GB/T 34265-2017Sanger法測序技術(shù)指南

ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34265—2017

Sanger法測序技術(shù)指南

GuideforthemethodofSangersequencing

2017-09-07發(fā)布2018-04-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T34265—2017

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

縮略語

4……………………2

原理

5………………………2

主要儀器設(shè)備

6、……………2

法基因測序指標(biāo)

7Sanger…………………3

法基因測序方法

8Sanger…………………4

法基因測序的應(yīng)用

9Sanger………………5

附錄資料性附錄法測序原理示意圖

A()Sanger………6

附錄資料性附錄試劑及溶液配制

B()…………………7

附錄資料性附錄測序反應(yīng)體系的配制

C()……………8

附錄資料性附錄擴(kuò)增程序

D()…………9

附錄資料性附錄待測序產(chǎn)物純化

E()…………………10

參考文獻(xiàn)

……………………11

GB/T34265—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國生化檢測標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位深圳華因康基因科技有限公司深圳市華因康高通量生物技術(shù)研究院廣州康昕

:、、

瑞基因健康科技有限公司武漢康昕瑞基因健康科技有限公司中國測試技術(shù)研究院上海交通大學(xué)醫(yī)

、、、

學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院國家人類基因組南方研究中心中國計量科學(xué)研究院中山大學(xué)腫瘤防治中心

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人盛司潼譚輝彪李花曾濤楊杰斌周李華張俊王升躍全燦陳功

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34265—2017

引言

基因測序方法是基因科技產(chǎn)業(yè)鏈的核心技術(shù)其發(fā)展?fàn)顩r直接關(guān)系到生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展?fàn)顩r對生物

,,

學(xué)癌癥攻克遺傳學(xué)醫(yī)藥研制藥效分析農(nóng)業(yè)新能源國家民族戰(zhàn)略安全和人類生命健康安全具有

、、、、、、、

至關(guān)重要的支撐作用

。

基因測序技術(shù)在全球的發(fā)展非常迅速目前實(shí)際應(yīng)用最廣泛的是測序方法它是超高精度

,Sanger,

測序的黃金標(biāo)準(zhǔn)是迄今為止唯一既能用于人類基因組提供從頭測序又能用于從頭組裝的技術(shù)將

,,。

測序方法標(biāo)準(zhǔn)化并加以推廣應(yīng)用生物企業(yè)乃至整個國內(nèi)行業(yè)就會獲得一個絕好的技術(shù)規(guī)范和

Sanger,

保護(hù)自我發(fā)展的壁壘推動整個行業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展提升整個行業(yè)的技術(shù)實(shí)力早日實(shí)現(xiàn)測序

,,。Sanger

方法的標(biāo)準(zhǔn)化將對我國基因生物檢測產(chǎn)業(yè)這一戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起到至關(guān)重要的促進(jìn)作用為

,。

了使測序方法更加規(guī)范有效發(fā)揮其重要的科技支撐作用有必要對其制定標(biāo)準(zhǔn)

Sanger,,。

由于測序方法并非單一技術(shù)涉及到不同技術(shù)領(lǐng)域的結(jié)合包括生物化學(xué)機(jī)械數(shù)據(jù)處理

Sanger,,、、、

等因此本標(biāo)準(zhǔn)僅對法基因測序的術(shù)語技術(shù)指標(biāo)以及所涉及的儀器設(shè)備試劑方法進(jìn)行說明

,Sanger、,、、

和規(guī)定

。

Ⅱ

GB/T34265—2017

Sanger法測序技術(shù)指南

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測序方法的術(shù)語和定義縮略語原理主要儀器設(shè)備法基因測序

Sanger、、、、、Sanger

指標(biāo)法基因測序方法法基因測序的應(yīng)用

、Sanger、Sanger。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于對動物組織植物組織血液口腔黏膜毛發(fā)糞便土壤微生物等生物樣品中的

、、、、、、、

通過測序方法進(jìn)行測序

DNASanger。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

基因測序genesequencing

對核酸分子的核苷酸排列順序的測定即測定組成核酸分子的腺嘌呤鳥嘌呤胞嘧啶

,(A)、(G)、(C)

和胸腺嘧啶或者是尿嘧啶的排列順序

(T)(U)。

定義

[GB/T30989—2014,3.18]

32

.

Sanger測序方法methodofSangersequencing

用于基因測序的雙脫氧鏈末端終止法在鏈延伸過程中利用熒光標(biāo)記雙脫氧堿基隨機(jī)阻斷產(chǎn)生以

,,

結(jié)束的四組不同長度的核苷酸鏈