隔山消化學(xué)成分研究

隔山消化學(xué)成分研究【內(nèi)容摘要】目的對(duì)土家藥隔山消化學(xué)成分進(jìn)行分離與構(gòu)造鑒定。方法采取乙醇浸泡、分步萃取的方法對(duì)隔山消化學(xué)成分進(jìn)行提取。運(yùn)用正相、反相硅膠柱層析、高效液相色譜的方法進(jìn)行分離、純化和檢測(cè)，通過13c-nmr譜,1h-nmr譜對(duì)其進(jìn)行構(gòu)造鑒定。結(jié)果從隔山消乙醇提取物中分離到6種化學(xué)成分:對(duì)甲基苯酚〔ⅰ〕、蔗糖〔ⅱ〕、胡蘿卜苷〔?！?、kidjoranin3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside〔ⅳ〕、12-o-benzoyllineolon3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside〔ⅴ〕、2，4二羥基苯乙酮〔ⅵ〕。結(jié)論化合物ⅰ和ⅲ為初次從隔山消中得到?！颈疚年P(guān)鍵詞語】隔山消；化學(xué)成分土家藥隔山消又名白首烏，是蘿藦科植物耳葉牛皮消cynanchumauriculaturoylewight的枯燥塊根。研究發(fā)現(xiàn)白首烏具有提升免疫力、抗腫瘤和抗衰老等作用［1］。為了開發(fā)利用該藥用資源，本文對(duì)隔山消的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并從中分離到6個(gè)成分，分別鑒定為：對(duì)甲基苯酚、蔗糖、胡蘿卜苷、kidjoranin3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside、12-o-benzoyllineolon3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside、2，4-二羥基苯乙酮。1儀器與試劑vafianmercuryvx-300／500型核磁共振儀，戴安u3000半制備高效液相色譜儀，慣例分離用薄層層析硅膠及柱層析硅膠由青島海洋化工廠生產(chǎn)，c18反相硅膠由日本ymc公司生產(chǎn)，色譜純?yōu)槊绹?guó)tedia公司生產(chǎn)。其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。隔山消藥材采自湖南湘西自治州，并經(jīng)萬定榮教授鑒定為蘿藦科植物耳葉牛皮消cynanchumauricutalumroylewight.的塊狀根。2方法與結(jié)果2.1提取分離取隔山消藥材4kg，粉碎成粗粉，用90％乙醇浸泡提取3次，24h/次。提取液減壓回收乙醇，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。氯仿部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，高效液相色譜，到化合物得ⅰ～ⅵ。2.2構(gòu)造鑒定2.2.1化合物i無色塊狀晶體。1h-nmr〔500mhz，cdcl3〕δppm：7.92(2h，d，h-2，h-6)，6.91〔2h，d，h-3，h-5〕，2.58(3h，s，-ch3)，6.17(brd，-oh)。13c-nmr〔125mhz，cdcl3〕δppm：26.6〔-ch3〕，115.6〔d〕，131.2(d)，115.6〔s〕，130.5〔s〕，根據(jù)以上數(shù)據(jù)將化合物i鑒定為對(duì)甲基苯酚。2.2.2化合物ii無色塊狀晶體。1h-nmr〔500mhz，c5d5n〕δppm：6.22(1h，h-1，d，3.5hz)，4.18〔1h，h-2，dd，9.5hz，3hz〕，4.68〔1h，h-3，t〕，4.24〔1h，h-4，t〕，4.78〔1h，h-5，dd，7.5hz，2.3hz〕，4.53〔1h，h-6〕，4.51〔2h，h-1′〕,5.03(1h，h-3′)，4.53〔1h，h-4′〕，5.07〔1h，h-5′〕，4.36〔1h，h-6′〕。13c-nmr〔125mhz，c5d5n〕δppm：93.5〔c-1〕，73.5〔c-2〕，75.0〔c-3〕，71.8〔c-4〕，75.1〔c-5〕，62.4〔c-6〕，63.0〔c-1′〕，105.9〔c-2′〕，79.8〔c-3′〕，84.4〔c-4′〕，75.5〔c-5′〕，64.8〔c-6′〕。根據(jù)文獻(xiàn)［2］將化合物ii鑒定為蔗糖。2.2.3化合物iii白色粉末。molish反應(yīng)和liebermann-burchard反應(yīng)陽性，與胡蘿卜苷對(duì)照品進(jìn)行tlc檢測(cè)〔氯仿-甲醇=4∶1〕，rf值和硫酸顯色完全一樣。13c-nmr〔125mhz，c5d5n〕δppm：37.5〔c-1〕，30.3〔c-2〕，78.5〔c-3〕，39.4〔c-4〕，135.9〔c-5〕，122.0〔c-6〕，32.2〔c-7〕，32.1〔c-8〕，50.3〔c-9〕，37.5〔c-10〕，21.4〔c-11〕，26.4〔c-12〕，42.5〔c-13〕，56.9〔c-14〕，24.6〔c-15〕，40.0〔c-16〕，56.3〔c-17〕，12.1〔c-18〕，19.3〔c-19〕，36.5〔c-20〕，19.5〔c-21〕，28.6〔c-22〕，34.3〔c-23〕，46.1〔c-24〕，29.5〔c-25〕，19.1〔c-26〕，20.1〔c-27〕，23.4〔c-28〕，21.4〔c-29〕，12.2〔c-30〕，102.6〔c-1′〕，75.4〔c-2′〕，78.6〔c-3′〕，71.1〔c-4′〕，78.1〔c-5′〕，62.8〔c-6′〕。