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第一節(jié)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)演示文稿第一頁,共六十八頁。優(yōu)選第一節(jié)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)第二頁,共六十八頁。2、代謝調(diào)節(jié)作用:激素胰島素第三頁,共六十八頁。3、免役保護(hù)作用如:抗體(免疫球蛋白)第四頁,共六十八頁。血紅蛋白:運(yùn)輸O2和CO2血漿運(yùn)鐵蛋白:運(yùn)輸鐵并在肝中形成鐵蛋白復(fù)合物而儲存4、物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲藏第五頁,共六十八頁。5、運(yùn)動與支持作用肌動蛋白和肌球蛋白第六頁,共六十八頁。6、生長、繁殖、遺傳和變異核蛋白和阻遏蛋白等。第七頁,共六十八頁。7、接受和傳遞遺傳信息如味覺蛋白等錯(cuò)誤舌頭“地圖”(1974年以前)第八頁,共六十八頁。如蓖麻蛋白,蛇毒蛋白等8、毒蛋白第九頁,共六十八頁。第二節(jié)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn):N的含量平均為16%,即每克氮相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)?!?jiǎng)P氏定氮法的理論基礎(chǔ)。一、蛋白質(zhì)的元素組成元素分析:C、H、O、N。有些蛋白質(zhì)含有S或P,F(xiàn)e,Zn等第十頁,共六十八頁。蛋白質(zhì)含量=生物樣品含N量×6.25某生物樣品,用凱氏定氮法測得其含有0.1g氮,問此生物樣品的蛋白質(zhì)含量?凱氏定氮儀第十一頁,共六十八頁。二、蛋白質(zhì)的氨基酸組成蛋白質(zhì)是由氨基酸為單位組成的一類重要的生物大分子。蛋白質(zhì)氨基酸水解第十二頁,共六十八頁。1、組成蛋白質(zhì)的基本氨基酸:20種2、蛋白質(zhì)的稀有氨基酸:指基本氨基酸的衍生物,是蛋白質(zhì)合成后,基本氨基酸經(jīng)酶促修飾而來。如:5-羥基賴氨酸3、非蛋白質(zhì)氨基酸:指不在蛋白質(zhì)中出現(xiàn)的氨基酸。如:鳥氨酸,瓜氨酸等。(一)生物體內(nèi)存在數(shù)百種氨基酸。分類第十三頁,共六十八頁。思考題基本氨基酸,稀有氨基酸以及非蛋白質(zhì)氨基酸的區(qū)別?生物體內(nèi)只有蛋白質(zhì)才含有氨基酸。這句話是否正確?第十四頁,共六十八頁。氨基酸分子中碳原子的順序規(guī)定:(二)、20種氨基酸的結(jié)構(gòu)通式第十五頁,共六十八頁。D和L構(gòu)型的規(guī)定L-甘油醛D-甘油醛第十六頁,共六十八頁。L-α-氨基酸的結(jié)構(gòu)通式1、不同的氨基酸,R側(cè)鏈不同,其余部分是相同的,(Pro例外);2、為α-氨基酸,(Pro例外:α-亞氨基酸);3、為L-構(gòu)型:(Gly例外)4、具有旋光性:(Gly例外)COOHRHCH2N20種氨基酸的共同特點(diǎn)第十七頁,共六十八頁。CH2CH2CH2CH-COOHNH脯氨酸(Pro)第十八頁,共六十八頁。COOHHHCH2N甘氨酸(Gly)第十九頁,共六十八頁。(二)、氨基酸(Aminoacids)的表示方法
用三字母或單字母符號表示,如:甘氨酸(Gly,G)丙氨酸(Ala,A)第二十頁,共六十八頁。(三)、氨基酸的分類1、根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)的極性分類:1)、非極性氨基酸(8種):Ala(丙),Val(纈),Leu(亮),Ile(異亮),Met(甲硫或蛋),Phe(苯丙),Trp(色),Pro(脯)。2)、極性氨基酸(12種)第二十一頁,共六十八頁。2)、極性氨基酸(根據(jù)帶電性質(zhì))(1)、R基團(tuán)不帶電荷(7種)Gly(甘),Cys(半胱),Ser(絲),Thr(蘇),Tyr(酪),Asn(天冬酰胺),Gln(谷氨酰胺)(2)、酸性氨基酸(2種):Glu(谷),Asp(天冬)(3)、堿性氨基酸(3種):His(組),Arg(精),Lys(賴)第二十二頁,共六十八頁。(天冬)(谷)第二十三頁,共六十八頁。胍基咪唑基(賴)(精)(組)第二十四頁,共六十八頁。1、氨基酸的元素組成及特點(diǎn)?2、氨基酸的結(jié)構(gòu)通式?3、酸性氨基酸,堿性氨基酸和含硫氨基酸分別是?COOHRHCH2N思考題?第二十五頁,共六十八頁。1)、脂肪族氨基酸:Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met(含硫)、Cys
