動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植

1、細(xì)胞全能性的定義？原因？2、植物組織培養(yǎng)的原理？基本流程？條件？培養(yǎng)基成分？3、脫分化、再分化的實(shí)質(zhì)？俞傷組織的特點(diǎn)？4、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理？去壁的方法？誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法？原生質(zhì)體融合的實(shí)質(zhì)？原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志？植物體細(xì)胞雜交技術(shù)完成的標(biāo)志？?jī)?yōu)勢(shì)？5、植物繁殖的新途徑有？列舉微型繁殖、人工種子的優(yōu)點(diǎn)？如何使作物脫毒？6、作物新品種的培育包括？單倍體育種的流程？?jī)?yōu)點(diǎn)？7、怎樣培育突變體？8、怎樣進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)專題2動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念：從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。2、原理：細(xì)胞增殖動(dòng)物組織塊制成細(xì)胞懸液傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞幼齡動(dòng)物的器官組織或胚胎用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件，原代培養(yǎng)3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，容易培養(yǎng)使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，利于吸收營(yíng)養(yǎng)，排出代謝廢物加入培養(yǎng)液細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁、接觸抑制強(qiáng)調(diào)：動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性（一）：細(xì)胞貼壁：在懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求：表面光滑、無(wú)毒、易于貼附。接觸抑制：貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)到表面相互接觸后，細(xì)胞停止分裂增殖（形成一個(gè)單層）。接觸抑制強(qiáng)調(diào)：動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性（二）：原代培養(yǎng)：動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞，需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。10-50代，增值緩慢，以至停止，部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能發(fā)生變化；50代以后，少部分細(xì)胞克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，即變?yōu)榘┘?xì)胞。強(qiáng)調(diào)：原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)總結(jié)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官制成細(xì)胞懸液剪碎，用胰蛋白酶處理10代細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無(wú)限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液稀釋傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。傳代10-50代左右，增長(zhǎng)緩慢以至于完全停止，部分細(xì)胞核型可能發(fā)生變化分瓶傳代培養(yǎng)培養(yǎng)細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁、接觸抑制50代后，少部分細(xì)胞獲得不死性，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，等同于癌細(xì)胞。原代培養(yǎng)4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:1）無(wú)菌無(wú)毒

的環(huán)境：

適宜的溫度：36.5±0.5℃適宜的酸堿度：PH：7.2-7.4液體合成培養(yǎng)基：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等；通常還需加入血漿、血清等天然成分。4）氣體環(huán)境：2）營(yíng)養(yǎng)：3）溫度和pH：“95％空氣+5％CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的；CO2維持培養(yǎng)液的PH首先對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具無(wú)菌處理；通常培養(yǎng)液中添加抗生素防止培養(yǎng)過(guò)程中污染；此外定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（閱讀課本46-47頁(yè)）:1）生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2）基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞3）檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性4）細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物

比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物獲得新個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體2、怎樣利用動(dòng)物的細(xì)胞獲得完整的動(dòng)物個(gè)體？動(dòng)物細(xì)胞核移植想一想二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)

和克隆動(dòng)物

將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中。使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。1、動(dòng)物核移植：克?。褐笍囊粋€(gè)共同的祖先，通過(guò)無(wú)性繁殖的方式產(chǎn)生出來(lái)的一群遺傳特性相同的DNA分子，細(xì)胞或個(gè)體?？寺“ㄈ齻€(gè)層次

分子水平：如PCR擴(kuò)增DNA

細(xì)胞水平：如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

個(gè)體水平：如克隆動(dòng)物1、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？其中哪項(xiàng)技術(shù)是其他技術(shù)的基礎(chǔ)？2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過(guò)程？其中制成細(xì)胞懸液的目的？3、動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)的特性？4、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)有什么區(qū)別？5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？培養(yǎng)箱中加入5%的二氧化碳的目的是什么？6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用？7、動(dòng)物核移植的概念、原理？◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞.為什么？◆用的是減Ⅱ中期細(xì)胞，為什么？◆胚胎移植2、核移植流程供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)）

1.體積大，易操作。2.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型供體細(xì)胞（供核）細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞

卵巢卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核無(wú)核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛歸納:1.共分成兩大階段：核移植和胚胎移植2.生殖方式：無(wú)性生殖核移植過(guò)程3、你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是。1）克隆動(dòng)物的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自于受體卵母細(xì)胞；2）生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境影響3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程.2、保護(hù)瀕危物種.3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植.4、了解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程；追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題

（閱讀課本50頁(yè)）成功率低動(dòng)物幼體產(chǎn)出概率＜10％克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題克隆動(dòng)物的食品安全性問(wèn)題存在爭(zhēng)議知識(shí)結(jié)構(gòu)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的概念體細(xì)胞核移植技術(shù)的過(guò)程體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題1、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)D2、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這