獸醫(yī)微生物學教學支原體

獸醫(yī)微生物學教學支原體第1頁/共36頁

支原體又叫霉形體，屬柔膜體綱，是一類無細胞壁的細菌，具有多形性，能通過細菌濾器。是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中繁殖的最小原核細胞型微生物。第17章支原體

（Mycoplasma）第2頁/共36頁特點:(1)無細胞壁，細胞柔軟，多形性，能通過細菌濾器（多形性、可塑性、濾過性）(2)在人工培養(yǎng)基中生長繁殖，形成“煎荷包蛋狀”菌落(3)基因組較小，0.58-1.35Mb(4)以二分裂或芽生方式繁殖(5)對青霉素有抵抗力

常污染實驗室培養(yǎng)的細胞及生物制品第3頁/共36頁一、形態(tài)與染色0.2～0.3μm，外圍只有胞漿膜，常呈球狀、兩極狀、環(huán)狀、桿狀偶見分枝絲狀，無鞭毛，革蘭氏染色呈陰性，著色不良，姬姆薩或瑞氏染色良好，呈淡紫色。支原體的細胞膜具有三層結構，內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì)，中間層主要是脂質(zhì)(固醇含量高，約占36%）。凡能作用于膽固醇的物質(zhì)（如兩性霉素B、皂素等）均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。

第4頁/共36頁二、培養(yǎng)特性

由于基因組小，合成能力較弱，營養(yǎng)要求較高，需添加外源脂肪酸、甾醇、輔酶I、氨基酸等。生長緩慢（2-6d長出微小菌落），菌落呈“荷包蛋狀”（豬肺炎支原體除外），菌落中心深入培養(yǎng)基中，致密、色暗；周圍長在培養(yǎng)基表面，較透明。第5頁/共36頁

可在雞胚的卵黃囊或絨毛尿囊膜上生長，有些菌株可致雞胚死亡。也能在細胞培養(yǎng)中生長，不一定引起細胞病變，但可妨礙病毒的細胞培養(yǎng)。

液體培養(yǎng)基中，生長數(shù)量少，不易見渾濁，僅有小顆粒沉于管底。第6頁/共36頁三、與細菌L型的區(qū)別支原體L型遺傳上與細菌無關與原菌有關，常可以回復需甾醇一般不需甾醇在一般培養(yǎng)基中穩(wěn)定大多需要高滲培養(yǎng)生長慢，菌落小菌落稍大

0.1-0.3mm0.5-1.0mm菌落中心深埋于培養(yǎng)基中菌落生長于基質(zhì)表面，不易刮除，光亮、透明易于刮除，較暗、不透明液體培養(yǎng)混濁度低有一定混濁度

對洋地黃皂苷敏感不敏感

第7頁/共36頁四、生理生化特性根據(jù)對糖類分解利用能力不同，分為兩群：一群能分解葡萄糖及其他多種糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，稱發(fā)酵型。另一群不分解糖，稱非發(fā)酵型，但能利用精氨酸作為碳源和能量來源。第8頁/共36頁常用的生理生化實驗：葡萄糖發(fā)酵和精氨酸水解試驗尿素水解試驗(區(qū)分脲原體與其它支原體)洋地黃苷敏感性試驗第9頁/共36頁五、抗原及分型支原體的抗原由細胞膜上的蛋白質(zhì)和類脂組成?？捎孟鄳寡遄錾L抑制試驗、代謝抑制試驗、免疫熒光試驗及ELISA等進行鑒定和分型。第10頁/共36頁

病原性支原體一般不侵入機體組織與血液常常定居于多種動物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等，引起牛傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、禽敗血霉形體感染等，傳播途徑主要是呼吸道。單獨感染時，常常癥狀輕微或無臨床表現(xiàn)，當細菌或病毒等繼發(fā)感染或受外界不利因素作用引起疾病。特點是潛伏期長，慢性及地方性流行。主要毒力因子：胞黏素，與黏膜呼吸道上皮細胞的纖毛有關，粘附導致纖毛損害并脫落從而使肺易發(fā)繼發(fā)感染。可通過不同機制引起細胞損傷，如獲取細胞膜上的脂質(zhì)與膽固醇造成膜的損傷，釋放神經(jīng)（外）毒素、磷酸脂酶等。

