水迷宮實(shí)驗(yàn)報(bào)告doc

--讓每個(gè)人公平地提升自我10水迷宮試驗(yàn)報(bào)告篇一：Morris水迷宮Morris水迷宮Morris水迷宮是一種能夠?qū)崟r(shí)和離線分析Morris水迷Morris水迷宮以攝像機(jī)和電腦作為硬件根底，試驗(yàn)過(guò)程中不需要對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物作特別標(biāo)記。目標(biāo)識(shí)別方法可以選擇灰度閾值方法或者背景差值方法。morris件或者Excel文件，便利利用Excel，SPSS等工具軟件作進(jìn)一步分析。本系統(tǒng)除了可以適用于Morris可以用于分析大小鼠抑郁無(wú)望試驗(yàn)以及負(fù)重游泳疲乏試驗(yàn)。Morris環(huán)境光照條件沒(méi)有太高的要求設(shè)備和方法。水迷宮使用的水迷宮池為直徑90cm-180cm，高50cm溫控恒溫水池，水池外表承受靜電噴塑方法處理，目標(biāo)站臺(tái)凹凸及大小均可調(diào)整。攝像機(jī)垂直放置于水迷宮池中心上方大約2米處，調(diào)整鏡頭焦距使得其視角可以掩蓋整個(gè)試驗(yàn)區(qū)域。系統(tǒng)僅在該區(qū)域內(nèi)采樣，硬件系統(tǒng)由電腦和連接到黑白CCD攝像機(jī)的視頻采集卡組成，視頻信號(hào)由視頻采集卡轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào)后輸入到計(jì)算機(jī)?？梢栽O(shè)置試驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)短以及動(dòng)物找到平臺(tái)后自動(dòng)完畢試驗(yàn)?？梢栽O(shè)置試驗(yàn)開頭后延時(shí)等待時(shí)間以便利對(duì)試驗(yàn)過(guò)程的掌握。可以設(shè)置識(shí)別區(qū)域面積大小范圍從而排解水池反光可能產(chǎn)生的誤識(shí)別。試驗(yàn)完畢后，可以計(jì)算埋伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)、總游泳距離、各象限游泳時(shí)間、距離及其所占百分比等水迷宮試驗(yàn)數(shù)據(jù)。Morris埋伏期/游泳總距離/平均速度/穿越平臺(tái)的次數(shù)/距離/百分比/平均速度平臺(tái)位置角度/入水點(diǎn)位置角度游泳軌跡圖輸出/軌跡圖編輯圓形區(qū)域分析：四象限中四個(gè)虛擬平臺(tái)四周位置的游泳軌跡分析，分析參數(shù)包括時(shí)間/距離/百分比/密度環(huán)形區(qū)域分析：與平臺(tái)相切或相鄰的環(huán)帶區(qū)域內(nèi)的軌跡分析，分析參數(shù)包括時(shí)間/路程/百分比/密度其他特點(diǎn)：可設(shè)置彼此獨(dú)立的試驗(yàn)數(shù)據(jù)存檔文件夾，便于試驗(yàn)資料治理異地分析試驗(yàn)結(jié)果，可以將局部試驗(yàn)記錄數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移到其他電腦上做數(shù)據(jù)分析和輸出可同步保存原始的試驗(yàn)影像資料，便于回放比對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)或者重分析試驗(yàn)結(jié)果可以直接輸出單次試驗(yàn)的試驗(yàn)報(bào)告，無(wú)須另外編輯處理，便利學(xué)生試驗(yàn)試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以直接生成Excel文件，便于進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)處理，可識(shí)別分析白鼠或者黑〔灰〕鼠，動(dòng)物無(wú)需做特別標(biāo)記可選功能模塊包括游泳靜止?fàn)顟B(tài)分析〔強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)分析〕模塊。Morris水迷宮動(dòng)物在其中不得不爭(zhēng)論水池中隱蔽的平臺(tái)的位置，該系統(tǒng)已經(jīng)成為爭(zhēng)論小型嚙齒類動(dòng)物學(xué)習(xí)或記憶行為的經(jīng)典系統(tǒng)。