小鼠肺泡灌洗參考范本

PAGEPAGE2/3下載文檔可編輯把小鼠喉嚨處皮膚剪開， 用鑷子把氣管周圍的組織分離開，氣管暴露出來。注射器 7號針頭，針尖剪掉，再磨平，把動物仰位固定，針頭從嘴巴里進(jìn)去，伸到氣管里。和平時灌胃一樣，只是現(xiàn)在伸到氣管。在甲狀腺（氣管顯得稍寬處）下面針頭就伸到這里， 大約甲狀腺過 3毫米處。然后拿一根線，從氣管下穿過，把針頭和氣管一起結(jié)扎了，其實(shí)就是把針頭固定在里面，不讓它跑出來。打結(jié)時用點(diǎn)力， 手撥動針頭時明顯感覺針頭動不了就可以了。然后注射器吸取液體推進(jìn)氣管，第一次一般吸不完全，沒關(guān)系，第二次的液體推進(jìn)去后就能吸出來很多了。 我基本能全部出來的。 希望能幫上忙。標(biāo)題：小鼠肺泡灌洗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程關(guān)鍵詞： 肺泡灌洗；細(xì)胞分類計(jì)數(shù)；細(xì)胞因子目的：檢查小鼠各種病理生理狀態(tài) (特別是肺部疾病 )下，肺部 出現(xiàn)的各種病理改變。例：哮喘模型中檢測嗜酸細(xì)胞的分類數(shù)有否提高，灌洗 液中各種細(xì)胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主體內(nèi)容（操作步驟實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的器材、儀器、藥品： 遇冷的單純 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手術(shù)器械：眼科剪，眼科鑷，穿刺針或 4號半頭 皮針；細(xì)胞計(jì)數(shù)板；低溫離心機(jī)實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程：灌洗分單側(cè)和雙側(cè)。單側(cè)一般為頸部和胸部解剖，氣管和一側(cè)肺葉結(jié)扎。再用穿刺針插入氣管上端，0.3mlPBS反復(fù)沖洗,一般為3遍，每遍沖洗次數(shù)根據(jù)需要決定，一般3-5次即可。雙側(cè)灌洗則只需要進(jìn)行頸部解剖，暴露氣管進(jìn)行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次數(shù)同上。結(jié)果判定：1回收的灌洗液離心10分鐘，回收上清置于-20℃等待進(jìn)行細(xì)胞因子檢測；.用l含有的PB重懸細(xì)胞沉淀，取 l 重懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。余液再次 4℃離心，參數(shù)同上； 3. 離心后去上清，不需太徹底可根據(jù)第二步細(xì)胞計(jì)數(shù)所得結(jié)果和需要涂片張數(shù)決定需要?dú)埩舳嗌偕锨逯貞壹?xì)胞沉淀。一般如果細(xì)胞總數(shù)有 10*6 次方/ml 的話，80-100ul 重懸可以涂三張片，這樣玻片上細(xì)胞密度比較適中。4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于 中性甲醛溶液中固定 10鐘以上，隨后就可以進(jìn)行常規(guī) HE染色。5。染色后就可以進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，計(jì)算 300個以上細(xì)胞，結(jié)果就比較可靠了。使用靜脈留置針，頸部解剖顯露氣管，插入留置針，用細(xì)線打結(jié)固定，PAGEPAGE4/3下載文檔可編輯拔出針芯。鏈接注射器，即可開始灌洗！本實(shí)驗(yàn)室是這么做的，很方便，效果很好1 總則1.1 為了加強(qiáng)公司的環(huán)境衛(wèi)生管理，創(chuàng)造一個整潔、文明、溫馨的購物、辦公環(huán)境，根據(jù)《公共場所衛(wèi)生管理?xiàng)l例》的要求，特制定本制度。1.2 集團(tuán)公司的衛(wèi)生管理部門設(shè)在企管部，并負(fù)責(zé)將集團(tuán)公司的衛(wèi)生區(qū)域詳細(xì)劃分到各部室，各分公司所轄區(qū)域衛(wèi)生由分公司客服部負(fù)責(zé)劃分，確保無遺漏。2 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)2.1 室內(nèi)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)2.1.1 地面、墻面：無灰塵、無紙屑、無痰跡、無泡泡糖等粘合物、無積水，墻角無灰吊、無蜘蛛網(wǎng)。2.1.2 門、窗、玻璃、鏡子、柱子、電梯、樓梯、燈具等，做到明亮、無灰塵、無污跡、無粘合物，特別是玻璃，要求兩面明亮。2.1.3 柜臺、貨架：清潔干凈，貨架、柜臺底層及周圍無亂堆亂放現(xiàn)象、無灰塵、無粘合物，貨架頂部、背部和底部干凈，不存放雜物和私人物品。2.1.4 購物車（筐）、直接接觸食品的售貨工具（包括刀、叉等）：做到內(nèi)外潔凈，無污垢和粘合物等。購物車（筐）要求每天營業(yè)前簡單清理，周五全面清理消毒；售貨工具要求每天消毒，并做好記錄。2.1.5 商品及包裝：商品及外包裝清潔無灰塵（外包裝破損的或破舊的不得陳列）。