GB/T 4789.36-2008食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(yàn)

犐犆犛０７．１００．３０

犆５３

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜４７８９．３６—２００８

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)

大腸埃希氏菌犗１５７：犎７／犖犕檢驗(yàn)

犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—

犈狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻犗１５７：犎７／犖犕

２００８０５１６發(fā)布２００８１１０１實(shí)施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜４７８９．３６—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)分為四法，分別為：

———第一法：常規(guī)培養(yǎng)法；

———第二法：免疫磁珠捕獲法；

———第三法：全自動(dòng)酶聯(lián)熒光免疫分析儀篩選法；

———第四法：全自動(dòng)病原菌檢測系統(tǒng)篩選法。

本標(biāo)準(zhǔn)的第一法修改采用了美國食品藥品管理局（ＦＤＡ）《細(xì)菌分析手冊(cè)》第４Ａ章（２００２年）（Ｂａｃ

ｔｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｎａｌｙｔｉｃａｌＭａｎｕａｌ，Ｃｈａｐｔｅｒ４Ａ，２００２）；第二法修改采用了北歐食品分析委員會(huì)（ＮＭＫＬ）

Ｎｏ．１６４，１９９９；第三法修改采用了國際分析家學(xué)會(huì)（ＡＯＡＣＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ）ＡＯＡＣＲＩＰｅｒｆｏｒｍ

ａｎｃｅＴｅｓｔｅｄＭｅｔｈｏｄｓＶＩＤＡＳ犈．犆狅犾犻Ｏ１５７（ＥＣＯ）Ｔｅｓｔ，Ｎｏ．０１０５０２；第四法修改采用了ＡＯＡＣＲＩＰｅｒ

ｆｏｒｍａｎｃｅＴｅｓｔｅｄＭｅｔｈｏｄｓＢＡＸ犈．犆狅犾犻Ｏ１５７：Ｈ７，Ｎｏ．０５０５０１。

本標(biāo)準(zhǔn)的第一法與美國ＦＤＡ／ＢＡＭ方法相比主要差異如下：

———增菌培養(yǎng)基以ｍＥＣ＋ｎ肉湯替代了ＥＥＢ肉湯。

———增加了ＣＨＲＯＭａｇａｒＯ１５７顯色培養(yǎng)基。

本標(biāo)準(zhǔn)的第二法與ＮＭＫＬ，Ｎｏ．１６４，１９９９的方法相比主要差異如下：

———增菌培養(yǎng)基以ｍＥＣ＋ｎ肉湯替代了ｍＴＳＢ肉湯。

———修改增菌培養(yǎng)溫度４１．５℃±０．５℃為３６℃±１℃。

———增加了ＣＨＲＯＭａｇａｒＯ１５７顯色培養(yǎng)基。

本標(biāo)準(zhǔn)的第三法與ＡＯＡＣＲＩＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＴｅｓｔｅｄＭｅｔｈｏｄＶＩＤＡＳ犈．犆狅犾犻Ｏ１５７（ＥＣＯ）Ｔｅｓｔ，Ｎｏ．

０１０５０２的方法相比主要差異為增菌培養(yǎng)基以ｍＥＣ＋ｎ肉湯替代了ｍＴＳＢ肉湯。

本標(biāo)準(zhǔn)的第四法與ＡＯＡＣＲＩＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＴｅｓｔｅｄＭｅｔｈｏｄｓＢＡＸ犈．犆狅犾犻Ｏ１５７：Ｈ７，Ｎｏ．０５０５０１的

方法相比主要修改為生肉以外的其他食品增菌培養(yǎng)基以ｍＥＣ＋ｎ肉湯替代了ＥＥＢ肉湯。

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所。

本標(biāo)準(zhǔn)參與起草單位：河南省疾病預(yù)防控制中心、北京市疾病預(yù)防控制中心、浙江省疾病預(yù)防控制

中心、吉林省疾病預(yù)防控制中心、湖北省疾病預(yù)防控制中心、中華人民共和國上海出入境檢驗(yàn)檢疫局、中

國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉秀梅、廖興廣、張秀麗、陳倩、程蘇云、劉桂華、謝茂慧、李曉虹、田靜。

Ⅰ

書

犌犅／犜４７８９．３６—２００８

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)

大腸埃希氏菌犗１５７：犎７／犖犕檢驗(yàn)

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸埃希氏菌Ｏ１５７：Ｈ７和Ｏ１５７：ＮＭ的檢驗(yàn)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品和食物中毒樣品中大腸埃希氏菌Ｏ１５７：Ｈ７和Ｏ１５７：ＮＭ的檢驗(yàn)。

２設(shè)備和材料

除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下。

２．１天平：感量０．１ｇ、０．０１ｇ。

２．２均質(zhì)器。

２．３冰箱：２℃～５℃。

２．４恒溫培養(yǎng)箱：３６℃±１℃。

２．５恒溫水浴箱：４６℃±０．５℃，１００℃。

２．６生物顯微鏡：１０×～１００×。

２．７細(xì)菌濃度比濁管：ＭａｃＦａｒｌａｎｄ０．５號(hào)或濁度計(jì)。

２．８無菌錐形瓶：５００ｍＬ，２５０ｍＬ。

２．９無菌平皿：直徑９０ｍｍ。

２．１０無菌試管：１０ｍｍ×７５ｍｍ。

２．１１無菌吸管：１ｍＬ（具０．０１ｍＬ刻度），１０．０ｍＬ（具０．１ｍＬ刻度）或微量移液器及吸頭。

２．１２ｐＨ計(jì)或ｐＨ比色管或精密ｐＨ試紙。

２．１３長波紫外光燈：３６６ｎｍ，功率≤６Ｗ。

２．１４磁板、磁板架、ＤｙｎａｌＭＸ１樣品混合器１）。

２．１５全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)（ＶＩＴＥＫ）２）。

２．１６全自動(dòng)酶聯(lián)熒光免疫分析儀（ｍｉｎｉＶＩＤＡＳ或ＶＩＤＡＳ）２）。

２．１７全自動(dòng)病原菌檢測系統(tǒng)（ＢＡＸ系統(tǒng)）３）。

３培養(yǎng)基和試劑

３．１改良ＥＣ肉湯（ｍＥＣ＋ｎ）：見第Ａ．１章。

３．２改良山梨醇麥康凱（ＣＴＳＭＡＣ）瓊脂：見第Ａ．２章。

３．３亞碲酸鉀（ＡＲ級(jí)）。

３．４頭孢克肟（Ｃｅｆｉｘｉｍｅ）。

３．５三糖鐵（ＴＳＩ）瓊脂：見第Ａ．３章。

１）由挪威Ｄｙｎａｌ公司提供的產(chǎn)品的商品名。給出這一信息是為了方便本標(biāo)準(zhǔn)的使用者，并不表示對(duì)該產(chǎn)品的認(rèn)

可。如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果，則可使用這些等效的產(chǎn)品。

２）