化學(xué)發(fā)光原理和應(yīng)用

化學(xué)發(fā)光免疫分析

臨床檢驗常見類別血液/體液常規(guī)檢測免疫生化微生物放射性免疫檢測酶聯(lián)免疫檢測金標(biāo)免疫檢測化學(xué)發(fā)光檢測直接化學(xué)發(fā)光酶促化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光臨床檢驗定量半定量免疫定量檢測原理血液（尿液）中有很多含量非常低（pg/ml、ng/ml、mg/ml），但非常靈敏，其濃度變化能準(zhǔn)確反映人體疾病的發(fā)生、發(fā)展?fàn)顩r。如：T3、T4、AFP、肌鈣等等

【生化：檢測含量比較高的物質(zhì)】準(zhǔn)確、定量

【酶標(biāo)法、金標(biāo)法：定性、半定量】檢測對象檢測要求免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程放射免疫

優(yōu)點：準(zhǔn)確、定量，項目齊全缺點：放射性污染

試劑有效期短（一個月）

操作繁瑣、時間2小時左右

磁酶免

半自動化學(xué)發(fā)光

時間分辨優(yōu)點：沒有放射性污染，試劑有效期長（6個月以上）缺點：操作繁瑣，2小時有結(jié)果，準(zhǔn)確性差免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程全自動化學(xué)發(fā)光優(yōu)點：沒有放射性污染試劑有效期長（6個月以上）操作全自動速度快，半小時出結(jié)果結(jié)果最準(zhǔn)確缺點：試劑價格貴免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程？全自動化學(xué)發(fā)光主要品牌羅

氏雅培西門子貝克曼新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光主要技術(shù)包被技術(shù)：板式化學(xué)發(fā)光

：

固液相5%參加反應(yīng)(時間分辨)（定性

定量不準(zhǔn)）

磁顆粒化學(xué)發(fā)光

：

準(zhǔn)均相95%參加反應(yīng)

（精確

定量）發(fā)光原理：直接化學(xué)發(fā)光

標(biāo)記物在堿性（酸性）條件下，加強(qiáng)氧化劑，瞬間發(fā)光

廠家由10個點做成標(biāo)準(zhǔn)曲線，用戶只要高低兩點定標(biāo)修正曲線即可，節(jié)省試劑，結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確酶促化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物在酶催化下，緩慢發(fā)光

由于酶不穩(wěn)定，每次都必須用6-12個點做標(biāo)準(zhǔn)曲線，浪費試劑化學(xué)發(fā)光主要技術(shù)

經(jīng)過清洗和分離后，在反應(yīng)杯中先后加入激發(fā)底物1和激發(fā)底物2，引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生光信號。

儀器測定后顯示相對光強(qiáng)度(RLU)值，最后根據(jù)工作曲線計算待測物濃度。夾心法免疫定量檢測原理免疫定量檢測原理夾心法

樣本,ABEI標(biāo)記物,FITC標(biāo)記物和磁珠加入到反應(yīng)杯中，溫浴15分鐘*,形成“夾心三明治”免疫復(fù)合物，并被磁珠俘獲。在夾心法中，待測物濃度和樣本RLU值成正相關(guān)此時主曲線單調(diào)遞增免疫定量檢測原理免疫定量檢測原理RLU0Con.50500ABCDEFGHIJ主曲線的繪制：十點定標(biāo)競爭法磁珠樣本，ABEI標(biāo)記物,FITC標(biāo)記物和磁珠加入到反應(yīng)杯中，溫浴15分鐘*,ABEI標(biāo)記抗原，和樣本待測抗原競爭結(jié)合FITC標(biāo)記的抗體，2種產(chǎn)物同時被磁珠俘獲。免疫定量檢測原理經(jīng)過清洗和分離后，在反應(yīng)杯中先后加入激發(fā)底

