GB/T 36809-2018可可叢枝病菌檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T36809—2018

可可叢枝病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofMoniliophthoraperniciosa

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

可可叢枝病菌檢疫鑒定方法

GB/T36809—2018

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20189

*

書號

:155066·1-61161

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T36809—2018

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫局中華人民共和國海南出入境檢驗檢

:、

疫局

。

本標準主要起草人馮黎霞王衛(wèi)芳何日榮魏霜劉福秀何瑞芳

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T36809—2018

可可叢枝病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了植物檢疫中可可叢枝病菌Moniliohthoraerniciosa的檢疫鑒定方法

(pp)。

本標準適用于可可叢枝病菌的檢疫鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

培養(yǎng)基制備指南第部分實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則

SN/T1538.11:

3方法原理

可可叢枝病菌在寄主上的為害癥狀病菌形態(tài)學特性與培養(yǎng)特征及分子生物學特征是制定本標準

、

的主要依據(jù)該病菌的分類地位寄主范圍分布和為害癥狀等背景資料參見附錄

。、、A。

4設(shè)備用具

41儀器設(shè)備

.

體視顯微鏡生物顯微鏡電子天平感量高壓滅菌器超凈工作臺生物培養(yǎng)箱

、、(0.001g)、、、、PCR

儀電泳儀和凝膠成像系統(tǒng)

、。

42實驗用具

.

標簽定性濾紙樣品袋保鮮袋手持放大鏡鑷子解剖刀酒精燈接種針培養(yǎng)皿直徑

、、、、、、、、、(9.0cm)、

燒杯量筒三角瓶載玻片蓋玻片可調(diào)移液器可調(diào)范圍離心管

、、、、、(2.5μL~1000μL)、。

5試劑和培養(yǎng)基

51試劑

.

青霉素鏈霉素無水乙醇馬鈴薯葡萄糖瓊脂乙醇無菌雙蒸水提取緩沖液

、、、、、、70%、、2%CTAB、

溶液醋酸鈉溶液試劑包括聚合酶緩沖液苯酚三氯甲烷異

10%SDS、3mol/L、PCR(Taq、dNTP、)、、、

戊醇乙二胺四乙酸瓊脂糖分子量標準物電泳緩沖液

、Tris-HCl、EDTA()、、、TAE。

52培養(yǎng)基

.

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基去皮馬鈴薯葡萄糖瓊脂加水至

(PDA):200g,20g,18g,1000mL,

高壓滅菌

121℃20min。

選擇性培養(yǎng)基高壓滅菌后的冷卻至