34mg/L；細(xì)辛精油的EC50為1009.72mg/L，而其EC90〔6962.07mg/L〕低于惡霉靈的EC90〔18146.34mg/L〕，講明細(xì)辛精油在較高濃度時(shí)的抑菌效果優(yōu)于惡霉靈。2.2細(xì)辛精油對(duì)孢子萌發(fā)的抑制作用細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果如表35所示。由表3和表4能夠看出：細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果隨著藥劑濃度的升高而加強(qiáng)；一樣濃度條件下，不同藥劑對(duì)枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果存在差異，當(dāng)化學(xué)農(nóng)藥濃度25.0mg/L時(shí)，撲海因、嘧霉胺和惡霉靈3種藥劑之間抑菌效果差異不顯著，但當(dāng)濃度50.0mg/L時(shí)，3者之間則差異極顯著；3種化學(xué)農(nóng)藥之中撲海因的抑菌效果最佳，惡霉靈的抑菌效果最差，當(dāng)濃度為100.0mg/L時(shí)，前者的抑菌率〔90.13％〕是后者〔7.18％〕的12.55倍。細(xì)辛精油作為一種植物提取物，當(dāng)濃度為500mg/L時(shí)，其對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率到達(dá)84.63％，抑菌效果非常顯著。由表5能夠看出：細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果差異較大：3種化學(xué)農(nóng)藥中撲海因的抑菌效果最佳，EC50和EC90分別為42.05mg/L和133.50mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分別為71.64mg/L和221.47mg/L；而惡霉靈的抑制效果較差，EC50和EC90分別為7243.56mg/L和315212.95mg/L；細(xì)辛精油的EC50和EC90分別為348.99mg/L和776.99mg/L，與惡霉靈比擬，EC50提高了95.18％，EC90提高了99.75％，講明細(xì)辛精油對(duì)茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑菌效果明顯，遠(yuǎn)優(yōu)于惡霉靈?？傮w而言，細(xì)辛精油對(duì)孢子萌發(fā)的抑制效果優(yōu)于對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果，EC50分別為348.99mg/L和1009.72mg/L；3種化學(xué)農(nóng)藥中撲海因?qū)菸【z生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制效果最佳，EC50分別為41.08mg/L和42.05mg/L，惡霉靈的抑制效果較差，EC50分別為827.07mg/L和7243.56mg/L，分別為撲海因的20.13倍和172.26倍，為細(xì)辛精油的0.82倍和20.76倍；從EC90上看，細(xì)辛精油的抑菌效果比惡霉靈提高了61.63%〔菌絲生長(zhǎng)〕和99.75％〔孢子萌發(fā)〕。3結(jié)論與討論采用生長(zhǎng)速率法和孢子萌發(fā)法分別測(cè)定細(xì)辛精油和3種化學(xué)農(nóng)藥〔70%惡霉靈WP、撲海因SC、30%嘧霉胺SC〕對(duì)茄子枯萎病菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑菌效果。結(jié)果表示清楚：細(xì)辛精油對(duì)菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的EC50分別為1009.72mg/L和348.99mg/L，其對(duì)孢子萌發(fā)的抑制效果明顯優(yōu)于對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用，講明細(xì)辛精油作為植物提取物對(duì)茄子枯萎病菌的主要作用方式為抑制孢子萌發(fā)，使其不能增殖，從根本上滅殺病原菌；從EC90上看，細(xì)辛精油的抑菌效果比惡霉靈高61.63％〔菌絲生長(zhǎng)〕和99.75％〔孢子萌發(fā)〕，講明細(xì)辛精油在較高濃度時(shí)的抑菌效果優(yōu)于惡霉靈?？菸∈寝r(nóng)作物、果蔬、花卉、苗木等的常見(jiàn)病害，使寄主植物長(zhǎng)勢(shì)減弱或死亡，導(dǎo)致減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)。生物防治不僅能夠有效控制病害的發(fā)生和危害，而且能夠提高產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量，減少對(duì)環(huán)境的污染和對(duì)人畜的危害。開(kāi)發(fā)新的生防農(nóng)藥尤其是植物源農(nóng)藥，已成為植保界和化工界的研究新熱門。郭新春的研究發(fā)現(xiàn)，小茴香(FructusFoeniculi〕提取物對(duì)棉花枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.〕有較強(qiáng)的抑菌活性，當(dāng)濃度為0.1g/mL時(shí)抑菌率到達(dá)100％。王磊等的研究表示清楚：木香(Auck-landialappaDecne〕、丁香(Syzygiumaromaticum〕、肉桂(Cinnamomumcassia〕和大黃(Rheumpalmatum〕這4種植物的提取物對(duì)黃瓜枯萎病菌〔F.oxysporiumf.sp.cucumerinum〕和西瓜枯萎病菌〔F.oxysporumf.sp.Niveum〕均有明顯的抑制作用，當(dāng)4種植物提取物濃度均為25mg/mL時(shí)，木香、丁香和肉桂的提取物對(duì)黃瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率均到達(dá)90％左右，大黃提取物對(duì)兩者菌絲生長(zhǎng)的抑制率分別為54.5％和67.2％。范志宏等的研究表示清楚，萬(wàn)壽菊(TageteserectaL.〕精油殺菌素對(duì)西瓜枯萎病菌有較強(qiáng)的抑制作用，當(dāng)其濃度到達(dá)1.5g/mL時(shí)，抑制率到達(dá)100％。王樹(shù)桐等發(fā)現(xiàn)丁香等十幾種中草藥提取物對(duì)香蕉枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.〕有一定的抑制作用，華而不實(shí)丁香提取物抑菌效果最好，對(duì)菌株B1和菌株B2的抑制濃度分別為3.40mg/mL和3.38mg/mL。王桂清采用細(xì)辛精油處理黃瓜枯萎病菌，發(fā)現(xiàn)當(dāng)細(xì)辛精油濃度為1200mg/L時(shí)，對(duì)黃瓜枯萎病菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制率分別為85％和75％，EC50分別為314.12mg/L和860.43mg/L。以上研究講明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究結(jié)果也表示清楚：細(xì)辛精油對(duì)茄子枯萎病菌有明顯的抑制效果。在實(shí)踐生產(chǎn)中，細(xì)辛精油能夠作為一種植物源殺菌劑來(lái)替代化學(xué)農(nóng)藥防治茄子枯萎病的發(fā)生和危害。以下為參考文獻(xiàn)[1]張燕燕,柏廣利,孫雪花.茄子枯萎病的發(fā)生和綜合防治[J].當(dāng)代農(nóng)業(yè)科技,2018(10):174-179.[2]郝曉娟,劉波,謝關(guān)林.植物枯萎病生物防治研究進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2005,21(7):319-323.[3]段鶴君,付朝暉.細(xì)辛揮發(fā)油化學(xué)成分研究[J].中藥材,2018,33(4):562-5