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教學(xué)目標(biāo)學(xué)會(huì)檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)自學(xué)指導(dǎo)二:利用5分鐘閱讀13—14頁(yè)的實(shí)驗(yàn)部分,回答以下問(wèn)題,看誰(shuí)回答得又快又好。1.檢測(cè)還原性糖時(shí),可以選用糖含量高的甘蔗嗎?2.雙縮脲試劑的成分是什么?如何使用?3.還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)現(xiàn)象分別是什么?4.課本15頁(yè)鞏固提高3(4)。一、實(shí)驗(yàn)原理可溶性還原糖+蛋白質(zhì)+脂肪+斐林試劑雙縮脲試劑磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ染液蘇丹Ⅳ染液橘黃色紅色紫色顏色反應(yīng)班氏試劑二、幾種重要的試劑雙縮脲試劑A液(0.1g/mL的NaOH溶液)B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)現(xiàn)配現(xiàn)用先加A液再加B液班氏試劑:也可用于鑒定可溶性還原糖。蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液:用來(lái)鑒定脂肪的存在三、實(shí)驗(yàn)材料(實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵)1、可溶性還原糖的鑒定選擇含糖量較高、顏色為白色或近于白色的植物組織(蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜)或葡萄糖溶液2、脂肪的鑒定:選擇花生種子或食用植物油3、蛋白質(zhì)的鑒定一般選用浸泡1~2d的富含蛋白質(zhì)的大豆種子(豆?jié){)或用雞蛋清或蛋白質(zhì)懸液四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟1、可溶性還原糖的鑒定(1)分別向甲、乙兩個(gè)試管中加入葡萄糖和水各2ml。(2)兩個(gè)試管滴入等量的班氏試劑4—5滴,水浴加熱1—2分鐘。甲試管產(chǎn)生磚紅色沉定。2、脂肪的鑒定(1)分別向甲、乙兩個(gè)試管中加入食用油和水各2ml(2)向兩只試管滴入蘇丹Ⅲ染液4—5滴,染色2—3分鐘。觀察顏色變化。2、蛋白質(zhì)的鑒定(1)
分別向甲、乙兩個(gè)試管中加入蛋白質(zhì)懸浮液和水各2ml(2)鑒定樣液:取2mL樣液于試管甲中→加入
2mL雙縮脲試劑A液搖勻(造成一個(gè)堿性環(huán)境)→加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,注意顏色變化(溶液變?yōu)樽仙?。另?/p>
清水于試管Ⅱ中→加入
搖勻→
顏色變化,作為
。2mL(A液、B液)無(wú)對(duì)照課堂練習(xí)1、用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液顏色的變化過(guò)程是()A、無(wú)色→磚紅色(沉淀)。B、淺藍(lán)色→磚紅色(沉淀)。C、淺藍(lán)色→藍(lán)色→磚紅色(沉淀)。D淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀)。D2、在用雙縮尿試劑鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)時(shí),正確的操作是()
A、2ml蛋白質(zhì)稀釋液先加0、1g/ml的NaOH,再加3—4滴0、01g/mlCuSO4溶液。
B、2ml蛋白質(zhì)稀釋液先加3—4滴0、01g/mlCuSO4溶液,再加0、1g/ml的NaOH
C、2ml蛋白質(zhì)稀釋液,同時(shí)加3—4滴0、01g/mlCuSO4和0、1g/ml的NaOH
混合液。
D、在NaOH和CuSO4混合液中加入蛋白質(zhì)稀釋液。A3、下列哪種試劑在使用過(guò)程中,必須經(jīng)過(guò)加熱()
A、斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過(guò)程中;B、蘇丹Ⅲ在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí);
C、雙縮尿試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí);
D、碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)。4、下列糖中能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是()A、淀粉;B、果糖;C、蔗糖;D、纖維素。AB在蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)中,必須先加A液再加B液的原因是:
為什么加入3—4滴B液而不能過(guò)量?在堿性溶液中,蛋白質(zhì)容易與Cu2+
發(fā)生紫色反應(yīng),否則就容易生成藍(lán)色Cu(OH)2沉淀對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象有遮蔽作用加入過(guò)量的雙縮尿試劑B液,CuSO4在堿性溶液中生成大量的藍(lán)色Cu(OH)2沉淀會(huì)遮蔽所產(chǎn)生的紫色。補(bǔ)充脂肪的鑒定:所用材料一要脂肪含量高,二要有一定的大小才能做徒手切片。以花生種子為最好。將花生種子浸泡3~4h使其變軟,有利于切成薄片,但浸泡時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則組織太軟,切下的薄片不易成形。2、脂肪的鑒定(1)切片制作(2)染色:在花生子葉切片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液→2~3min中后,吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精,再滴1~2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片(3)鏡檢鑒定:在低倍物鏡下觀察,找到花生子葉切片的最薄處,移至視野中央→轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍物鏡觀察(脂肪滴:橘黃色的圓形小顆粒)制備實(shí)驗(yàn)材料去種皮、削平面、切片染色滴2—3滴蘇丹Ⅲ染液染色2—3分鐘去浮色在玻片上滴1—2滴體積分?jǐn)?shù)為50%酒精溶液,洗去浮色制作臨時(shí)裝片放在顯微鏡下觀察(先低倍后高倍)補(bǔ)充斐林試劑甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)乙液(
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