六、致病性第11頁/共36頁七、診斷直接鏡檢：形態(tài)多樣，意義不大。

分離培養(yǎng)：過濾除菌病料，進行細菌L型鑒定及2-3次克隆、純化（0.45μm過濾）,初代分離在含CO2及高濕環(huán)境中生長。生理生化反應：洋地黃苷、脲酶及葡萄糖、精氨酸分解試驗?？s小選用抗血清的范圍，種的鑒定必須用血清學方法最后確定，這與細菌鑒定到種只需作生理生化測定不同。

血清學檢查：生長抑制試驗、代謝抑制試驗等第12頁/共36頁第2節(jié)豬肺炎支原體豬地方流行性肺炎（豬喘氣?。┑牟≡Ｐ螒B(tài)多樣，大小不等，以環(huán)形為主。兼性厭氧，營養(yǎng)要求高，菌落不呈“荷包蛋狀”以哺乳仔豬和幼豬最為易感，表現(xiàn)為咳嗽和氣喘，發(fā)病率高，死亡率低。存在于病豬肺的細支氣管和支氣管上皮細胞表面和纖毛，經(jīng)呼吸道傳播，通常由病豬傳給低日齡易感豬，也可經(jīng)風力傳播數(shù)公里之遙。第13頁/共36頁

雞毒支原體主要感染雞和火雞，引起慢性呼吸道?。–hronicRespiratoryDisease，CRD）。病原體存在于病雞和帶菌雞的呼吸道、卵巢、輸卵管和精液中，可通過垂直傳遞或交配將病傳遍整個雞群，雞群一旦染病難以徹底根除。在其它病原微生物繼發(fā)感染時加重病情。第14頁/共36頁

嗜血支原體寄生于紅細胞表面，大多球狀。對青霉素及同類藥物有抗性，體外不能培養(yǎng)。感染多無臨床癥狀，在隱性感染的動物體內(nèi)可存在數(shù)年之久。嗜血支原體具有黏附素，菌體的黏附致使紅細胞凹陷進而破壞細胞骨架，增加其脆性。嗜血支原體感染的主要特點是引致貧血，本質(zhì)是自身免疫病。第15頁/共36頁

立克次體（Rickettsia）

立克次體是一類介于病毒與細菌之間的原核細胞型微生物，專性細胞內(nèi)寄生。在形態(tài)結構和繁殖方式等特性上與細菌相似，而在生長要求上又酷似病毒。此類微生物引起人和動物立克次體病（如斑疹傷寒、恙蟲病等）?？山?jīng)氣溶膠傳染，是潛在的生物武器。為紀念HowardTaylorRicketts而命名。第16頁/共36頁一、生物學特性

1.多形性，主要是球桿狀。0.3-0.6×0.8-2.0μm2.大小介于細菌和病毒之間，多數(shù)不能通過細菌濾器。3.革蘭氏陰性，有細胞壁（G-）4.專性細胞內(nèi)寄生

5.以二分裂方式繁殖6.酶系統(tǒng)不完整，依賴宿主細胞提供ATP、輔酶I和輔酶A等才能生長7.常用接種動物、雞胚卵黃囊以及細胞培養(yǎng)第17頁/共36頁第18頁/共36頁8.對理化因素抵抗力不強，尤對熱敏感，56℃30min被滅活，對某些廣譜抗生素敏感，但對磺胺藥不敏感，反而能促進其生長。

