版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
實驗二中微量鐵的測定第一頁,共十五頁,2022年,8月28日目的
掌握使用分光光度計.掌握標準曲線法進行定量分析掌握分光光度法測定藥物或水中鐵含量的操作方法及原理.第二頁,共十五頁,2022年,8月28日
原理
鐵是藥物和水中常見的一種雜質(zhì),含量大時易產(chǎn)生特殊氣味,因此對藥物和飲水中的鐵要進行檢查和測定.選擇顯色劑的基本原則亞鐵離子與鄰二氮菲生成穩(wěn)定的橙紅色配合物.Fe2++
第三頁,共十五頁,2022年,8月28日應(yīng)用此反應(yīng)可測定鐵,當(dāng)鐵以Fe3+離子形式存在于溶液中時,可預(yù)先用還原劑(鹽酸羥胺或?qū)Ρ蕉拥?將其還原為Fe2+離子.及顯色條件的選擇顯色時,溶液PH值應(yīng)為2~9.若酸度過高(PH<2)顯色緩慢而色淺;若酸度過低,二價鐵離子易水解.最大吸收波長為508nm,ε=11100.第四頁,共十五頁,2022年,8月28日儀器與試劑
(1)722型分光光度計(2)容量瓶(10ml,7個);(3)吸量管(2,1ml)(4)洗耳球(5)擦鏡紙(6)標準鐵溶液(20μg/ml)(7)鄰二氮菲0.1%水溶液(8)鹽酸羥胺1%水溶液(用時配制)(9)HCA-NaAc緩沖溶液(10)FeCl3待測液第五頁,共十五頁,2022年,8月28日四.操作步驟
1.標準曲線的制作以標準溶液的濃度為橫坐標,相應(yīng)的吸光度為縱坐標,繪制成A-C曲線即為標準曲線。
第六頁,共十五頁,2022年,8月28日
具體步驟:在6只10ml容量瓶中,用吸量管分別加入0.0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml鐵標準溶液(硫酸鐵銨每ml含F(xiàn)e3+20μg),分別加入0.2ml鹽酸羥胺,0.4ml鄰二氮菲,1.0mlHAc-NaAc緩沖溶液,用水稀釋至刻度后搖勻,放置5min.用1cm比色皿,以0.0ml鐵標液為試劑空白,在所選波長(508nm)下,測量各溶液的吸光度.以鐵含量為橫坐標,吸光度A為縱坐標,繪制標準曲線.第七頁,共十五頁,2022年,8月28日2.FeCl3樣測定以FeCl3為樣品,準確吸取樣1.00ml(或適量),置10ml容量瓶中.按上述制備標準曲線的方法配制溶液并測定吸光度,根據(jù)測得的吸光度求出FeCl3樣中總鐵量.據(jù)FeCl3樣測得吸光度查出鐵含量.(1)在相同條件下測定樣品溶液的吸光度,即可從標準曲線查出樣品溶液中被除測組分的濃度,(2)將一系列標準溶液的濃度與相應(yīng)的吸光度,進行線性回歸,然后將樣品溶液的吸光度引入回歸方程,計算樣品溶液中被測組分的濃度。由于線性回歸法制備的標準曲線,比手繪法更客觀,所以目前文獻報到多采用此法。第八頁,共十五頁,2022年,8月28日
標準曲線制備實例
精密稱取對照品1.110mg用甲醇溶解并定容至10ml,用移液管精密移取0.4ml,
0.8ml,1.2ml,1.6ml,2.0ml,2.4ml分別定容于10ml容量瓶,以此為對照溶液,在268nm下測其吸收度,測定結(jié)果見表Table2第九頁,共十五頁,2022年,8月28日
Table2LinearRelationshipofStandardMaterial
NO.
contentsofstandardAmaterial(mg/l)
14.44000.09228.88000.187313.3200.277417.7600.365522.2000.458626.6400.553第十頁,共十五頁,2022年,8月28日對對照品的吸收度和濃度進行線性回歸,得回歸方程:
A=0.02063C+0.0014γ=0.99993(A:吸收度,C:濃度)
標準品在4.440~26.640mg/L范圍內(nèi)A與C呈良好線性關(guān)系。以對照品溶液的濃度為橫坐標,吸收度為縱坐標,繪制標準曲線,見Fig3。第十一頁,共十五頁,2022年,8月28日以對照品濃度對吸收度作圖,得直線,見Fig3Fig5normalcurveofstandardmaterial第十二頁,共十五頁,2022年,8月28日思考題顯色反應(yīng)操作中,加入的各標準溶液與樣品液的含酸量不同,對顯色有無影響?據(jù)制備標準曲線測得的數(shù)據(jù),判斷本次實驗得濃度與吸光度間的線性好不好,分析其原因.第十三頁,共十五頁,2022年,8月28日注意事項待測溶液裝量應(yīng)超過比色皿2/3,但也不能裝得太滿。實驗過程中,注意不要將溶液撒入機器內(nèi)部,如果發(fā)生上述情況,請及時清理干凈。比色皿用后,請洗凈后,用95%乙醇浸泡,長期不用,請擦干后,收好.第十四頁,共十五頁,2022年,8月28日附:722型分光光度計使用方法開機后需預(yù)熱20分鐘。波長
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 電梯救援服務(wù)合同模板
- 農(nóng)村土地租用合同模板甲方
- 出差勞動合同模板
- 融資模板合同模板
- 合店合同模板
- 保管配送合同模板
- 餐飲加盟合同模板 三
- 課件英語教學(xué)課件
- 草莓運輸合同模板
- 花籃支架售賣合同模板
- 人才引進考核評分表
- 壓力管道安裝許可規(guī)則-TSG D3001-2021
- 煤氣中毒事故應(yīng)急演練預(yù)案方案
- 體檢科醫(yī)療質(zhì)量控制工作計劃
- 國有公司總部禮品管理辦法 模版
- 口腔頜面部檢查課件
- 2020年重癥醫(yī)學(xué)科病人呼吸心跳驟停演練方案及腳本
- 平衡記分卡應(yīng)用流程
- 呼吸道感染病毒培訓(xùn)課件
- 重癥超聲課件
- 物聯(lián)網(wǎng)信息安全知識考核試題與答案
評論
0/150
提交評論