植物組織培養(yǎng)的基本原理

1植物組織培養(yǎng)的基本原理

講授內(nèi)容

1.1細(xì)胞的全能性

1.2植物細(xì)胞分化與脫分化

1.3植物的形態(tài)建成

1.4基因表達(dá)與位置效應(yīng)及器官分化信息傳遞植物組織培養(yǎng)的基本原理★植物細(xì)胞全能性（Cellulartotipotency）：

任何具有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞，都擁有形成一個(gè)完整植珠所必須的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的能力。

（Haberlandt,1902）1.1植物細(xì)胞全能性

植物組織培養(yǎng)的基本原理1.1植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)—細(xì)胞全能性1、細(xì)胞全能性（celltotipotency)

：植物體的每一個(gè)具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞都具有該物種全部遺傳的物質(zhì)，在一定條件下具有發(fā)育成完整植物體的潛在能力。植物組織培養(yǎng)的基本原理

細(xì)胞全能性（紅羅卜）植物組織培養(yǎng)的基本原理1.2植物細(xì)胞的分化與脫分化1.分化〔differentiation〕：細(xì)胞在分裂過程中發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能上的改變，從而在個(gè)體發(fā)育中形成各類組織和器官完成整個(gè)生活周期。植物組織培養(yǎng)的基本原理高等植物細(xì)胞分化示意圖幼年細(xì)胞細(xì)胞分裂多細(xì)胞團(tuán)形態(tài)建成完整植株細(xì)胞分化植物組織培養(yǎng)的基本原理1.2植物細(xì)胞的分化與脫分化2.脫分化〔dedifferentiation〕:

已分化好的細(xì)胞在人工誘導(dǎo)條件下，恢復(fù)分生能力，回復(fù)到分生組織狀態(tài)的過程。3.再分化〔redifferentiation〕:

脫分化后具有分生能力的細(xì)胞再經(jīng)過與原來相同的分化過程，重新形成各類組織和器官的過程。植物組織培養(yǎng)的基本原理離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽再生植株植物組織培養(yǎng)過程（高等植物細(xì)胞脫分化和在分化示意圖）植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3植物的形態(tài)建成植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3植物的形態(tài)建成細(xì)胞培養(yǎng)再生完整的植株莖芽分化（器官分化）體細(xì)胞胚胎發(fā)生植物組織培養(yǎng)的基本原理外植體的成苗途徑試管苗外植體愈傷組織根、芽芽根根芽體細(xì)胞胚試管苗體細(xì)胞胚試管苗植物組織培養(yǎng)的基本原理主要內(nèi)容:1.3.1愈傷組織的誘導(dǎo)與器官分化1.3.1.1愈傷組織誘導(dǎo)1.3.1.2器官分化1.3.2植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生1.3.2.1植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生的方式1.3.2.2植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生的極性和生理隔離1.3.3離體器官誘導(dǎo)1.3.4影響植物離體形態(tài)發(fā)生的因素植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3.4.1植物種類和基因型1.3.4.2培養(yǎng)材料的生理狀態(tài)1.3.4.3培養(yǎng)基1.3.4.4培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3.1愈傷組織的誘導(dǎo)與器官分化

一、基本概念脫分化：

具有特定結(jié)構(gòu)與功能的植物組織，在一定條件下，細(xì)胞改變?cè)瓉淼姆只癄顟B(tài)，失去原有的結(jié)構(gòu)與功能，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹稚芰Φ募?xì)胞的過程。愈傷組織：

植物各種器官的外植體在離體的條件下，細(xì)胞經(jīng)脫分化等一系列過程，轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚?xì)胞，進(jìn)而轉(zhuǎn)變形成一種能夠迅速增殖的無特定結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞團(tuán)

一般低，植物各器官、組織都有被誘發(fā)產(chǎn)生愈傷組織的潛在可能性。

植物組織培養(yǎng)的基本原理自然條件下的植物愈傷組織刺桐樹植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3.1愈傷組織的誘導(dǎo)與器官分化一）、愈傷組織的誘導(dǎo)