水迷宮系統(tǒng)包括帶水池的平臺(tái)，低照度靈敏CCDDVDPC，遙控裝置和連接線?！緺?zhēng)論】水迷宮試驗(yàn)前一天應(yīng)當(dāng)怎么做水迷宮正式試驗(yàn)開頭前一天，是否需要讓大鼠在水中試游一下，具體應(yīng)1min，在這個(gè)過(guò)程中需要引導(dǎo)大鼠上平臺(tái)么，是在什么時(shí)候引導(dǎo)呢？各人體會(huì)這一個(gè)過(guò)程對(duì)后面的試驗(yàn)影響很大，期望有閱歷的前輩指點(diǎn)一下，感謝protocol游泳一次，讓其生疏環(huán)境，1在試驗(yàn)時(shí)間完畢時(shí)還未找到時(shí)賜予引導(dǎo)。依我做的試驗(yàn)體會(huì)，這一過(guò)程對(duì)后面的影響并不大，老鼠是種格外聰明的動(dòng)物，只要訓(xùn)練時(shí)嚴(yán)格依據(jù)程序進(jìn)展，大局部都會(huì)很快的找到平臺(tái)的。具體的訓(xùn)練期程序很多文獻(xiàn)及儀器說(shuō)明書都有，等你做了試驗(yàn)就會(huì)有自己的體會(huì)了，祝試驗(yàn)成功。感謝你的講解，但是我做的時(shí)候遇到了一些問(wèn)題，一28±10s二是訓(xùn)練后埋伏期并沒(méi)有隨訓(xùn)練次數(shù)增加而縮短，而是根本〔我做了3天，每天的比照組埋伏期平均值〕不知道是不是和我在預(yù)適應(yīng)的時(shí)候讓他們游泳的時(shí)間不一樣有關(guān)。請(qǐng)問(wèn)在試驗(yàn)中還需要留意些什么問(wèn)題以保證少受外界因素的影響？我們?cè)谧龅臅r(shí)候，并不做預(yù)適應(yīng)的，在第一次訓(xùn)練時(shí)，5拿棍子引導(dǎo)它一下，以后的學(xué)習(xí)及記憶的過(guò)程中均如此。我66動(dòng)物的個(gè)體差異一般都比較大啊，不過(guò)正常比照組要好一些的。在試驗(yàn)過(guò)程中盡量保持條件全都，另外，肯定要平行。由于時(shí)間很長(zhǎng)，盡量保持各組的時(shí)間全都。對(duì)，還有人的站位，盡量離水迷宮遠(yuǎn)一些，防止大鼠將你當(dāng)作參照物，造成視覺(jué)混淆。請(qǐng)教一下，看來(lái)大家都是作關(guān)于記憶方面的，不知道大家所用的分子生物學(xué)指標(biāo)都是什么了？除了檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)還有別的嗎？都是檢測(cè)哪些具體的又是怎么做的了，大家爭(zhēng)論下。感謝了。恰好有一份水迷宮的文獻(xiàn)，講的格外好。共享給大家related forms of learning memory.pdf.part1.rar(100.0k)文件較大，分卷壓縮了related forms of learning memory.pdf.part2.rar(96.72k)wrote:請(qǐng)教一下，看來(lái)大家都是作關(guān)于記憶方面的，不知道大家所用的分子生物學(xué)指標(biāo)都是什么了？除了檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)還有別的嗎？都是檢測(cè)哪些具體的又是怎么做的了，大家討論下。感謝了。檢測(cè)海馬及邊緣系統(tǒng)的膽堿能神經(jīng)元喪失狀況老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié)bmuerwrote:感謝你的講解，但是我做的時(shí)候遇到了一些問(wèn)題，一是動(dòng)物之間的個(gè)體差異很大，標(biāo)準(zhǔn)差或許在28±10s左右，二是訓(xùn)練后埋伏期并沒(méi)有隨訓(xùn)練次數(shù)增加而縮短，而是根本沒(méi)〔我做了3天，每天的比照組埋伏期平均值根本〕不知道是不是和我在預(yù)適應(yīng)的時(shí)候讓他們游泳的時(shí)間不一樣有關(guān)。請(qǐng)問(wèn)在試驗(yàn)中還需要留意些什么問(wèn)題以保證少受外界因素的影響？經(jīng)過(guò)學(xué)習(xí)幾次之后，大局部鼠都能正確找到平臺(tái)，而且埋伏期隨著次數(shù)的增加而縮短，很明顯的。3protocol中的一般試驗(yàn)程序所被承受的7天程序，3天是少了，附件有水迷宮的中文程序，里面有具體的程序包括試驗(yàn)天數(shù)，可能對(duì)你有所幫助。