GB/T 41689-2022土壤質(zhì)量土壤樣品直接提取DNA的方法

ICS1308001

CCSB.10.

中華人民共和國國家標準

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

土壤質(zhì)量土壤樣品直接提取DNA的方法

Soilquality—DirectextractionofsoilDNA

ISO110632020IDT

(:,)

2022-10-12發(fā)布2023-05-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

目次

前言

…………………………Ⅲ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

原理

4………………………1

測試材料

5…………………2

土壤樣品

5.1……………2

化學(xué)品

5.2………………2

緩沖液及試劑

5.3………………………3

儀器

6………………………3

提取步驟

7DNA……………4

土壤樣品的準備

7.1……………………4

機械與化學(xué)裂解

7.2……………………4

蛋白質(zhì)沉淀

7.3…………………………4

核酸沉淀與洗滌

7.4……………………4

核酸儲存

7.5……………4

土壤的質(zhì)量和含量評估

8DNA…………4

土壤的質(zhì)量與純度

8.1DNA…………4

土壤的含量

8.2DNA…………………5

提取程序的驗證

9…………………………5

測試報告

10…………………5

附錄資料性本文件與中土壤樣品直接提取方法之間的差異

A()ISO11063:2012DNA…………6

附錄資料性純化土壤提取物的可用方法

B()DNA……………………7

參考文獻

………………………8

Ⅰ

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

前言

本文件按照標準化工作導(dǎo)則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件等同采用土壤質(zhì)量土壤樣品直接提取的方法

ISO11063:2020《DNA》。

本文件做了下列最小限度的編輯性改動

:

的中乙酸鉀的質(zhì)量計算錯誤數(shù)值由修正為

———ISO11063:20205.3.7,176.5294.4。

請注意本文件的內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本文件由全國土壤質(zhì)量標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC404)。

本文件起草單位中國科學(xué)院南京土壤研究所中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所江蘇省質(zhì)量和

:、、

標準化研究院等

。

本文件主要起草人潘賢章郭志英林先貴魏文學(xué)肖婷婷

:、、、、。

Ⅲ

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

土壤質(zhì)量土壤樣品直接提取DNA的方法

1范圍

本文件描述了一種從土壤樣品直接提取的方法這些提取的被用來開展基于各種分子

DNA,DNA

生物學(xué)技術(shù)包括實時定量的土壤細菌群落豐度和組成分析該方法主要適用于農(nóng)業(yè)及

[PCR(qPCR)]。

森林土壤該方法可能不適用于富含有機質(zhì)的土壤如泥炭土有機污染物或重金屬嚴重污染的土壤

。()、。

土壤樣品直接提取為研究微生物群落多樣性和多樣性提供了獨特視角通過土壤

DNAαβ。DNA

擴增獲得擴增子的下一代測序?qū)⒂兄陂_發(fā)土壤環(huán)境中微生物群落監(jiān)測的常規(guī)工具

PCR,。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

土壤質(zhì)量采樣第部分實驗室測定微生物過程生物量與多樣性用土壤

ISO18400-206206:、

的好氧采集處理及貯存指南

、(Soilquality—Sampling—Part206:Collection,handlingandstorageof

soilunderaerobicconditionsfortheassessmentofmicrobiologicalprocesses,biomassanddiversityin

thelaboratory)

注實驗室測定微生物過程生物量與多樣性用土壤的好氧采集處理及貯存指南

:GB/T32725—2016、、(ISO10381-6:

1)

2009,IDT)

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

和在以下地址維護用于標準化的術(shù)語數(shù)據(jù)庫

ISOIEC:

在線瀏覽平臺

———ISO:/obp;

電子百科

———IEC:/。

31

.

土壤DNAsoilDNA

從土壤活體微生物提取的和死亡微生物的殘留

DNADNA。

4原理

按以下提取步驟從土壤樣品等量干重直接提取將添加了提取緩沖液和玻璃珠的土

,1g()DNA。

壤樣品進行機械與化學(xué)裂解