物1和激發(fā)底物2，引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生光信號。

儀器測定后顯示相對光強(qiáng)度(RLU)值，最后根據(jù)工作曲線計算待測物濃度。競爭法免疫定量檢測原理在競爭法中，待測物濃度和樣本RLU值成負(fù)相關(guān)此時主曲線單調(diào)遞減免疫定量檢測原理*兩點定標(biāo)原理Cal1Cal2主曲線定標(biāo)曲線C01C02Δ1%=Rf|C1-C01|RfC1*100%線性補(bǔ)償曲線免疫定量檢測原理發(fā)光標(biāo)志物ABEI在酸堿溶液里都非常穩(wěn)定獨家專利ABEI化學(xué)品名稱:N-(4-氨基丁基)-N-乙烷基異魯米諾N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol分子式:C14H20N4O2

分子量：276.33+NaOH+H2O2

ABEI激發(fā)底物1激發(fā)底物2發(fā)光(持續(xù)測量3秒)發(fā)光信號產(chǎn)生及測量ABEI直接化學(xué)發(fā)光發(fā)光標(biāo)志物ABEIdelay2.5sdelay0.1s發(fā)光標(biāo)志物ABEI納米磁珠：由聚合物交聯(lián)構(gòu)成骨架，包裹納米級鐵氧化物形成的微米級的小球納米級鐵氧化物賦予磁性微球超順磁性在磁場中迅速被磁化并增強(qiáng)磁場，從而可以快速聚集而從液相中分離。外部磁場消失后恢復(fù)到初始狀態(tài)，沒有剩磁，可以重新分散開,利于清洗。納米免疫磁性微珠

(專利技術(shù))磁球表面有大量活性基團(tuán)，在適當(dāng)條件下可以和各種分子以穩(wěn)定的化學(xué)鍵結(jié)合。根據(jù)標(biāo)記物的不同，可以廣泛應(yīng)用于診斷領(lǐng)域。MALGUMI系統(tǒng)中，我們可以在磁球上標(biāo)記FITC抗體，作為通用的分離工具。也可以根據(jù)需要直接標(biāo)記其他特定的抗原或抗體，作為特殊項目中的分離手段。納米免疫磁性微珠納米免疫磁性微珠磁珠擴(kuò)增了抗原抗體反應(yīng)面積，從而提高反應(yīng)效率，縮短了反應(yīng)時間更快更充分的捕獲抗原抗體從而提高了靈敏度作為液相分離平臺，與試劑充分混合后顯著的減少批內(nèi)和批間差異通過化學(xué)鍵作用標(biāo)記抗原或抗體增強(qiáng)了準(zhǔn)確性。性能優(yōu)點MAGLUMI1000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI2000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI2000Plus全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI4000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀超級POCTMAGLUMI600測試速度:180T／H；第一個結(jié)果時間：12分鐘；一次可裝載16個樣本，可隨時添加樣本；一次性可裝載4個試劑盒，可隨時連續(xù)裝載、替換；一次可裝載60個反應(yīng)杯全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

精美、簡練的外觀M2000M2000機(jī)器分解圖全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀樣本倉?144個標(biāo)本位，可隨時添加，急診優(yōu)先?條形碼識別，抽血管、放免管等都可?樣本稀釋比例任意設(shè)定，自動稀釋高滴度樣本全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀試劑區(qū)?15/25個試劑位，可隨時連續(xù)裝載、調(diào)換試劑盒?采用射頻識別技術(shù)讀取試劑盒信息，讀取速度?試劑區(qū)冷藏（8-12℃），獨立供電?帶磁球自動懸浮系統(tǒng)全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀采樣針

?雙針，分別加試劑和樣本?內(nèi)外壁清洗，針外壁特氟龍包被，杜絕交叉污染?液面探測、凝塊檢測功能全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

一次可裝載720個反應(yīng)杯檢測過程中，可隨時連續(xù)裝載

反應(yīng)杯加載存儲器全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀樣本編輯模式

?正常模式：病人ID號從條形碼上讀取,項目手動輸入；?快速模式：軟件自動生成病人ID號，項目手動輸入；?聯(lián)網(wǎng)模式：病人ID號條形碼讀取，項目從Lis系統(tǒng)獲取。全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀試劑盒試劑盒自帶標(biāo)準(zhǔn)品，兩點定標(biāo)修正主曲線集成試劑盒設(shè)計，無需試劑預(yù)處理，即開即用射頻識別技術(shù)，試劑的所有信息儲存在高頻電子標(biāo)簽上更新、增加新項目無需對軟件升級，方便快捷

全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀軟件系統(tǒng)中、英、西班牙文界面、報告軟件真正實現(xiàn)人機(jī)對話智能報警全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M1000與M2000的比較1.無層存儲器2.