篇二：小鼠迷宮試驗(yàn)一、Morris水迷宮試驗(yàn)(一)試驗(yàn)概述MorrisMorris2080(1981)代初設(shè)計(jì)并應(yīng)用于腦學(xué)習(xí)記憶機(jī)制爭(zhēng)論的一種試驗(yàn)AD(二)試驗(yàn)原理雖然老鼠是天生的游泳健將，但是它們卻厭惡處于水中的狀態(tài)，同時(shí)游泳對(duì)于老鼠來(lái)說(shuō)是格外消耗體力的活動(dòng)，他們會(huì)本能的查找水中的休息場(chǎng)所。查找休息場(chǎng)所的行為涉及到一個(gè)簡(jiǎn)單的記憶過(guò)程，包括收集與空間定位有關(guān)的視覺(jué)信息，再對(duì)這些信息進(jìn)展處理、整理、記憶、加固、然后再取出，目的是能成功的航行并且找到隱蔽在水中的站臺(tái)，最終從水中逃脫。(三)試驗(yàn)方法分獲得性訓(xùn)練、探查和對(duì)位訓(xùn)練3個(gè)過(guò)程。1．獲得性訓(xùn)練〔Acquisitionphase〕理論上將水池分4將動(dòng)物〔大鼠或小鼠〕頭朝池壁放入水中，放入位置隨機(jī)取東、西、南、北四個(gè)起始位置之一。記錄動(dòng)物找到水下平臺(tái)的時(shí)間〔s60s10s．將動(dòng)物移開、擦干。必要時(shí)將動(dòng)物〔尤其是大鼠〕放在150W的白熾燈下烤5min，放回籠內(nèi)。每只動(dòng)物每天訓(xùn)415~20min5d。探查訓(xùn)練(probetrial1)最終一次獲得性訓(xùn)練完畢后的其次天，將平臺(tái)撤除，開頭60s的探查訓(xùn)練。將動(dòng)物由原先平臺(tái)象限的對(duì)側(cè)放入水中。記錄動(dòng)物在目標(biāo)象限〔原先放置平臺(tái)的象限〕所花的時(shí)間和進(jìn)入該象限的次數(shù)，以此作為空間記憶的檢測(cè)指標(biāo)。對(duì)位訓(xùn)練〔reveralphase〕測(cè)定動(dòng)物的工作記憶workingmemory。探查訓(xùn)練完畢后的其次天，開頭維持天的對(duì)位訓(xùn)練。將平臺(tái)放在原先平臺(tái)所在象限的對(duì)側(cè)象限，方法與獲得性訓(xùn)練一樣。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺(tái)的時(shí)間和游泳距離以及游泳速度。對(duì)位探查訓(xùn)練〔probetrial2〕最終一次對(duì)位訓(xùn)練的其次天進(jìn)展。方法與上述探查訓(xùn)練類似。記錄動(dòng)物60s內(nèi)動(dòng)物在目標(biāo)象限〔平臺(tái)其次次所在區(qū)〕所花時(shí)間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。(一)試驗(yàn)概述高架十字迷宮是利用動(dòng)物對(duì)異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸放開臂的恐驚形成沖突沖突行為來(lái)考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。高架十字迷宮具有一對(duì)開臂和一對(duì)閉臂，嚙齒類動(dòng)物由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng)，但出于古怪心和探究性又會(huì)在開臂中活動(dòng)，在面對(duì)穎刺激時(shí)，動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生探究的沖動(dòng)與恐驚，這就造成了探究與回避的沖突行為，從而產(chǎn)生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進(jìn)入開臂的次數(shù)與時(shí)間，十字迷宮距離地面較高，相當(dāng)于人站在峭壁上，使試驗(yàn)對(duì)象產(chǎn)生恐驚和擔(dān)憂心理。高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于藥開發(fā)/篩選/評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)-爭(zhēng)論和計(jì)算機(jī)關(guān)心教學(xué)等領(lǐng)域，是醫(yī)學(xué)院校與科研機(jī)構(gòu)開展行為學(xué)爭(zhēng)論尤其是焦慮抑郁爭(zhēng)論的經(jīng)典試驗(yàn)。