標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 35541-2017 PFU DNA聚合酶》是中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)之一,主要針對PFU DNA聚合酶的質(zhì)量和技術(shù)要求進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。該標(biāo)準(zhǔn)適用于以重組技術(shù)生產(chǎn)的PFU DNA聚合酶產(chǎn)品的質(zhì)量控制與檢測。

標(biāo)準(zhǔn)首先定義了PFU DNA聚合酶的基本性質(zhì)和作用機(jī)理,這是一種來源于嗜熱菌Pyrococcus furiosus的高度熱穩(wěn)定DNA聚合酶,具有5'到3'的DNA合成活性以及3'到5'的外切酶校正活性,這使得它在PCR反應(yīng)中能夠提高擴(kuò)增產(chǎn)物的保真度。

接著,《GB/T 35541-2017》對PFU DNA聚合酶的技術(shù)指標(biāo)提出了具體要求,包括但不限于酶活性單位、純度、穩(wěn)定性等關(guān)鍵參數(shù)。其中,酶活性通過特定條件下每分鐘內(nèi)摻入的脫氧核苷酸數(shù)量來衡量;而純度則通常指樣品中目標(biāo)酶與其他蛋白質(zhì)的比例;穩(wěn)定性考察的是酶在不同儲(chǔ)存條件下的性能保持情況。

此外,該文件還提供了詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法用于測定上述各項(xiàng)指標(biāo),如使用瓊脂糖凝膠電泳分析酶的純度、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)評估酶活性等。這些測試旨在確保PFU DNA聚合酶產(chǎn)品符合既定標(biāo)準(zhǔn),并能在科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用中發(fā)揮預(yù)期效果。


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....

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  • 2017-12-29 頒布
  • 2018-07-01 實(shí)施
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文檔簡介

ICS07080

C27.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35541—2017

pfuDNA聚合酶

pfuDNApolymerase

2017-12-29發(fā)布2018-07-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T35541—2017

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

技術(shù)要求

4…………………1

檢驗(yàn)方法

5…………………2

包裝運(yùn)輸和貯存

6、…………………………2

保質(zhì)期

7……………………2

附錄規(guī)范性附錄聚合酶酶活檢測

A()pfuDNA………3

附錄規(guī)范性附錄核酸外切酶檢測

B()…………………6

附錄規(guī)范性附錄核酸內(nèi)切酶檢測

C()…………………8

GB/T35541—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國工具酶標(biāo)準(zhǔn)化工作組歸口

(SAC/SWG11)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位廈門致善生物科技股份有限公司福建華燦制藥有限公司福建南生科技有限公

:、、

司深圳華因康基因科技有限公司華燦南生廈門生物技術(shù)有限公司中國科學(xué)院微生物研究所廈門

、、()、、

大學(xué)北京化工大學(xué)山東大學(xué)復(fù)旦大學(xué)海貍納米科技蘇州有限公司上海博仕生物科技有限公司

、、、、()、、

安琪酵母股份有限公司中國農(nóng)業(yè)大學(xué)福建農(nóng)林大學(xué)上海百賽生物科技有限公司

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人宋娜杰黃發(fā)燦鄭登忠何昌華詹學(xué)雄李慶閣趙晶李全宏盛司潼

:、、、、、、、、、

陳勁春陳秀蘭鐘江劉斌姚娟任輝邢志剛黃發(fā)喜張熙穎鄧麗君章麗麗

、、、、、、、、、、。

GB/T35541—2017

引言

聚合酶來源于耐熱球菌Pyrococcusfariosus具有極高的熱穩(wěn)定性和保真性被廣泛應(yīng)

pfuDNA(),,

用于常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)制定聚合酶國家標(biāo)準(zhǔn)用以推動(dòng)該類工具酶的產(chǎn)業(yè)化對于

。pfuDNA,,pfu

聚合酶的生產(chǎn)和使用具有重要的意義

DNA。

GB/T35541—2017

pfuDNA聚合酶

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了聚合酶的技術(shù)要求檢驗(yàn)方法包裝運(yùn)輸貯存和保質(zhì)期

pfuDNA、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于以基因工程菌制成的聚合酶

pfuDNA。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志

GB/T191。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

31

.

pfuDNA聚合酶pfuDNApolymerase

一種來源于耐熱球菌Pyrococcusfuriosus分子質(zhì)量為具有極高的熱穩(wěn)定性和保真性的

,90ku,

聚合酶該酶能催化脫氧核糖核苷酸從模板的方向聚合到引物上具有外切酶活性無

DNA。5'-3',3'-5',

外切酶活性

5'-3'。

32

.

pfuD

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