第9章4-化學(xué)鍵合相色法離子交換

第九章－4

化學(xué)鍵合相色譜

離子交換鍵合相色譜

ionexchangechromatography，IEC

1、早期離子交換色譜固定相：高分子聚合物（如聚苯乙烯樹脂）為基質(zhì)的離子交換樹脂缺點(diǎn)：由于溶脹性，不耐高壓，以及表面的微孔型結(jié)構(gòu)影響傳質(zhì)速率。

2、離子交換鍵合相色譜

定義：在化學(xué)鍵合的有機(jī)硅烷分子中帶上固定的離子交換基團(tuán)，便成了離子交換鍵合相。陽離子交換劑：磺酸基(-SO3H)、羧酸基(-COOH)陰離子交換劑：季氨基(-R3N+)、氨基(-NH2)離子交換鍵合相色譜基質(zhì)：薄殼型或全多孔微粒硅膠優(yōu)點(diǎn)：具有較高的耐壓性；化學(xué)及熱穩(wěn)定性；由于有較好的機(jī)械強(qiáng)度，耐壓；可以高壓勻漿裝柱。

缺點(diǎn)：pH適用范圍只能在pH2-8。pH＞9時(shí)，硅膠便容易溶解。未鍵合的殘留硅羥基易生成硅酸鹽。

陰離子交換劑５μm＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋3、離子交換容量

交換容量是指單位質(zhì)量的離子交換劑所能與其它離子發(fā)生交換的量。交換容量越大，負(fù)載能力越大，ｋ＇值也越大。離子交換鍵合相的交換容量與固定相的表面積直接有關(guān)。全多孔微粒型固定相：測定方法：酸堿滴定法優(yōu)點(diǎn)：傳質(zhì)快，滲透性好缺點(diǎn)：表面積較小，樣品容量?。?lt;0.1mg/g）優(yōu)點(diǎn)：表面積大，樣品容量大（mg/g）薄殼型(表面多孔層)：4、分離機(jī)理1）陽離子交換BH：樣品離子M：流動相離子R：固定相帶負(fù)電荷的交換基團(tuán)4、分離機(jī)理1）陽離子交換BH：樣品離子M：流動相離子R：固定相帶負(fù)電荷的交換基團(tuán)4、分離機(jī)理2）陰離子交換A：樣品離子N：流動相離子R：固定相帶正電荷的交換基團(tuán)5、流動相成分：多為控制一定的pH的緩沖液、有機(jī)成分作為改性劑。溶質(zhì)的保留機(jī)理：兼有離子交換和吸附雙重機(jī)理。溶質(zhì)的保留值影響因素：流動相的pH值、離子強(qiáng)度以及有機(jī)改性劑。1）pH值對保留時(shí)間的影響流動相的pH選擇應(yīng)適中，最好選擇在被分離的酸或堿的pka或pkb附近，使它們解離適中，達(dá)到最佳分離。弱酸及弱堿的保留值與洗脫液的pH值有關(guān)先解離并參加離子交換而被分離不解離，不參加離子交換，而以分子形式幾乎無保留地通過柱子Tips保留規(guī)律陰離子交換劑分離有機(jī)酸在用強(qiáng)陰離子交換鍵合相分離酸性藥物時(shí)，pH↑→藥物解離度↑→ｋ’↑，保留時(shí)間↑。pH越小，酸的解離被抑制，保留越小pH越大，酸的解離程度增大，保留增強(qiáng)陰離子交換劑分離有機(jī)酸

在用強(qiáng)陰離子交換鍵合相分離酸性藥物時(shí)，pka值越小，保留時(shí)間↑。例：離子交換色譜法分析核苷酸AMP:一磷酸腺苷ADP:二磷酸腺苷ATP:三磷酸腺苷二鈉流動相：含5%甲酸的10%甲醇水溶液（A相）－含1%甲酸的10%甲醇水溶液（B相）0min100％B→3min100％A色譜柱：AlltechAllsepAnioncolumn（100mm×4.6mm,7m）保留規(guī)律陽離子交換劑分離有機(jī)堿在用強(qiáng)陽離子交換鍵合相分離堿性藥物時(shí)，pH↑→游離堿↑→ｋ’↓，保留時(shí)間↓。pH高，堿以分子形式存在，保留值很小pH低，堿以質(zhì)子化形式存在，保留值較大

三聚氰胺的分析化學(xué)名：2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪分子式：C3H6N6

呈弱堿性（pKa=8）流動相：乙腈:水(10mM檸檬酸,10mM庚烷磺酸鈉，用NaOH調(diào)pH至3.0)=10:90(v/v)離子對色譜法例：離