(二)試驗(yàn)方法試驗(yàn)開頭時(shí)將小鼠從中心格面對(duì)閉合臂放入迷宮，記錄5閉合臂停留時(shí)間。計(jì)算開放臂停留時(shí)間比例，開放臂進(jìn)入次數(shù)比例，高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。試驗(yàn)完成后將小鼠取Xeye物行為學(xué)軟件進(jìn)展數(shù)據(jù)分析。進(jìn)入開放臂次數(shù)及停留時(shí)間與大鼠的焦慮心情成負(fù)相關(guān)，進(jìn)入開放臂次數(shù)越少，停留時(shí)間越短，說(shuō)明老鼠的焦慮心情越嚴(yán)峻。三、Y迷宮試驗(yàn)Y記憶的測(cè)試。Y有食物供給裝置，依據(jù)分析動(dòng)物取食的策略即進(jìn)入各臂的次數(shù)、時(shí)間、正確次數(shù)、錯(cuò)誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的空間記憶力量。相對(duì)而言，Y對(duì)八臂迷宮來(lái)說(shuō)更加簡(jiǎn)潔，有肯定的有用性，現(xiàn)常用于學(xué)習(xí)記憶功能評(píng)價(jià)。Y迷宮、八臂迷宮這類食物獎(jiǎng)賞型迷宮任務(wù)能夠檢測(cè)嚙齒類動(dòng)物與海馬和前額葉腦區(qū)相關(guān)的空間參考記憶和空間工作記憶。當(dāng)動(dòng)物在迷宮中查找食物時(shí)，動(dòng)物需要依據(jù)迷宮四周的視覺(jué)標(biāo)示，記住它已搜尋過(guò)的迷宮臂，以避開重復(fù)進(jìn)入同一個(gè)臂，從而有效地獲得食物。這種類型的記憶能指導(dǎo)進(jìn)展中的行為，被稱為工作記憶。Y力，這相對(duì)于被動(dòng)回避等試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于：這種迷宮利用了嚙齒類動(dòng)物對(duì)異環(huán)境自然探究的自然習(xí)性，不需要?jiǎng)游飳W(xué)習(xí)任何規(guī)章來(lái)趨利避害，能夠有效地反映出動(dòng)物對(duì)異環(huán)境的識(shí)別記憶力量。(二)試驗(yàn)方法1．YY迷宮試驗(yàn)包含兩個(gè)階段，間隔1h。第一個(gè)階段為訓(xùn)練期，異臂被隔板擋住，小鼠由起始臂放入，在起始臂和其10min，訓(xùn)練完畢后，小鼠被放回飼養(yǎng)籠。1h22臂隔板，小鼠由起始臂放入，在3個(gè)臂中自由活動(dòng)5min。錄像記錄5min內(nèi)每只小鼠在各個(gè)臂停留的時(shí)間和穿梭次數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：Y迷宮試驗(yàn)中，5min內(nèi)小鼠在各個(gè)臂之間停Y5minY迷宮的起始臂、異臂和其他臂，但對(duì)于同一只小鼠，在迷宮試驗(yàn)的兩個(gè)階段，三個(gè)臂是固定的。由于小鼠對(duì)該迷宮測(cè)試的記憶時(shí)間最長(zhǎng)不超過(guò)數(shù)小時(shí)，所以該迷宮測(cè)試可以在同一只小鼠上反復(fù)進(jìn)展，但兩次試驗(yàn)需間隔至少1周，并轉(zhuǎn)變?nèi)齻€(gè)臂的搭配〔Delluetal，XX。評(píng)價(jià)空間識(shí)別記憶力量可以用小鼠在各個(gè)臂停留的時(shí)間作為檢測(cè)指標(biāo)，同時(shí)以動(dòng)物在各個(gè)臂的穿梭次數(shù)作為檢測(cè)其活動(dòng)力量的一個(gè)指標(biāo)〔Delluetal，1992，XX。2．YY-迷宮為一個(gè)三等臂式反射箱，三臂的夾角為120°，50~70V，大致固定在電擊小鼠，以小鼠馬上逃往安全區(qū)為一次正確反響。具體方3min，每次電擊延遲為5s，直到小鼠的訓(xùn)練過(guò)程中連續(xù)9次正確反響即為學(xué)會(huì)。記錄小鼠24h后進(jìn)展記憶保持力量的檢測(cè)，以正確反響次數(shù)占總檢測(cè)次數(shù)的百分比表示記憶保持力量(正確反響的次數(shù)/總檢測(cè)次數(shù)×100%)，此值越高說(shuō)明記憶力越好。(一)試驗(yàn)簡(jiǎn)介八臂迷宮〔放射臂迷宮〔radialarmmaz〕試驗(yàn)也是最為常用的評(píng)價(jià)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶力量的模型之一，由Olton等人于20世紀(jì)70年月中期建立。