2022年臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)人員上崗證考試題含答案

2022年臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)人員上崗證考試題

含答案

一、單選題

1.在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中,弱陽(yáng)性室內(nèi)質(zhì)控品發(fā)生失控，常見(jiàn)的原因有下述各項(xiàng)，但除

外

A核酸提取中的丟失.有機(jī)溶劑的去除不徹底標(biāo)本中擴(kuò)增抑制物的殘留等

B擴(kuò)增儀孔間溫度的不均一性

C.Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活

D擴(kuò)增產(chǎn)物的污染

2新冠病毒核酸檢測(cè)過(guò)程中為最大限度監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室假陽(yáng)性結(jié)果，陰性室內(nèi)質(zhì)控建議

A.建議每批檢測(cè)設(shè)立1個(gè)陰性質(zhì)控

B.建議每批檢測(cè)設(shè)立2個(gè)陰性質(zhì)控，二份陰性質(zhì)控固定

C.建議每批檢測(cè)設(shè)立3個(gè)陰性質(zhì)控，三份陰性質(zhì)控固定

D.建議每批檢測(cè)設(shè)立3個(gè)陰性質(zhì)控，三份陰性質(zhì)控隨機(jī)放在臨床樣本中間。與待測(cè)樣

本同時(shí)參與全過(guò)程檢測(cè)

3.PCR擴(kuò)增檢測(cè)采用內(nèi)標(biāo)，可以識(shí)別擴(kuò)增檢測(cè)的

A.假陰性

B.假陽(yáng)性

C.假陰性.假陽(yáng)性都可以預(yù)防

D.假陰性.假陽(yáng)性都不能預(yù)防

4.核酸探針的標(biāo)志性特征是

A.一小段已知序列的單鏈核酸

B.一小段未知序列的單鏈核酸

C.一小段未知序列的雙鏈核酸

D.有同位素或非同位素標(biāo)志物

5.使用PCR技術(shù)檢測(cè)新冠病毒核酸時(shí)，PCR體系所必需的組分是：

①模板②引物③四種脫氧核甘酸④DNA聚合酶⑤16SRNA⑥反轉(zhuǎn)錄酶

A.①②3④⑤

B.②3④56

C.①②346

D.①3④56

6.UNG防止污染可以預(yù)防由下述引起的污染

A.PCR產(chǎn)物

B.原始靶核酸

C.標(biāo)本間交叉污染

D.其它污染

7.分子診斷定量檢測(cè)項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)控如出現(xiàn)下列哪種失控規(guī)則可考慮為隨機(jī)誤差

A.4(1S)

B.2(2S)

C.R(4S)

D.7(T)

8.在一個(gè)DNA分子中，如G所占摩爾比為17.2%,則A所占摩爾比為

A.82.8%

B.32.8%

C.17.2%

D.65.6%

9.生物安全水平的級(jí)別共分為幾個(gè)等級(jí)

A.1個(gè)

B.2個(gè)

C.3個(gè)

D.4個(gè)

10.基因突變的實(shí)質(zhì)是指

A.染色體上的DNA序列變化了

B.染色體上的DNA變成了蛋白質(zhì)

C.染色體上的DNA變成了RNA

D.染色體上的DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了局部改變

11.如果一個(gè)PCR反應(yīng)體系中加入模板200個(gè)，經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后，理論上擴(kuò)增產(chǎn)物

的數(shù)

量將達(dá)到

A.200X30x2

B.200(2)x30

C.200x2(30)

D.200x20(2)

12.熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)程中，基線漂移的可能原因有

A.蒸發(fā)

B.探針?biāo)?/p>

C.相鄰熒光通道干擾

D.以上都是

13.以下哪些有利于DNA的保存

A.加入EDTA整合鈣離子，去除核酸酶的活性

B.加入少量DNase

C.溶于pH3.0的溶液中

D.加入少量RNase

14.核酸分子中儲(chǔ)存遺傳信息的關(guān)鍵部分是

A.mRNA

B.tRNA

C.rRNA

D.DNA

15.新冠病毒核酸檢測(cè)樣本送檢

A.樣本采集后室溫放置不超過(guò)4h

B.應(yīng)按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理

規(guī)定》（原衛(wèi)生部令第45號(hào)）辦理《準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)》

C.樣本應(yīng)單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)，不能和其他物品混雜

D.以上都對(duì)

26.實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)新型冠狀病毒2個(gè)靶標(biāo)（ORF1AB和N基因），陽(yáng)性結(jié)果

判斷錯(cuò)誤

的是

A.同一份標(biāo)本中檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，判定為陽(yáng)性

B.同一份標(biāo)本單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性后對(duì)該樣本重復(fù)檢測(cè)。如果仍為單靶標(biāo)陽(yáng)性，判定為陽(yáng)

性

C.兩種標(biāo)本同時(shí)出現(xiàn)單靶標(biāo)陽(yáng)性，可判定為陽(yáng)性

D.同種類型標(biāo)本兩次采樣檢測(cè)中均出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果，可判定為陽(yáng)性

二、填空題

1.普通臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室?般包括下面四個(gè)分區(qū)：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)，

獷增區(qū)，獷增產(chǎn)物分析區(qū)。

2.臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)用的試劑應(yīng)當(dāng)國(guó)家食品和藥品監(jiān)督局批準(zhǔn)。

3.PCR污染的主要污染源有標(biāo)本間交叉污染和PCR試劑的污染等，預(yù)防PCR污染的方法

有劃定區(qū)域和實(shí)驗(yàn)流程標(biāo)準(zhǔn)化等。

4.新冠病毒核酸檢測(cè)假陰性的可能原因：樣本質(zhì)量毒，樣本收集過(guò)早或者過(guò)晚，沒(méi)有正確的保

存運(yùn)輸處理，技術(shù)問(wèn)題，試劑問(wèn)題。

5.PCR擴(kuò)增結(jié)果的影響因素有引物，模板，DNA聚合酶和d\TP,反轉(zhuǎn)錄酶

6.分子診斷設(shè)備管理重點(diǎn)關(guān)注設(shè)備標(biāo)識(shí)、設(shè)備檔案、設(shè)備校準(zhǔn)、設(shè)備保養(yǎng)和設(shè)備

報(bào)廢.

