標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 27634-2011 傳染性囊病病毒核酸檢測方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),主要針對傳染性囊病病毒(IBDV)的核酸檢測提供了一套標(biāo)準(zhǔn)化的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了如何從疑似感染傳染性囊病病毒的樣本中提取核酸,并通過RT-PCR技術(shù)對其進(jìn)行檢測的過程。
首先,在樣品采集方面,標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了適合用于IBDV檢測的各種生物樣本類型,包括但不限于雞只的脾臟、法氏囊等組織樣本或糞便樣本。選擇合適的樣本對于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要。
接著是核酸提取部分,標(biāo)準(zhǔn)推薦使用商業(yè)化的核酸提取試劑盒或者傳統(tǒng)的酚/氯仿抽提法來獲得高質(zhì)量的RNA。這一步驟的質(zhì)量直接影響到后續(xù)擴(kuò)增反應(yīng)的效果。
在RT-PCR反應(yīng)體系建立上,《GB/T 27634-2011》給出了詳細(xì)的指導(dǎo),包括引物設(shè)計(jì)原則、退火溫度設(shè)置以及循環(huán)參數(shù)等關(guān)鍵信息。此外,還特別強(qiáng)調(diào)了陽性對照和陰性對照的重要性,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
最后,關(guān)于結(jié)果分析與報(bào)告撰寫,本標(biāo)準(zhǔn)也提供了具體指南。它建議采用凝膠電泳作為初步判斷依據(jù),并結(jié)合定量PCR儀提供的Ct值來進(jìn)行定性分析。同時,對如何記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及編寫正式報(bào)告也有明確要求。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2011-12-30 頒布
- 2012-04-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS11220
B41.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T27634—2011
傳染性囊病病毒核酸檢測方法
Protocolofnucleicaciddetectionforinfectiousbursaldisease
umborodiseasevirus
(g)
2011-12-30發(fā)布2012-04-01實(shí)施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T27634—2011
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口
(SAC/TC181)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院華南農(nóng)業(yè)
:、、
大學(xué)中華人民共和國珠海出入境檢驗(yàn)檢疫局北京盈九思科技有限公司
、、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人秦智鋒孫潔盧體康花群義陳書琨呂建強(qiáng)楊素方興旺曾少靈詹愛軍
:、、、、、、、、、、
畢英佐陳兵阮周曦朱玉蘭
、、、。
Ⅰ
GB/T27634—2011
傳染性囊病病毒核酸檢測方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了傳染性囊病病毒檢測方法和實(shí)時熒光檢測方法的技術(shù)要求和操
RT-PCRRT-PCR
作規(guī)范
。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于傳染性囊病病毒感染的快速診斷
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
GB/T6682
出入境動物檢疫采樣
GB/T18088
實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求
GB19489
3縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
值熒光信號量達(dá)到設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)
Ct:。
傳染性囊病
IBD:infectiousbursaldisease,。
傳染性囊病病毒
IBDV:infectiousbursaldiseasevirus,。
無特定病原體
SPF:specificpathogenfree,。
4材料與試劑
41儀器與耗材
.
411核酸電泳儀
..。
412凝膠成像儀
..。
413冷凍離心機(jī)最高離心力達(dá)g以上
..(15000)。
414混勻器
..。
415冰箱
..(2℃~8℃,-20℃,-80℃)。
416微量可調(diào)移液器
..(10μL,100μL,1000μL)。
417微量帶濾芯吸嘴
..(10μL,100μL,1000μL)。
418滅菌研缽
..。
419離心管
..。
4110光學(xué)反應(yīng)管
..PCR。
4111
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