誘導(dǎo)愈傷組織的成敗關(guān)鍵主要不是實(shí)驗(yàn)材料，而是培養(yǎng)條件，其中激素的成分和濃度是最重要的因素。

1、常用激素與濃度激素類型

激素濃度生長素類（2，4-D,IAA,NAA)

0.01~10mg/L細(xì)胞分裂素類（玉米素，6-BA)

0.1~10mg/L植物組織培養(yǎng)的基本原理2、影響愈傷組織誘導(dǎo)的因素：1）、激素：多數(shù)情況下，單獨(dú)使用2，4-D可以成功誘導(dǎo)愈傷組織的發(fā)生案例1：MS培養(yǎng)基含有不同濃度2，4-D時(shí)斑茅幼葉形成愈傷組織的誘導(dǎo)率（%）

不同濃度的2，4-D對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)率是不同的。一般情況下，2，4-D的濃度過低（低于10-9mg/L）時(shí)，愈傷組織生長緩慢；濃度過高（高于10mg/L）時(shí)，就會(huì)抑制愈傷組織的生長。植物組織培養(yǎng)的基本原理案例2.

不同培養(yǎng)基及激素濃度對(duì)誘導(dǎo)扁桃花藥愈傷組織的影響

無論在MS還是在H或B5培養(yǎng)基中，不附加激素2,4-D均不能誘導(dǎo)扁桃花藥愈傷組織的形成，扁桃花藥在H+1.0mg/L2,4-D的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)率最高為47%;在MS+1.0mg/L2,4-D培養(yǎng)基上誘導(dǎo)率為67.0%;在B5+0.5～1.0mg/L2,4-D，出愈率都在84.0%以上，其中以2,4-D為0.5mg/L時(shí)，出愈率高達(dá)100%.。說明在扁桃花藥誘導(dǎo)過程中，最適基本培養(yǎng)基是B5，最佳2,4-D濃度為0.5mg/L。植物組織培養(yǎng)的基本原理研究表明：生長素與細(xì)胞分裂素對(duì)保持愈傷組織的快速生長是必要的，特別是二者搭配使用時(shí)更能強(qiáng)烈刺激愈傷組織的形成。在愈傷組織的誘導(dǎo)時(shí)，植物材料不同所用的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)不同，使用的濃度也不同。植物組織培養(yǎng)的基本原理2）.培養(yǎng)基不同的培養(yǎng)基成分對(duì)植物不同器官的愈傷組織誘導(dǎo)存在著影響

植物組織培養(yǎng)的基本原理二、愈傷組織的形成

愈傷組織從增殖的組織細(xì)胞中產(chǎn)生，激素改變細(xì)胞的新陳代謝狀態(tài)，從生長靜止期到代謝旺盛。從外植體脫分化形成愈傷組織大致可分為三個(gè)時(shí)期：起動(dòng)期（誘導(dǎo)期）、分裂期和分化期。三個(gè)時(shí)期愈傷組織的代謝狀況、結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞的平均大小都有明顯的差別。植物組織培養(yǎng)的基本原理

（1）誘導(dǎo)期（起動(dòng)期、或起始期）:

起動(dòng)期：

細(xì)胞準(zhǔn)備分裂的時(shí)期，愈傷組織形成起點(diǎn)。

外植體細(xì)胞在完整植株中隨著細(xì)胞的分化過程而逐漸停止分裂，開始執(zhí)行它們各自不同的功能。外植體細(xì)胞一般處于靜止?fàn)顟B(tài)，稱為靜止細(xì)胞。

在外源植物激素的作用下，處于靜止?fàn)顟B(tài)的植物細(xì)胞經(jīng)過復(fù)雜的脫分化過程恢復(fù)分裂能力轉(zhuǎn)化為分生細(xì)胞。此過程有人稱之為：細(xì)胞的誘導(dǎo)活化過程。

期，并發(fā)生同步分裂。植物組織培養(yǎng)的基本原理有人認(rèn)為損傷是誘導(dǎo)細(xì)胞分裂的重要因素。受傷細(xì)胞釋放出的物質(zhì)與外源激素共同誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分裂，是誘導(dǎo)植物愈傷組織形成的主要原因。