一次可裝載192個反應(yīng)杯3.單臂單針設(shè)計4.120測試/小時1.有層存儲器2.一次可裝載720個反應(yīng)杯3.雙臂雙針設(shè)計，分別加試

劑和樣本4.180測試/小時全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M2000與M2000P的比較1.臺式2.15個試劑位3.樣本區(qū)無冷藏功能1.立式，帶儲藏柜2.25個試劑位3.樣本區(qū)有冷藏功能全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M2000P與M4000的比較1.180測試/小時1.280測試/小時全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

反應(yīng)杯溫育測量廢棄物加樣清洗M2000硬件介紹全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

反應(yīng)杯溫育測量加樣清洗M2000硬件介紹全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀廢棄物新產(chǎn)業(yè)與同行產(chǎn)品對比對比項目MAGLUMI2000羅氏e-411羅氏e-601雅培i2000西門子CP貝克曼Access2發(fā)光標(biāo)記物ABEI三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕吖啶酯吖啶酯堿性磷酸酶測量原理磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光磁顆粒的電化學(xué)發(fā)光磁顆粒的電化學(xué)發(fā)光磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光酶促化學(xué)發(fā)光定標(biāo)品無需另購需另購需另購需另購需另購需另購第一個結(jié)果時間17分鐘18分鐘18分鐘29分鐘15分鐘20分鐘分析速度180T/H86T/H170T/H200T/H180T/H100T/H樣本位14430個（盤式）/75（架式）每模塊25個134個84個60個試劑連續(xù)裝載可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載試劑成本低高高高高高維護(hù)成本低高高高高高

新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光優(yōu)點

試劑項目多，100個已注冊項目，rT3、TRab、肝纖、CA50、CA242、SCCA、CA724、211、NSE、S-100IAA、GAD65、IGF-1、醛固酮、血管緊張素、PCT、甘膽酸、FE3、肌鈣蛋白I、腦鈉肽、D-二聚體、25（OH）VD、TORCH、EB病毒、乙肝兩對半定量、丙肝等等。

180個測試/小時，第一個測試17分鐘，以后每分鐘3個測試

故障率低，試劑通過衛(wèi)生部室間質(zhì)評

試劑價格低、質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品免費

多快好省磁顆粒、管式直接化學(xué)發(fā)光

Thyroid甲狀腺T3三碘甲狀腺原氨酸T4四碘甲狀腺原氨酸FT3游離三碘甲狀腺原氨酸FT4游離四碘甲狀腺原氨酸RT3反三碘甲狀腺原氨酸TRAB促甲狀腺受體抗體TGA甲狀腺球蛋白抗體TMA甲狀腺微粒體抗體TG甲狀腺球蛋白TSH(3rdGen)促甲狀腺激素(第三代超敏)項目菜單細(xì)則甲亢、甲減、自身免疫性甲狀腺疾病的診斷;新生兒甲減檢查項目菜單細(xì)則

Fertility生育FSH促卵泡激素LH黃體生成素PRL催乳素

E2雌二醇

PRG孕酮TEST睪酮F-TEST游離睪酮HCG/β-HCG絨毛膜促性腺激素

B-HCG絨毛膜促性腺激素B亞單位FE3游離雌三醇PAPP-A妊娠相關(guān)血漿蛋白DHEA-S脫氫表雄酮卵巢性閉經(jīng)和垂體/下丘腦性閉經(jīng)、多囊卵巢綜合癥、男性性功能、青春期前兒童性早熟、孕檢、預(yù)測排卵Metabolism

