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動(dòng)物細(xì)胞工程1220日抗體等,其中動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)是其它動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)根底。一、動(dòng)物細(xì)胞培育讓這些細(xì)胞生長和增殖。2、原理:細(xì)胞增殖3、過程分散成單個(gè)細(xì)胞,留意:①10代以內(nèi)細(xì)胞保持正常二倍體核型,無突變發(fā)生,常見于實(shí)踐或冷凍保存。②超出50代,極少數(shù)細(xì)胞突破自然壽命極限,突變成癌細(xì)胞,含有沒有限增殖力量;假設(shè)超出50代,細(xì)胞不再增殖,全部死亡,則說明細(xì)胞沒有發(fā)生癌變。思考回復(fù):⑴、為何選擇幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)展細(xì)胞培育?答:其細(xì)胞分化程度低,增殖力量強(qiáng),有絲分裂旺盛,輕易培育。⑵、動(dòng)物細(xì)胞培育需要脫分化嗎?為何?胞,使其分化成所需要組織或器官。白酶行嗎?答:關(guān)鍵是蛋白質(zhì),不行,由于胃蛋白酶作用適宜PH26PH7.2-8.4,胰蛋白酶活性較高〕⑷、胰蛋白酶真不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?為何?所以必需掌握好消化時(shí)間。不能,動(dòng)物細(xì)胞培育只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體4、關(guān)鍵概念①細(xì)胞貼壁:懸液中分散細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。培育要求:培育瓶或培育皿內(nèi)外表光滑、無毒,易于貼附。象稱為細(xì)胞接觸抑制。③原代培育:動(dòng)物組織消化后首次培育連續(xù)培育,讓細(xì)胞連續(xù)增殖,這種培育叫傳代培育。5、培育條件:——對(duì)培育液和全部培育用具進(jìn)展無菌處理;在細(xì)胞培育液中添加肯定量抗生素。;無毒——定時(shí)更換培育液,預(yù)防細(xì)胞代謝產(chǎn)物積存對(duì)本身造成危害。⑵養(yǎng)分:元素等,還需參加血清、血漿等自然成份。培育基類型:合成培育基〔將細(xì)胞所需養(yǎng)分物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成培育基〕⑶溫度和pH值:哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)細(xì)胞生存適宜pH為7.2~7.4。95%空氣加5%CO2混合氣體培育箱中進(jìn)展培育。O2:是細(xì)胞代謝所必需CO2關(guān)鍵作用是維持培育液pH。細(xì)胞培育。用于檢測有毒物質(zhì),判定某種物質(zhì)毒性??茖W(xué)家培育正?;蚨喾N病變細(xì)胞,用于生理、病理、藥理等方面爭論,如用于篩選抗癌藥品等,為診療和預(yù)防癌癥及其它疾病供給理論依據(jù)。★植物組織培育和動(dòng)物細(xì)胞培育比較原理培育基性質(zhì)培育結(jié)果
細(xì)胞全能性固體培育基植物體
細(xì)胞增殖液體培育基細(xì)胞株、細(xì)胞系培育目標(biāo)二、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)
1.概念:將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)胚胎,這個(gè)胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植方法得到動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。2、原理:動(dòng)物細(xì)胞核全能性3、動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。性相對(duì)輕易,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性格外困難。4、體細(xì)胞核移植過程:〔以克隆高產(chǎn)奶牛為例〕〔10代以內(nèi)細(xì)胞〕將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞體卵母細(xì)胞?!擦粢猓汉希憩F(xiàn)細(xì)胞膜構(gòu)造特點(diǎn):含有肯定流淌性。同時(shí)連同第一極體一并去掉。③該技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)個(gè)體,表現(xiàn)了細(xì)胞核全能性而非動(dòng)物細(xì)胞全能性。a.卵母細(xì)胞體積大,便于操作;b.含有促進(jìn)細(xì)胞核表示全能性物質(zhì);c.養(yǎng)分物質(zhì)豐富思考回復(fù):⑴、為何不能直接利用動(dòng)物細(xì)胞培育動(dòng)物體?需要借助核移植來實(shí)現(xiàn)。100%復(fù)制嗎?為何?克隆動(dòng)物絕大局部DNA來自于供體細(xì)胞核,但其核外還有少許DNA即線粒體中DNA來自于受體卵母細(xì)胞。所以不是供核動(dòng)物完全一樣復(fù)制。另外,即便動(dòng)物遺傳根底完全一樣,但動(dòng)物局部行為、習(xí)性形成和所處環(huán)境有很大關(guān)系,供核動(dòng)物生活環(huán)境和克隆動(dòng)物所生活環(huán)境中有可能發(fā)生基因突變,產(chǎn)生供體動(dòng)物沒有性狀。基于上述三個(gè)方面緣由,克隆動(dòng)物不會(huì)是100%復(fù)制。5、應(yīng)用:⑴畜牧業(yè):能夠加速家畜遺傳改進(jìn)進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育⑵保護(hù)瀕危物種:可望利用體細(xì)胞核移植技術(shù)增加瀕危動(dòng)物存活數(shù)量。組織和器官可作為異種移植供體;人核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化,形成對(duì)應(yīng)組織、器官后,可用于組織器官移植。做疾病模型能使大家愈
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