Brown（1972）認(rèn)為靜止細(xì)胞是具有分裂能力的，只是被存在的一類抑制物質(zhì)所阻止，而使其分裂能力不能表現(xiàn)，如果除去抑制物質(zhì)，就可恢復(fù)分裂能力。若加入抵消抑制物質(zhì)影響的外源物質(zhì)（激素），細(xì)胞就立即進(jìn)行DNA復(fù)制，全部細(xì)胞進(jìn)入S植物組織培養(yǎng)的基本原理處于起始期外植體植物組織培養(yǎng)的基本原理特點(diǎn)：在誘導(dǎo)期，代謝活化了，細(xì)胞內(nèi)的合成代謝加強(qiáng)，如合成代謝加強(qiáng)，迅速進(jìn)行蛋白質(zhì)和核酸的合成。但是細(xì)胞的大小仍然和外植體時(shí)一樣，沒有多大改變。

植物組織培養(yǎng)的基本原理誘導(dǎo)期的長短由一系列內(nèi)部（植物的種類、生理狀況）和外部（光照、外源激素）因素決定。

例如：菊芋的誘導(dǎo)期有時(shí)還不需要1天，胡蘿卜則要好幾天，而菊芋塊莖貯藏時(shí)間的改變，誘導(dǎo)期也發(fā)生改變。從11月到次年4月取菊芋塊莖進(jìn)行培養(yǎng)，則誘導(dǎo)期從22小時(shí)逐漸延長到40小時(shí)。植物組織培養(yǎng)的基本原理改變誘導(dǎo)期長短主要外因方面是添加一些生長物質(zhì)

Steward等(1964)用2,4-D及其類似的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)處理處于靜止?fàn)顟B(tài)的組織，看到RNA的含量很快明顯地增加。并且2、4-D積累在分裂細(xì)胞的核仁中。Yeoman和Mitchell(1970)指出了核仁是生長物質(zhì)的作用部位。植物組織培養(yǎng)的基本原理（2）分裂期：

外植體(explant)中已分化的活細(xì)胞在外源激素的作用下，外植體外層細(xì)胞出現(xiàn)了分裂，由于外層細(xì)胞的迅速分裂使得這些細(xì)胞的體積縮小，逐漸回復(fù)到分生組織狀態(tài)，該時(shí)期細(xì)胞通過脫分化的起動(dòng)期而進(jìn)入分裂，并開始形成愈傷組織。植物組織培養(yǎng)的基本原理分裂期特征：

生理生化上分裂期的一個(gè)明顯特征是外層細(xì)胞進(jìn)行分裂，而中間的細(xì)胞不分裂。另外還有細(xì)胞數(shù)目增加，體積變?。患?xì)胞核和核仁增到最大，RNA含量達(dá)到最高等。

此時(shí)期的愈傷組織：細(xì)胞分裂快，結(jié)構(gòu)疏散，缺少組織的結(jié)構(gòu)，顏色淺而透明。植物組織培養(yǎng)的基本原理

分裂期愈傷組織植物組織培養(yǎng)的基本原理（3）形成期（形成期）：細(xì)胞分裂從分裂期的周緣細(xì)胞分裂為主逐漸轉(zhuǎn)向內(nèi)部的組織細(xì)胞，愈傷組織表層細(xì)胞分裂減緩或停止，內(nèi)部深層細(xì)胞分裂并形成像維管束或類似于分生組織組成的鳥巢狀結(jié)構(gòu)的次生組織。此時(shí)期中細(xì)胞的伸展和分裂處于平衡，故細(xì)胞的平均大小趨于穩(wěn)定。植物組織培養(yǎng)的基本原理形成期愈傷組織的特點(diǎn)：

生長旺盛的愈傷組織一般呈乳黃色或白色，有光澤；也有淺綠色或綠色；而老化的愈傷組織多轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色甚至褐色。植物組織培養(yǎng)的基本原理提醒：