(含硫)、Arg、Lys、Asp、Glu、Asn、Gln、Ser、Thr2)、芳香族氨基酸(3種):Phe、Tyr、Trp3)、雜環(huán)氨基酸(2種):His、Pro2、根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)的結(jié)構(gòu)不同分類第二十六頁,共六十八頁。CH2CH2CH2CH-COOHNH脯氨酸(Pro)組氨酸(His)和脯氨酸(Pro)第二十七頁,共六十八頁。組氨酸(His)組氨酸(His)咪唑基第二十八頁,共六十八頁。1、在下列所有氨基酸溶液中,不引起偏振光旋轉(zhuǎn)的氨基酸是()A、丙氨酸B、亮氨酸C、甘氨酸D、絲氨酸2、天然蛋白質(zhì)中含有的20種氨基酸的結(jié)構(gòu)()A、全部是L-型B、全部是D型C、部分是L-型,部分是D-型D、除甘氨酸外都是L-型
習(xí)題第二十九頁,共六十八頁。3、測得某一蛋白質(zhì)樣品的氮含量為0.40g,此樣品約含蛋白質(zhì)多少
A.2.00gB.2.50gC.6.40gD.3.00gE.6.25g
4.下列含有兩個(gè)羧基的氨基酸是:
A.精氨酸B.賴氨酸C.甘氨酸D.色氨酸E.谷氨酸
5.含硫氨基酸包括:
A.甲硫氨酸B.蘇氨酸C.組氨酸D.半胖氨酸
6.下列哪些是堿性氨基酸:
A.組氨酸B.蛋氨酸C.精氨酸D.賴氨酸
7.芳香族氨基酸是:
A.苯丙氨酸B.酪氨酸C.色氨酸D.脯氨酸
第三十頁,共六十八頁。8、不同蛋白質(zhì)的含________量頗為相近,平均含量為________%.9、組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸中,酸性氨基酸是________________和________________。第三十一頁,共六十八頁。(四)、氨基酸的理化性質(zhì)1、兩性性質(zhì)及等電點(diǎn):(1)、兩性電解質(zhì)通常情況下,氨基酸以兩性離子的形式存在,如下圖所示:COO-RHCH3N+COOHRHCH2N第三十二頁,共六十八頁。通過改變?nèi)芤旱膒H,可使氨基酸分子的解離狀態(tài)發(fā)生改變。COO-RHCH3N+OH-COO-RHCH2N主要以陰離子的形式存在氨基酸:酸第三十三頁,共六十八頁。COO-RHCH3N+H+COOHRHCH3N+主要以陽離子的形式存在氨基酸:堿結(jié)論:AA是兩性電解質(zhì)第三十四頁,共六十八頁。(2)、氨基酸的等電點(diǎn)及其計(jì)算氨基酸所帶凈電荷為零時(shí)所處溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn),用pI表示。①側(cè)鏈不解離:以Gly為例COO-HHCH3N+COOHHHCH3N+H+二元弱酸第三十五頁,共六十八頁。COOHHHCH3N+二元弱酸K1一元弱酸COO-HHCH3N++H+根據(jù)質(zhì)量作用定律:K1=[Gly±][H+][Gly+]第三十六頁,共六十八頁。COO-HHCH3N+一元弱酸K2COO-HHCH2N+H+根據(jù)質(zhì)量作用定律:K2=[Gly-][H+][Gly±]第三十七頁,共六十八頁。K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]在等電點(diǎn)時(shí):[Gly-]=[Gly+]
[Gly+]=[Gly±][H+]K1[Gly-]=K2[Gly±][H+][H+]2=K1K2-lg[H+]2=-lgK1K2-2lg[H+]=-lgK1-lgK22pH=pK1+pK2pI=1/2(pK1+pK2)第三十八頁,共六十八頁。結(jié)論1:對側(cè)鏈基團(tuán)不解離的氨基酸來說,pI相當(dāng)于該氨基酸的兩性離子狀態(tài)兩側(cè)的基團(tuán)pK之和的一半。
pI=1/2(pK1+pK2)K1為α-羧基的解離常數(shù),K2為α-氨基的解離常數(shù)。[Gly±][Gly-][Gly+]第三十九頁,共六十八頁。②側(cè)鏈上有解離基團(tuán)的氨基酸:以Asp為例:COOHCH-NH2CH2COOHAsp第四十頁,共六十八頁。②側(cè)鏈上有解離基團(tuán)的氨基酸:以Asp為例:COOHCH-NH3+CH2COOHAsp+COO-CH-NH3+CH2COOHK1Asp±K2COO-CH-NH2CH2COO-Asp=COO-CH-NH3+CH2COO-KRAsp
+=pI=1/2(pK1+pKR)=1/2(2.09+3.86)=2.98忽略不計(jì)主要存在形式第四十一頁,共六十八頁。結(jié)論2:對側(cè)鏈基團(tuán)解離的氨基酸來說,pI也相當(dāng)于該氨基酸的兩性離子狀態(tài)兩側(cè)的基團(tuán)pK之和的一半??偨Y(jié)論:pI等于該氨基酸兩性離子狀態(tài)兩側(cè)基團(tuán)pK之和的一半。第四十二頁,共六十八頁。羧基:α-COOH
﹥
β
-COOH
﹥γ-COOH氨基:α-NH3+﹥