糖代謝C-PeptideC-肽Insulin胰島素ProInsulin胰島素原IAA抗人胰島素抗體GAD65谷氨酸脫羧酶抗體IGF-1胰島素樣生長因子1ICA

抗胰島細(xì)胞抗體糖尿病的病因、分型、診斷及監(jiān)測；妊娠期高血壓檢測項目菜單細(xì)則TumorMakers腫瘤標(biāo)志物AFP甲胎蛋白CEA癌胚抗原Ferritin鐵蛋白TPA組織多肽抗原PAP前列腺酸性磷酸酶PSA前列腺特異性抗原F-PSA游離前列腺特異性抗原CA125糖類抗原125項目菜單細(xì)則TumorMakers腫瘤標(biāo)志物CA153糖類抗原153CA199糖類抗原199CA50糖類抗原50CA242糖類抗原242CA724糖類抗原724CYFRA211細(xì)胞角蛋白十九片段NSE神經(jīng)元特異性烯醇化酶Stangtec-100Stangec-100蛋白質(zhì)SCCA鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原PepsinogenⅠ胃蛋白酶ⅠPepsinogenⅡ胃蛋白酶Ⅱ項目菜單細(xì)則部分疾病腫瘤標(biāo)志物選擇順序肝AFPCEA結(jié)/直腸CEACA19-9CA50胰腺CA19-9CEACA50胃CA724CEACA19-9食道CEACA19-9CA724CA50SCCA肺SYFRA211NSE

CA50CEACA19-9SCCA乳腺CA15-3CA125CEA卵巢CA125AFPβ-HCGCEA子宮SCCAβ-HCG前列腺fPSAPSAPAP項目菜單細(xì)則

Hepatic肝纖維化HA，HyaluronicAcid透明質(zhì)酸PIIIPN-PIII型前膠原N肽CIV，CollagenIVIV型膠原蛋白LN，Laminin

層粘連蛋白CG，GlycocholicAcid甘膽酸肝纖維化的程度，隨著慢遷移肝－慢活肝－肝硬化－肝癌病程演變，在血中的含量逐步升高；妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥檢測項目菜單細(xì)則KidneyFunction

腎功能β2-MGβ2微球蛋白H-ALB人尿微量白蛋白腎臟疾病的判斷、腎臟移植檢測項目菜單細(xì)則

BoneMetabolism

骨代謝

PTH甲狀旁腺素CT降鈣素BGP骨鈣素25-OHVitaminD（total）25-羥基維生素D（總）高、低鈣血癥、骨損傷后骨質(zhì)合成、骨質(zhì)疏松；VD在骨外，心血管系統(tǒng)疾病、糖尿病、腫瘤方面、免疫系統(tǒng)疾病中的作用項目菜單細(xì)則PrenatalScreening產(chǎn)前篩查AFP甲胎蛋白Free-B-HCG游離絨毛膜促性腺激素B亞單位PAPP-A妊娠相關(guān)蛋白唐氏(Down’s)綜合征和開放神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查項目菜單細(xì)則

Cardiac心血管及心肌標(biāo)志物TroponinI肌鈣蛋白IMyoglobin肌紅蛋白CK-MB肌酸激酶同工酶ALD醛固酮AI血管緊張素IAII血管緊張素IINT-proBNP腦自然肽N端前體蛋白D-DimerD-二聚體心肌梗死、心力衰竭、高血壓的診斷，血栓和溶栓治療

項目菜單細(xì)則InflammationMonitoring

炎癥監(jiān)測PCT降鈣素原CRPC反應(yīng)蛋白細(xì)菌性和病毒性感染鑒別抗生素應(yīng)用指導(dǎo)器官、骨髓移植患者的術(shù)后感染監(jiān)測項目菜單細(xì)則

Immunoglobulin

免疫球蛋白IgG人免疫球蛋白IgGIgM人免疫球蛋白IgMIgE人免疫球蛋白IgEIgA人免疫球蛋白IgA類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的鑒別，過敏性疾病及一些免疫性疾病檢測項目菜單細(xì)則

DrugMonitoring

藥物檢測

Digoxin地高辛CyclosporineA環(huán)包霉素AFK506他克莫司用于器官移植的排斥反應(yīng)監(jiān)測，指導(dǎo)治療，提高存活率項目菜單細(xì)則

TORCHTOXOIgG弓形蟲IgGTOXOIgM弓形蟲IgMRubellaIgG風(fēng)疹病毒IgGRuballaIgM風(fēng)疹病毒IgMCMVIgG巨細(xì)胞病毒IgGCMVIgM巨細(xì)胞病毒IgMHSV-1/2IgG單純皰