其根本依據(jù)是，掌握進(jìn)食的動(dòng)物受食物的驅(qū)使對(duì)迷宮各臂進(jìn)展探究；經(jīng)過(guò)肯定時(shí)間的訓(xùn)練，動(dòng)物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時(shí)測(cè)〔workingmemorymemory。所用動(dòng)物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對(duì)腦區(qū)毀損和多種藥物均很敏感。后者包括乙醇、東良宕堿〔抗膽堿能藥〕MK-801〔NMDA〕等。(二)試驗(yàn)方法動(dòng)物適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境124小時(shí)。此后每天訓(xùn)練完畢后限制性地賜予正常食料〔據(jù)體重不同，大鼠16-20g，小鼠2-3g，以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。其次天，迷宮各臂及中心區(qū)分撒著食物顆?！裁恐?~5粒，直徑約3~4mm。然后，同時(shí)將4〔通往各臂的門翻開10min。第三天，重復(fù)其次天的訓(xùn)練。這一過(guò)程讓動(dòng)物在沒(méi)有很強(qiáng)的應(yīng)激條件下生疏迷宮環(huán)境。第四天起，動(dòng)物單個(gè)進(jìn)展訓(xùn)練：在每個(gè)臂靠近外端10min后將動(dòng)物取出。第五天，將食物放在食盒內(nèi)，重復(fù)前一天的訓(xùn)練，24各臂門關(guān)閉，將動(dòng)物放在迷宮中心；30s動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒，直到動(dòng)物吃完全部4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完，則試驗(yàn)終止。每天訓(xùn)1h4工作記憶錯(cuò)誤〔workingmemoryerrors一次訓(xùn)練中動(dòng)物再次進(jìn)入已經(jīng)吃過(guò)食粒的臂；參考記憶錯(cuò)誤〔referencememoryerrors物進(jìn)入不曾放過(guò)食粒的臂；總的入臂次數(shù)；計(jì)算機(jī)還可記錄動(dòng)物在放射臂內(nèi)及中心區(qū)的活動(dòng)狀況，包括5次訓(xùn)練的工作記憶錯(cuò)誤為零、參考記憶錯(cuò)誤不超過(guò)1次時(shí)，可以開頭藥物測(cè)試或腦內(nèi)核團(tuán)構(gòu)造毀損試驗(yàn)。一般先給溶劑〔如生理鹽水〕，再給減弱記憶的藥物〔如東良宕堿、MK-801等，然后加用增加記憶的藥物，劑量由低到高。用兩個(gè)指標(biāo)評(píng)價(jià)動(dòng)物的記憶，即工作記憶錯(cuò)誤頻率〔frequencyofworkingmemoryerrors〕和參考記憶錯(cuò)誤頻率〔frequencyofreferencememoryerrors，分別等于工作記憶錯(cuò)誤或參考記憶錯(cuò)誤與總的入臂次數(shù)的比率。用這兩個(gè)指標(biāo)分別評(píng)價(jià)工作記憶與參考記憶。同時(shí)，計(jì)算平均探究時(shí)間〔averageexplorationtime，即測(cè)試時(shí)間與總的入臂次數(shù)之比，為評(píng)價(jià)一般運(yùn)動(dòng)活性的指標(biāo)。依據(jù)毀損的腦區(qū)構(gòu)造或所給減弱記憶的藥物的不同，工作記憶錯(cuò)誤頻率和/或參考記憶錯(cuò)誤頻率顯著增高，記憶增加藥物或治療可使這種錯(cuò)誤頻率降低。(五)留意事項(xiàng)小鼠放射迷宮設(shè)備和試驗(yàn)程序與大鼠類似，但迷宮規(guī)格應(yīng)比大鼠迷宮小1/4~1/2，以免增加小鼠行為操作難度。本試驗(yàn)也可只用來(lái)測(cè)定工作記憶。方法中唯一不同的是，在全部放射臂均放置食粒，而不是只選4個(gè)臂放置食粒。慢性應(yīng)激對(duì)動(dòng)物的迷宮操作可產(chǎn)生影響，且存在性別差異。經(jīng)過(guò)慢性應(yīng)激以后，雄性大鼠記憶力減弱，表現(xiàn)為記憶錯(cuò)誤頻