9.致人畜疾病的立克次體多寄生于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、血管內(nèi)皮細胞或紅細胞，寄生于虱、蚤、蜱、螨等節(jié)肢動物中，通過叮咬感染人和動物。第19頁/共36頁二、致病性立克次體主要寄生于節(jié)肢動物的腸壁上皮細胞中或進入它們的唾液腺或生殖道內(nèi)。人畜主要經(jīng)這些動物的叮咬或污染其糞便而感染。侵入皮膚的立克次體先在局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞中生長繁殖，引起內(nèi)皮細胞腫脹、增生、壞死；微循環(huán)發(fā)生障礙以及形成血栓；紅細胞滲出血管周圍組織，引起特征性皮疹。若菌體經(jīng)血流在全身各器官的小血管內(nèi)皮細胞中大量增殖后再釋入血流會引起第二次菌血癥，使各血管形成血栓、壞死等。第20頁/共36頁主要病原性立克次體

種類 傳染源媒介昆蟲主要臨床表現(xiàn)免疫力 普氏立克次體人人體虱

發(fā)熱、頭痛、皮疹

持久（流行性斑疹傷寒）神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)損傷斑疹傷寒立克次體鼠鼠蚤

發(fā)熱、頭痛、皮疹

持久（地方性斑疹傷寒）鼠虱

恙蟲病東方體

鼠恙螨

局部黑色焦痂

持久（恙蟲熱）

發(fā)熱、頭痛、皮疹

內(nèi)臟損害貝納柯克斯體

家畜蜱

發(fā)熱、頭痛一定程度（動物間）心內(nèi)膜炎

第21頁/共36頁普氏立克次體（R.prowazekii)人虱

人人

人虱流行性斑疹傷寒傳播方式第22頁/共36頁衣原體（Chlamydia）

衣原體是一類嚴格細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物，具有濾過性。介于立克次體和病毒之間，可引起人和家畜的衣原體病。第23頁/共36頁

一、生物學特點1．革蘭氏陰性，圓形或橢圓形

2．細胞壁具有胞質(zhì)膜及外膜，可含少量肽聚糖。3．細胞內(nèi)寄生（雞胚或細胞培養(yǎng)、動物接種）4.

須利用宿主細胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來源。5．獨特的發(fā)育周期，并以二分裂方式繁殖

6．對某些抗生素（青霉素、紅霉素等）敏感第24頁/共36頁獨特的發(fā)育周期：兩種顆粒結構元體（EB）：

小而致密，成熟型，有細胞壁高度易感性；2.網(wǎng)狀體（RB）：

大而疏松，繁殖型，無細胞壁，不具感染性。第25頁/共36頁衣原體的發(fā)育周期第26頁/共36頁包涵體（inclusion)：是衣原體在細胞空泡內(nèi)繁殖過程中所形成的集團形態(tài)，內(nèi)含無數(shù)子代元體和正在分裂的網(wǎng)狀體。第27頁/共36頁二、分類衣原體屬

親衣原體屬

較重要的衣原體有以下4種：沙眼衣原體：人的沙眼肺炎親衣原體：人的急性呼吸道疾病鸚鵡熱親衣原體：畜禽肺炎、關節(jié)炎、流產(chǎn)，也可引起人的肺炎牛羊親衣原體：牛羊關節(jié)炎、腦脊髓炎、腹瀉第28頁/共36頁三、致病性衣原體引致多種動物和人的多種炎癥，并可影響生殖系統(tǒng)。致病機理復雜，涉及黏附、細胞內(nèi)生長及持續(xù)感染及散播等過程，而且與宿主免疫系統(tǒng)相互作用。它會分泌一種外膜蛋白糖脂外抗原使相鄰細胞變得易感。第29頁/共36頁四、診斷１．分離培養(yǎng)選肺、關節(jié)液、腦脊髓、胎盤等病料

(1)人工培養(yǎng)基不生長，接種雞胚或鴨胚卵黃囊。

(2)動物接種（腹腔或腦內(nèi)接種小鼠）

(3)細胞培養(yǎng)２．血清學試驗用已知Ag檢測未知Ab,采用補體結合試驗、瓊擴、

ELISA等第30頁/共36頁

沙眼衣原體圓形或橢圓形原體經(jīng)Giem