根據(jù)形態(tài)變化列出三個(gè)時(shí)期，實(shí)際上它們的界限并不分嚴(yán)格，特別是分裂期和分化期。一塊培養(yǎng)組織的細(xì)胞既有分裂的又有分化的。植物組織培養(yǎng)的基本原理愈傷組織的類型：

不同植物來源的愈傷組織，在質(zhì)地、形態(tài)和物理性狀方面均有明顯的差異。有的愈傷組織呈淡黃色或白色，有的愈傷組織呈綠色或紅色。

一般來說，來源于相同組織的愈傷組織含有的色素大致相同，但經(jīng)過反復(fù)繼代培養(yǎng)后會(huì)失去色素。植物組織培養(yǎng)的基本原理根尖愈傷組織

（無色透明）莖尖愈傷組織（淡綠色）植物愈傷組織類型舉例：植物組織培養(yǎng)的基本原理當(dāng)歸莖段愈傷組織（綠色）

香茶菜愈傷組織

鎖陽愈傷組織（紅色）植物組織培養(yǎng)的基本原理影響植物愈傷組織形成的因素：1、同一植株不同器官形成愈傷組織的能力不同。例如：君子蘭用MS+2mg/L6-BA+2mg/LNAA+1mg/L2,4-D

固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，莖尖、莖切塊和葉片形成愈傷組織的誘導(dǎo)率分別為85%、13%和72%；若用MS+5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+1mg/L2,4-D

固體培養(yǎng)基培養(yǎng),三種外植體形成愈傷組織的誘導(dǎo)率分別為82%、9%和70%。這說明培養(yǎng)基中植物生長物質(zhì)組成的比例不同，直接影響著愈傷組織的形成。楊寧[1]等人的研究表明，植物扁桃（‘Naporeil’品種）的莖段、花藥在適宜的培養(yǎng)基上能比較容易的誘導(dǎo)出愈傷組織，而葉肉組織則不能或難以誘導(dǎo)形成愈傷組織。植物組織培養(yǎng)的基本原理影響植物愈傷組織形成的因素：2、選擇適宜基本培養(yǎng)基不僅影響愈傷組織的誘導(dǎo)，而且影響傷組織的生長。

于樹宏和李玲（1999）用淺綠色野葛葉片愈傷組織進(jìn)行繼代培養(yǎng)，用MS+1mg/LNAA，愈傷組織呈淺綠色，新鮮健壯；在培養(yǎng)基中同時(shí)加入3mg/L6-BA和1mg/LNAA,愈傷組織生長迅速，若培養(yǎng)時(shí)間較長，形成的愈傷組織呈白、硬顆粒狀，部分會(huì)發(fā)生褐變死亡；但若將愈傷組織置于含相同濃度6-BA和NAA的B5培養(yǎng)基上生長，愈傷組織可以始終保持新鮮健壯的外觀，而且不斷生長。

楊寧[2]等人用MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)繼進(jìn)行當(dāng)歸愈傷組織增殖培養(yǎng)的研究表明，單獨(dú)使用一種生長素時(shí)，愈傷組織增殖很不明顯；若只使用一種細(xì)胞分裂素時(shí)，愈傷組織均不見增殖，并且生長狀況也不佳；但將二者合理搭配使用時(shí)，愈傷組織不僅增殖較明顯，而且生長狀況較佳。可見，兼用生長素和6-BA增效作用較明顯植物組織培養(yǎng)的基本原理基本培養(yǎng)基對(duì)當(dāng)歸愈傷組織繼代的影響*

注：“+”表示基本可以生長;“++”表示生長較好,繼代較好；“+++”表示繼代最好.*

表中數(shù)據(jù)取材于楊寧等人的《當(dāng)歸愈傷組織的增殖與分化培養(yǎng)》

植物組織培養(yǎng)的基本原理不同激素組合對(duì)當(dāng)歸愈傷組織增殖的影響*

注：“+”表示基本可以生長;“++”表示生長較好,繼代較好；“+++”表示繼代最好.*

表中數(shù)據(jù)取材于楊寧等人的《當(dāng)歸愈傷組織的增殖與分化培養(yǎng)》

植物組織培養(yǎng)的基本原理1.3.1.2愈傷組織的形態(tài)發(fā)生

愈傷組織培養(yǎng)物在某些條件下，可以再分化產(chǎn)生不定芽或根的分生組織甚至是胚狀體，繼之，由這些有結(jié)構(gòu)的組織而發(fā)育成苗或完整小植株。