結(jié)合文獻(xiàn)［3］鑒定為胡蘿卜苷〔daucosterol〕。見圖1。2.2.4化合物iv白色粉末，在水中振搖起白色泡沫。13c-nmr〔125mhz，cdcl3〕δppm：38.9〔c-1〕，29.1〔c-2〕，78.0〔c-3〕，38.9〔c-4〕，140.7〔c-5〕，117.9〔c-6〕，34.5〔c-7〕，75.1〔c-8〕，43.9〔c-9〕，37.4〔c-10〕，24.4〔c-11〕，74.6〔c-12〕，58.2〔c-13〕，88.3〔c-14〕，34.5〔c-15〕，33.4〔c-16〕，91.7〔c-17〕，9.6〔c-18〕，18.7〔c-19〕，209.4〔c-20〕，27.6〔c-21〕，165.9〔c-1′〕，117.8〔c-2′〕，145.6〔c-3′〕，134.5〔c-4′〕，128.4〔c-5′〕，129.0〔c-6′〕，130.6〔c-7′〕，129.0〔c-8′〕，128.4〔c-9′〕，β-d-cym:95.9〔c-1′′〕，34.5〔c-2′′〕，76.9〔c-3′′〕，82.0〔c-4′′〕，69.1〔c-5′′〕，18.7〔c-6′′〕，57.2〔-ome〕，α-l-dig:101.0〔c-1′′′〕，31.3〔c-2′′′〕，74.4〔c-3′′′〕，74.2〔c-4′′′〕，67.0〔c-5′′′〕，17.7〔c-6′′′〕，56.0〔-ome〕，β-d-cym:98.7〔c-1′′′′〕，35.4〔c-2′′′′〕，78.4〔c-3′′′′〕，82.0〔c-4′′′′〕，69.2〔c-5′′′′〕，18.5〔c-6′′′′〕，56.4〔-ome〕，α-l-cym:99.5〔c-1′′′′′〕，31.8〔c-2′′′′′〕，75.0〔c-3′′′′′〕，74.6〔c-4′′′′′〕，65.8〔c-5′′′′′〕，18.3〔c-6′′′′′〕，58.0〔-ome〕。與文獻(xiàn)［4］數(shù)據(jù)一致，故將化合物iv鑒定為kidjoranin3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside。2.2.5化合物v白色粉末，在水中振搖起白色泡沫。13c-nmr〔125mhz，cdcl3〕δppm：38.8〔c-1〕，28.9〔c-2〕，77.8〔c-3〕，38.8〔c-4〕，140.5〔c-5〕，117.8〔c-6〕，32.1〔c-7〕，74.8〔c-8〕，43.6〔c-9〕，37.2〔c-10〕，24.2〔c-11〕，73.9〔c-12〕，58.4〔c-13〕，88.0〔c-14〕，34.3〔c-15〕，33.3〔c-16〕，91.4〔c-17〕，9.5〔c-18〕，18.6〔c-19〕，209.4〔c-20〕，27.4〔c-21〕，167.0〔c-1′〕，129.9〔c-2′〕，128.5〔c-3′〕，129.6〔c-4′〕，133.2〔c-5′〕，129.6〔c-6′〕，128.5〔c-7′〕，β-d-cym:96.9〔c-1′′〕，35.2〔c-2′′〕，79.5〔c-3′′〕，82.0〔c-4′′〕，70.4〔c-5′′〕，18.5〔c-6′′〕，58.5〔-ome〕，α-l-dig:101.7〔c-1′′′〕，32.6〔c-2′′′〕，75.5〔c-3′′′〕，75.1〔c-4′′′〕，68.1〔c-5′′′〕，18.4〔c-6′′′〕，56.9〔-ome〕，β-d-cym:100.4〔c-1′′′′〕，35.3〔c-2′′′′〕，78.7〔c-3′′′′〕，83.0〔c-4′′′′〕，70.3〔c-5′′′′〕，18.3〔c-6′′′′〕，57.4〔-ome〕，α-l-cym:100.0〔c-1′′′′′〕，32.8〔c-2′′′′′〕，75.3〔c-3′′′′′〕，73.8〔c-4′′′′′〕，70.3〔c-5′′′′′〕，18.6〔c-6′′′′′〕，57.1〔-ome〕。與文獻(xiàn)［4］數(shù)據(jù)一致，故將化合物v鑒定為12-o-benzoyllineolon3-o-α-l-cymaropyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranosyl-〔1→4〕-α-l-diginopyranosyl-〔1→4〕-β-d-cymaropyranoside。2.2.6化合物ⅵ無色塊狀晶體。1h-nmr〔500mhz，cd3od〕δppm：12.61(1h,s,2-oh)，7.70〔1h，d，j=9.0hz，h-6〕，6.37〔1h，d，j=2hz，8.9hz，h-5〕，6.24(1h，d，2.4hz，h-3)，2.51〔3h，s，-ch3〕。13c-nmr〔125mhz，cd3od〕δppm：114.4〔c-1〕，166.2〔c-2〕，103.5〔c-3〕，166.4〔c-4〕，109.1〔c-5〕，134.4〔c-6〕，204.2〔co〕，26.2〔ch3〕。根據(jù)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)［5］，故將化合物ⅵ鑒定為2，4-二羥基苯乙酮。見圖1。3討論根據(jù)結(jié)果，從隔山消中分離的所得的化合物含甾體皂苷類化合物，這與該屬植物重要成分一致，可能為本藥材中的重要有效成分?！疽韵聻閰⒖嘉墨I(xiàn)】1］印敏，馮熙，董云發(fā)，等.白首烏化學(xué)成分與藥理活性研究進(jìn)展［j］.中國(guó)野生植物資源，2004，32〔2〕：8.［2］劉玉明，楊峻山，劉慶華.瘤果黑種草