7.針對(duì)常規(guī)分子診斷定性檢測(cè)試劑不同批號(hào)性能驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)選擇陰性和弱陽(yáng)性的樣

品

8.全血標(biāo)本DNA檢測(cè)，可2-8°C下短期保存;RNA檢驗(yàn)，則應(yīng)-20°C保存長(zhǎng)期-70°C

三.判斷題（每題2分，共20分）

1.根據(jù)目前掌握的新型冠狀病毒生物學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)特征、致病性、臨床表現(xiàn)等

信息，該病原體暫按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進(jìn)行管理。

對(duì)

錯(cuò)

2.未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的新型冠狀病毒核酸提取，

可以在

生物安全一級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

對(duì)

錯(cuò)

3.未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進(jìn)行的新型冠狀病毒核酸提取，

實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)采用生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)。

對(duì)

錯(cuò)

4.應(yīng)當(dāng)由經(jīng)過(guò)適當(dāng)培訓(xùn)的人員使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備和設(shè)備處理新型冠狀病毒

危險(xiǎn)廢棄物。

對(duì)

錯(cuò)

5.定量PCR與定性PCR測(cè)定原理最主要的區(qū)別在于前者的測(cè)定點(diǎn)在PCR的指數(shù)擴(kuò)增

期，而后者多為擴(kuò)增平臺(tái)期。

對(duì)

錯(cuò)

6.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目無(wú)法參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃時(shí)，可以用室內(nèi)質(zhì)控替代。

對(duì)

錯(cuò)

7.NGS技術(shù)檢測(cè)結(jié)果具有很高的準(zhǔn)確性，不需要進(jìn)行性能驗(yàn)證或性能確認(rèn)。

對(duì)

錯(cuò)

8.擴(kuò)增管沒(méi)有蓋好會(huì)造成PCR過(guò)程中反應(yīng)液產(chǎn)生熱蒸發(fā)，直接影響檢測(cè)結(jié)果，但不

會(huì)成為一個(gè)污染源。

對(duì)

錯(cuò)

9.使用NGS技術(shù)可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣本中包括點(diǎn)突變（SNV）、插入缺失（Indel）、拷貝

數(shù)變異（CNV）和結(jié)構(gòu)變異（SV）等多種變異的識(shí)別。

對(duì)

錯(cuò)

10.腫瘤組織FFPE樣本進(jìn)行核酸檢測(cè)前應(yīng)由病理醫(yī)師在顯微鏡下確認(rèn)腫瘤細(xì)胞性質(zhì)

和含量。

對(duì)

錯(cuò)

四、問(wèn)答題

1.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員在進(jìn)行PCR操作時(shí)應(yīng)注意哪些關(guān)鍵點(diǎn)？

1、戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，應(yīng)立即更換手套。2、避免反應(yīng)液飛濺,

若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。

3、使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于

空氣中避免空氣中氣溶膠的污染。4、操作多份樣品時(shí)，制備反應(yīng)混合液，先將dNTP、

緩沖液、引物和酶混合好，然后再分裝這樣既可以減少操作次數(shù)，避免污染，又可

以增加反應(yīng)的精確度。5、最后加入反應(yīng)模板，加入后蓋緊反應(yīng)管。6、操作時(shí)設(shè)立

空白對(duì)照和陰陽(yáng)性對(duì)照，既可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性，又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的

可信性。7、由于實(shí)際操作時(shí)加樣器很容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染，所以

操作者最好使用高壓處理過(guò)的或可替換的加樣器。假如沒(méi)有這種特殊的加樣器，至

少在PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專用，嚴(yán)禁交叉使用，尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加

樣器不能拿到其它兩個(gè)相鄰區(qū)域使用。8、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證結(jié)果，慎下結(jié)論。

2、感染性疾病的定量、定性檢測(cè)，人基因組的基因型檢測(cè)，對(duì)上述三類PCR檢測(cè)

的室內(nèi)控品濃度水平和型別如何要求？

定量測(cè)定：2個(gè)濃度質(zhì)控品+1個(gè)陰性

注意低值濃度質(zhì)控品的選擇與檢測(cè)下限的關(guān)系。

定性測(cè)定：1個(gè)陰性+1個(gè)弱陽(yáng)性和/或陽(yáng)性質(zhì)控品。

人基因組：1個(gè)野生型+1個(gè)突變型。

3、有一實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備使用ARMS法開(kāi)展腫瘤EGFR基因突變檢測(cè)，是否需要做性能驗(yàn)

證？如要做，至少需作哪些參數(shù)？該如何做？該如何做？

需要做性能驗(yàn)證。

1.精密度2.方法符合率3.檢出限

1.精密度:包括重復(fù)性和中間精密度。重復(fù)性對(duì)樣本進(jìn)行至少10次重復(fù)測(cè)定，陰陽(yáng)

性符合率290%,中間精密度每天檢測(cè)3到4次，連續(xù)檢測(cè)5天，陰陽(yáng)性符合率大

于等于90%。

2.方法符合率：通過(guò)與參比方法進(jìn)行比較。陰性樣本5例，陽(yáng)性包括弱陽(yáng)性/低擴(kuò)增

不少10例。

3.檢