愈傷組織通過再分化形成再生植株的方式主要有三種：1)、先產(chǎn)生芽，后在莖的基部長根；2)先長根，再長芽；3)愈傷組織的不同部位分別形成根和芽。植物組織培養(yǎng)的基本原理

一）、愈傷組織形成

1、器官的形成

一般愈傷組織開始分化時(shí)，由大小不等的細(xì)胞開始逐漸形成大小均勻的細(xì)胞，保持相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。

在分化時(shí)，愈傷組織的表層和內(nèi)部都可形成分生中心。芽多發(fā)生在愈傷組織的表層，屬外起源。

植物組織培養(yǎng)的基本原理根發(fā)生在組織的深處，與整體植株發(fā)生類似，是內(nèi)起源。

愈傷組織的外部形態(tài)也隨分化而改變，一般由疏松轉(zhuǎn)向緊密。

植物組織培養(yǎng)的基本原理二）、激素對(duì)愈傷組織分化的影響

植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)在分化過程中的作用是極為明顯的，合適的植物生長物質(zhì)配比在器官分化中起著重要的作用。

如仙人掌科的金牛掌莖段培養(yǎng)中，當(dāng)6-BA的濃度是NAA的50~100倍時(shí)，莖段的愈傷組織可以再分化出仔球，而6-BA濃度過高(150倍)或過低(10倍)則無仔球形成。植物組織培養(yǎng)的基本原理愈傷分化不同濃度的激素對(duì)煙草愈傷組織的影響植物組織培養(yǎng)的基本原理器官分化的植物激素控制理論大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：

大多數(shù)植物組織或器官的再生作用符合器官分化的植物激素控制理論。

即：生長素與細(xì)胞分裂素的比例小時(shí)則產(chǎn)生苗，比例大時(shí)則生根，而兩種激素的比例適中時(shí)，則產(chǎn)生無結(jié)構(gòu)的愈傷組織。植物組織培養(yǎng)的基本原理外植體愈傷組織芽根再生植株脫分化再分化高生長素(1,2-D)高(生長素/細(xì)胞分裂素)低(生長素/細(xì)胞分裂素)器官發(fā)生途徑植物組織培養(yǎng)的基本原理植物物種和品種基因型影響愈傷組織的分化

程林梅等（2001）的研究表明，利用不同基因型大豆品種的下胚軸作外植體進(jìn)行組培時(shí)，培養(yǎng)基對(duì)愈傷組織的影響不明顯；細(xì)胞分裂素（KT）和NAA的配比濃度對(duì)其愈傷組織的分化影響顯著；不同基因型大豆植株再生作用差異明顯；外植體取材時(shí)間和取材部位對(duì)再生植株的形成也具有較大的影響，再生能力最強(qiáng)的取材部位時(shí)從子葉節(jié)到下胚軸6mm區(qū)段,當(dāng)下胚軸長到2~3cm時(shí)取材最佳（見表3-6）植物組織培養(yǎng)的基本原理不同基因型、激素濃度對(duì)大豆植株再生的影響*資料來源:基因型和激素濃度對(duì)大豆植株再生的影響.程林梅等，《植物學(xué)通報(bào)》2001.18(3):367-370.植物組織培養(yǎng)的基本原理木本植物愈傷組織形態(tài)發(fā)生的人為調(diào)控

第一步：利用分化培養(yǎng)基（含有6-BA、CPPU、KT）使愈傷組織形成不定芽，增加繁殖系數(shù)。第二步：當(dāng)不定芽長大出現(xiàn)葉片后，再將伸長的苗從基部切下轉(zhuǎn)入含生長素類（如IAA、NAA）的生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)根的生成。植物組織培養(yǎng)的基本原理蘆薈愈傷組織形態(tài)發(fā)生的人為調(diào)控