2.1.6 收款臺、服務(wù)臺、辦公櫥、存包柜：保持清潔、無灰塵，臺面和側(cè)面無灰塵、無灰吊和蜘蛛網(wǎng)。桌面上不得亂貼、亂畫、亂堆放物品，用具擺放有序且干凈，除當(dāng)班的購物小票收款聯(lián)外，其它單據(jù)不得存放在桌面上。2.1.7 垃圾桶：桶內(nèi)外干凈，要求營業(yè)時間隨時清理，不得溢出，每天下班前徹底清理，不得留有垃圾過夜。2.1.8 窗簾：定期進(jìn)行清理，要求干凈、無污漬。2.1.9 吊飾：屋頂?shù)牡躏椧鬅o灰塵、無蜘蛛網(wǎng)，短期內(nèi)不適用的吊飾及時清理徹底。2.1.10 內(nèi)、外倉庫：半年徹底清理一次，無垃圾、無積塵、無蜘蛛網(wǎng)等。2.1.11 室內(nèi)其他附屬物及工作用具均以整潔為準(zhǔn)，要求無灰塵、無粘合物等污垢。2.2 室外衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)2.2.1 門前衛(wèi)生：地面每天班前清理，平時每一小時清理一次，每周四營業(yè)結(jié)束后有條件的用水沖洗地面（冬季可根據(jù)情況適當(dāng)清理），墻面干凈且無亂貼亂畫。2.2.2 院落衛(wèi)生：院內(nèi)地面衛(wèi)生全天保潔，果皮箱、消防器械、護(hù)欄及配電箱等設(shè)施每周清理干凈。垃圾池周邊衛(wèi)生清理徹底，不得有垃圾溢出。2.2.3 綠化區(qū)衛(wèi)生：做到無雜物、無紙屑、無塑料袋等垃圾。3 清理程序3.1 室內(nèi)和門前院落等區(qū)域衛(wèi)生：每天營業(yè)前提前10分鐘把所管轄區(qū)域內(nèi)衛(wèi)生清理完畢，營業(yè)期間隨時保潔。下班后5-10分鐘清理桌面及衛(wèi)生區(qū)域。3.2 綠化區(qū)衛(wèi)生：每周徹底清理一遍，隨時保持清潔無垃圾。4 管理考核4.1 實(shí)行百分制考核，每月一次（四個分公司由客服部分別考核、集團(tuán)職4.2 集團(tuán)堅(jiān)持定期檢查和不定期抽查的方式監(jiān)督各分公司、部門的衛(wèi)生工作。每周五為衛(wèi)生檢查日，集團(tuán)檢查結(jié)果考核至各分公司，各分公司客服部的檢查結(jié)果考核至各部門。把小鼠喉嚨處皮膚剪開， 用鑷子把氣管周圍的組織分離開，氣管暴露出來。注射器 7號針頭，針尖剪掉，再磨平，把動物仰位固定，針頭從嘴巴里進(jìn)去，伸到氣管里。和平時灌胃一樣，只是現(xiàn)在伸到氣管。在甲狀腺（氣管顯得稍寬處）下面針頭就伸到這里， 大約甲狀腺過 3毫米處。然后拿一根線，從氣管下穿過，把針頭和氣管一起結(jié)扎了，其實(shí)就是把針頭固定在里面，不讓它跑出來。打結(jié)時用點(diǎn)力， 手撥動針頭時明顯感覺針頭動不了就可以了。然后注射器吸取液體推進(jìn)氣管，第一次一般吸不完全，沒關(guān)系，第二次的液體推進(jìn)去后就能吸出來很多了。 我基本能全部出來的。 希望能幫上忙。標(biāo)題：小鼠肺泡灌洗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程關(guān)鍵詞： 肺泡灌洗；細(xì)胞分類計(jì)數(shù)；細(xì)胞因子目的：檢查小鼠各種病理生理狀態(tài) (特別是肺部疾病 )下，肺部 出現(xiàn)的各種病理改變。例：哮喘模型中檢測嗜酸細(xì)胞的分類數(shù)有否提高，灌洗 液中各種細(xì)胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主體內(nèi)容（操作步驟實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的器材、儀器、藥品： 遇冷的單純 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手術(shù)器械：眼科剪，眼科鑷，穿刺針或 4號半頭 皮針；細(xì)胞計(jì)數(shù)板；低溫離心機(jī)實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程：灌洗分單側(cè)和雙側(cè)。單側(cè)一般為頸部和胸部解剖，氣管和一側(cè)肺葉結(jié)扎。再用穿刺針插入氣管上端，0.3mlPBS反復(fù)沖洗,一般為3遍，每遍沖洗次數(shù)根據(jù)需要決定，一般3-5次即可。雙側(cè)灌洗則只需要進(jìn)行頸部解剖，暴露氣管進(jìn)行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次數(shù)同上。結(jié)果判定：1回收的灌洗液離心10分鐘，回收上清置于-20℃等待進(jìn)行細(xì)胞因子檢測；.用l含有的PB重懸細(xì)胞沉淀，取 l 重懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。余液再次 4℃離心，參數(shù)同上； 3. 離心后去上清，不需太徹底可根據(jù)第二步細(xì)胞計(jì)數(shù)所得結(jié)果和需要涂片張數(shù)決定需要?dú)埩舳嗌偕锨逯貞壹?xì)胞沉淀。一般如果細(xì)胞總數(shù)有 10*6 次方/ml 的話，80-100ul 重懸可以涂三張片，這樣玻片上細(xì)胞密度比