標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 36389-2018 T4 DNA連接酶》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),該標(biāo)準(zhǔn)主要規(guī)定了T4 DNA連接酶的術(shù)語定義、技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則以及包裝、標(biāo)志、運(yùn)輸和貯存等方面的要求。T4 DNA連接酶是一種在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的酶,主要用于催化雙鏈DNA或RNA中的磷酸二酯鍵形成,特別是在DNA片段間的連接過程中發(fā)揮重要作用。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,對(duì)于T4 DNA連接酶的具體要求包括但不限于:活性單位的定義與測(cè)定方法;純度指標(biāo)及其檢測(cè)手段;穩(wěn)定性測(cè)試條件等。此外,還明確了產(chǎn)品應(yīng)達(dá)到的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),比如外觀性狀、pH值范圍、酶活性濃度等關(guān)鍵參數(shù),并提供了詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)操作流程來確保這些特性的準(zhǔn)確測(cè)量。

在試驗(yàn)方法部分,標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了如何通過特定的生化反應(yīng)體系來評(píng)估T4 DNA連接酶的功能特性,如使用含有已知序列末端的線性質(zhì)粒作為底物,在適宜條件下觀察并量化由該酶催化產(chǎn)生的環(huán)形質(zhì)粒數(shù)量變化情況,以此為基礎(chǔ)計(jì)算出酶活力單位U/μL。

關(guān)于檢驗(yàn)規(guī)則方面,《GB/T 36389-2018 T4 DNA連接酶》給出了批次抽樣檢查的方法論指導(dǎo)原則,規(guī)定了出廠前每批產(chǎn)品必須經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量審核程序,確保其符合既定規(guī)格。同時(shí),針對(duì)不合格品處理辦法也做了明確規(guī)定。

最后,在包裝、標(biāo)志、運(yùn)輸和貯存章節(jié)中,標(biāo)準(zhǔn)提出了為保證T4 DNA連接酶安全有效使用的具體措施建議,強(qiáng)調(diào)了正確標(biāo)識(shí)的重要性,并對(duì)儲(chǔ)存環(huán)境(如溫度)提出了明確要求,以避免因不當(dāng)保存而導(dǎo)致的產(chǎn)品失效。


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  • 2018-06-07 頒布
  • 2019-01-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS07080

C27.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36389—2018

T4DNA連接酶

T4DNAligase

2018-06-07發(fā)布2019-01-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

T4DNA連接酶

GB/T36389—2018

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20186

*

書號(hào)

:155066·1-60632

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T36389—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)工具酶標(biāo)準(zhǔn)化工作組歸口

(SAC/SWG11)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位福建南生科技有限公司福建華燦制藥有限公司蘇州海貍生物醫(yī)學(xué)工程有限公

:、、

司廈門致善生物科技股份有限公司廈門大學(xué)安琪酵母股份有限公司

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人鄭登忠詹學(xué)雄黃發(fā)燦任輝趙晶章麗麗宋娜杰張永有姚鵑

:、、、、、、、、。

GB/T36389—2018

引言

連接酶來源于重組基因工程菌催化相鄰鏈的末端和末端以磷酸二酯

T4DNA,DNA5'-P3'-OH

鍵結(jié)合的反應(yīng)促使黏性末端之間或平末端之間的連接制訂連接酶國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)用以推動(dòng)該

,。T4DNA,

類工具酶的產(chǎn)業(yè)化具有重要的意義

GB/T36389—2018

T4DNA連接酶

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了連接酶的技術(shù)要求檢驗(yàn)方法包裝運(yùn)輸貯存和保質(zhì)期

T4DNA、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于從重組基因工程菌分離純化的連接酶

T4DNA。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志

GB/T191

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

電泳裝置

YY/T0087

醫(yī)用離心機(jī)

YY/T0657

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

T4DNA連接酶T4DNAligase

一種核酸連接酶能催化相鄰鏈的末端和末端以磷酸二酯鍵結(jié)合的反應(yīng)促使

,DNA5'-P3'-OH,

黏性末端之間或平末端之間的連接

32

.

T4DNA連接酶活性單位activityunitofT4DNAligase

在連接酶反應(yīng)緩沖液中反應(yīng)條件下能使的經(jīng)消化

20μL1×T4DNA,16℃,30min50%HindⅢ

的片段端濃度為連接所需的酶量定義為個(gè)活性單位

λDNA[5'0.12μmol/L(300μg/mL)]1(U)。

4技術(shù)要求

41外觀

.

澄清透明的液體無沉淀

,

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