1、先用MS培養(yǎng)附加不同濃度的6BA，促進(jìn)不定芽的生成。

不同濃度6-BA對(duì)庫拉索蘆薈增殖的影響植物組織培養(yǎng)的基本原理蘆薈愈傷組織形態(tài)發(fā)生的人為調(diào)控2、然后將抽枝的小植株轉(zhuǎn)移到MS附加不同濃度NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，誘導(dǎo)根的發(fā)生與生長。

不同濃度NAA對(duì)庫拉索蘆薈生根的影響植物組織培養(yǎng)的基本原理影響愈傷組織分化的其他因素1）、生長素對(duì)維管組織分化過程有顯著影響.

法國植物學(xué)家Camus（1949）最早將小營養(yǎng)芽嫁接在一種菊苣屬植物根的愈傷組織（由薄壁細(xì)胞構(gòu)成）表面，營養(yǎng)芽經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間后分化出維管組織。

Wetmore等許多人的研究也證實(shí)芽之所以能誘導(dǎo)愈傷組織分化是因?yàn)樗谏L時(shí)合成了某些植物激素。一般說來生長素濃度和木質(zhì)部發(fā)生之間存在著一種反比關(guān)系，低濃度的生長素能刺激木質(zhì)部的發(fā)生。生長素對(duì)維管組織分化所起的作用在很大程度上取決于糖的存在。在洋丁香愈傷組織培養(yǎng)時(shí)，如果灌注到愈傷組織頂面缺口里的瓊脂含有0.05mg/L的IAA和1%的蔗糖，愈傷組織只能形成很少的木質(zhì)部分子。若保持生長素濃度不變，而將蔗糖水平增加到2%，則有利于木質(zhì)部的分化，但韌皮部很少。當(dāng)蔗糖增至2.5%~3.5%時(shí)，木質(zhì)部與韌皮部都可以分化形成，而當(dāng)蔗糖增至4%時(shí)，只有韌皮部的分化。植物組織培養(yǎng)的基本原理影響愈傷組織分化的其他因素2）細(xì)胞分裂素能刺激大豆子葉愈傷組織木質(zhì)部的分化。3）IAA與激動(dòng)素之間能協(xié)同影響煙草愈傷組織木質(zhì)部的分化形成。生長素與赤霉素對(duì)植物愈傷組織的分化形成也存在著協(xié)同作用。乙烯也參與木質(zhì)部的形成，有人研究發(fā)現(xiàn)缺乏乙烯的番茄突變體植株木質(zhì)部內(nèi)沒有導(dǎo)管，但正常植株是具有導(dǎo)管的。4）硝酸銀能抑制大豆愈傷組織木質(zhì)部的分化，加入蛋氨酸可以克服硝酸銀的抑制作用。植物組織培養(yǎng)的基本原理

四、愈傷組織的培養(yǎng)一）、培養(yǎng)基培養(yǎng)基一般包括大量元素、微量元素和一種碳水化合物，最常用的碳水化合物是蔗糖。這樣簡單的培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基)只有很少幾種植物組織能夠培養(yǎng)和維持下去，大多數(shù)組織需要添加各種各樣的附加物（完全培養(yǎng)基），如維生素、氨基酸、糖醇，生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素、螯合劑如EDTA、各種營養(yǎng)性的提取物如椰子汁等。植物組織培養(yǎng)的基本原理注意：

選用完全已知的合成化合物，不大主張用復(fù)雜的天然產(chǎn)物，如酵母提取物、番茄汁、椰子汁等。必須強(qiáng)調(diào)：

適合于誘發(fā)愈傷組織的培養(yǎng)基不一定適合于維持這些愈傷組織；適合于液體培養(yǎng)的培養(yǎng)基也不一定適合于固體培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)的基本原理

培養(yǎng)基中的N，大多數(shù)都用硝態(tài)氮，只有MS培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基中才用硝態(tài)和銨態(tài)的混合物。

K的水平