β
-NH3+﹥
γ-NH3+﹥δ-NH3+﹥
ε
-NH3+③計(jì)算原則解離度:-COOH﹥-NH3+b、
AA的pI等于該氨基酸兩性離子狀態(tài)兩側(cè)基團(tuán)pK之和的一半a、首先寫出該氨基酸的多元弱酸形式和分布解離方程N(yùn)H3+與其它基團(tuán)比,pK值低的先解離第四十三頁,共六十八頁。思考題1、已知lys中,a-COOH的pK=2.18,a-NH3+的pK=8.95,ε-NH3+的pK=10.53,計(jì)算lys的pI?2、已知His中,a-COOH的pK=1.82,a-NH3+的pK=9.17,咪唑基的pK=10.53,計(jì)算His的pI?第四十四頁,共六十八頁。1、pI=1/2(8.95+10.53)=9.74答案2、pI=1/2(9.17+10.53)=?第四十五頁,共六十八頁。④蛋白質(zhì)分子中可解離的側(cè)鏈基團(tuán):7種a、ε-NH3+
(Lys)b、β-COOH(Asp)c、γ-COOH(Glu)d、-SH(Cys)e、酚羥基(Tyr)f、咪唑基(His)g、胍基(Arg)第四十六頁,共六十八頁。NNHNNH+H咪唑基胍基-CNH2NH-CNH2NH2+第四十七頁,共六十八頁。(3)pH對氨基酸帶電性質(zhì)的影響①pH=pI,主要以兩性離子形式存在;②pH>pI,③pH<pI,主要以負(fù)離子形式存在;主要以正離子形式存在;第四十八頁,共六十八頁。思考題問(1)、四種氨基酸的pI分別是多少?(2)、四種氨基酸在pH7的電場中各向哪個(gè)方向移動?氨基酸pK1(α-COOH)pK2(α-NH3+)pK3(R)Cys1.718.3310.78Glu2.199.674.25Arg2.179.0412.48Tyr2.209.1110.07有4種氨基酸,其解離常數(shù)分別為:第四十九頁,共六十八頁。1、氨基酸的等電點(diǎn)?2、怎樣計(jì)算氨基酸的等電點(diǎn)?3、pH對氨基酸帶電性質(zhì)的影響?思考題第五十頁,共六十八頁。第二章蛋白質(zhì)(protein)第一節(jié)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)第二節(jié)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成第三節(jié)肽第四節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)第五節(jié)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系第六節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)第七節(jié)蛋白質(zhì)的分類第五十一頁,共六十八頁。第二節(jié)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成一、蛋白質(zhì)的元素組成二、蛋白質(zhì)的氨基酸組成三、氨基酸的分類四、氨基酸的理化性質(zhì)1、氨基酸的兩性性質(zhì)2、氨基酸的光學(xué)性質(zhì)3、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第五十二頁,共六十八頁。2、氨基酸的光學(xué)性質(zhì)(1)、旋光性:除Gly(甘)(2)、光吸收A、在可見光區(qū):全部無光吸收B、在紫外區(qū):三種有光吸收Tyr(酪):275nmPhe(苯):257nmTrp(色):280nm蛋白質(zhì)定量:紫外光吸收法(蛋白質(zhì)的最大光吸收在280nm)第五十三頁,共六十八頁。3、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)(1)、與2,4-二硝基氟苯反應(yīng)(Sanger反應(yīng))與a-NH2起反應(yīng)第五十四頁,共六十八頁。FrederickSanger:英國生物化學(xué)家1918-第五十五頁,共六十八頁。DNFB+蛋白質(zhì)弱堿中DNP-蛋白質(zhì)DNP-氨基酸+(n-1)多肽DNP-氨基酸鑒別種類6mol/LHCI乙醚抽提紙層析測定蛋白質(zhì)N末端氨基酸第五十六頁,共六十八頁。(2)、與異硫氫酸苯酯(PITC)Edman反應(yīng)與a-NH2起反應(yīng)第五十七頁,共六十八頁。Edman降解NH2端+PITCPTCPTH循環(huán)ATZH+(無水)H+(有水)紙層析鑒定弱堿測定蛋白質(zhì)N末端氨基酸或蛋白質(zhì)測序第五十八頁,共六十八頁。1、280nm波長處有吸收峰的氨基酸為()
A、精氨酸
B、色氨酸
C絲氨酸
D、谷氨酸2、芳香族氨基酸是()
A.苯丙氨酸B.酪氨
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