臨床標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)鑒定常見(jiàn)的個(gè)疑問(wèn)

臨床標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)鑒定常見(jiàn)的個(gè)疑問(wèn)作者:日期:

問(wèn)題1:如何正確應(yīng)用藥物敏感結(jié)果？正確運(yùn)用藥敏試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)考慮以下3個(gè)方面：首先要確定病原菌，如未找到真正的致病菌，藥敏實(shí)驗(yàn)不但不能指導(dǎo)用藥甚至可能誤導(dǎo)臨床；重視耐藥監(jiān)測(cè)，這是經(jīng)驗(yàn)用藥的一個(gè)重要的參考；考慮到藥敏試驗(yàn)的局限性:體外報(bào)告敏感的藥物體內(nèi)治療不一定有效，而體外報(bào)告耐藥的藥物體內(nèi)治療不一定無(wú)效。問(wèn)題2:是否MIC越低的藥物越好？不一定。因?yàn)椴煌幬飳?duì)同種細(xì)菌，同一藥物對(duì)不同細(xì)菌的折點(diǎn)均可不同,并且若細(xì)菌產(chǎn)生某些特殊耐藥機(jī)制時(shí)，即使體外敏感也應(yīng)報(bào)耐藥，另外尚需考慮藥動(dòng)學(xué)和耐受性。因此，不能單純比較MIC值而認(rèn)為MIC越低的藥物就一定越好。MIC只表示一種藥物對(duì)某一株細(xì)菌抗菌作用的強(qiáng)弱，MIC越低（離中介值越遠(yuǎn)）說(shuō)明該藥物對(duì)相應(yīng)的病原菌的作用越強(qiáng)。只能比較同一種藥對(duì)同一株菌，若MIC值升高，可認(rèn)為其耐藥性提高。問(wèn)題3：是否所有報(bào)告的細(xì)菌均為病原菌？不一定。原因如下：所報(bào)告細(xì)菌為污染菌或定植菌，細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的臨床意義大小與所取標(biāo)本有關(guān)。如為血液等無(wú)菌標(biāo)本則臨床意義較大，但即使血培養(yǎng)陽(yáng)性也可能為污染菌。某些標(biāo)本易受污染如痰標(biāo)本易于受咽喉部攜帶菌的污染，尿培養(yǎng)易受下尿道、尿道口寄居菌污染?？赡転閼?yīng)用抗菌藥后的菌群交替或菌群失調(diào)。特別是原為復(fù)數(shù)菌感染時(shí)，針對(duì)優(yōu)勢(shì)菌治療一段時(shí)間后可能非優(yōu)勢(shì)上升為優(yōu)勢(shì)菌，或廣譜抗菌藥治療后可能

出現(xiàn)真菌感染。有2種以上病原菌時(shí)因生長(zhǎng)速度不同、營(yíng)養(yǎng)要求不同，培養(yǎng)結(jié)果不能真實(shí)反映病原菌的種類、數(shù)量。問(wèn)題4:為什么有時(shí)痰涂片結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致？由于痰標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)和涂片時(shí)選取的部位不一致；某些快生長(zhǎng)菌所占比例并不多，但由于生長(zhǎng)速度快、營(yíng)養(yǎng)要求低，能在培養(yǎng)過(guò)程中迅速變?yōu)閮?yōu)勢(shì)菌而掩蓋其他菌的生長(zhǎng)；標(biāo)本從采集到接種的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，造成部分苛養(yǎng)菌死亡，在涂片中看到的只是菌的殘骸而非活菌。問(wèn)題5:我們想用的藥物在藥敏試驗(yàn)中沒(méi)有做？1.天然耐藥2.可能是藥物的敏感性被其他藥物所預(yù)報(bào)問(wèn)題6：為什么有的菌報(bào)告很多種藥物，有的僅報(bào)告幾種藥物？報(bào)告的藥物種類根據(jù)細(xì)菌種類的不同而有所不同，如銅綠假單胞菌報(bào)告的藥物較多,而嗜麥芽窄食單胞菌報(bào)告的藥敏較少。問(wèn)題7:是否能將所用的藥都做藥敏試驗(yàn)？沒(méi)有必要:通過(guò)耐藥機(jī)制和標(biāo)志性藥物可以預(yù)測(cè)其他抗菌藥物的敏感性2.沒(méi)有可能：不是所用藥物都可以做藥敏試驗(yàn)（需要藥物在體外穩(wěn)定，需要有操作標(biāo)準(zhǔn)和解釋標(biāo)準(zhǔn)）問(wèn)題8:選擇藥敏報(bào)告敏感的藥物，為什么臨床治療無(wú)效？體外藥敏試驗(yàn)只能預(yù)測(cè)體內(nèi)治療效果，并不等同；一般來(lái)說(shuō)，耐藥=治療無(wú)效;敏感工治療有效；

可能不是真正的致病菌（污染或定植菌）；細(xì)菌本身因素（如誘導(dǎo)耐藥，生物被膜）；感染部位與藥代動(dòng)力學(xué)因素；細(xì)菌的MIC，給藥劑量和用藥方式；敏試驗(yàn)藥物中有些藥物單獨(dú)使用無(wú)效，但可以與其他藥物聯(lián)合用藥；藥物劑型及生物利用度（純品、商品）。問(wèn)題9:涂片鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不吻合？涂片鏡檢是報(bào)告所有檢見(jiàn)的細(xì)菌，而培養(yǎng)的目的是檢出致病菌，因此會(huì)產(chǎn)生涂片和培養(yǎng)結(jié)果不一致的情況；一些苛氧菌需在特殊的環(huán)境或培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)，因此可能在培養(yǎng)后才能得到。問(wèn)題10：取的明顯就是膿液標(biāo)本，為何鑒定報(bào)告為無(wú)菌生長(zhǎng)？我們做的是有氧培養(yǎng)，膿液可能為厭氧菌感染?？赡芗?xì)菌被大量的中性粒細(xì)胞吞噬。問(wèn)題11:鑒定結(jié)果明明寫著四聯(lián)球菌、革蘭氏陽(yáng)性桿菌，為何沒(méi)有藥敏結(jié)果？四聯(lián)球菌為微球菌，一般不引起人體致病，為非致病菌，故考慮污染可能;藥敏結(jié)果參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)，目前革蘭氏陽(yáng)性桿菌沒(méi)有參照標(biāo)準(zhǔn)，故暫不能做藥敏試驗(yàn)，若需治療可參照陽(yáng)性球菌用藥。問(wèn)題12:—般培養(yǎng)不是三天出結(jié)果嗎，今天第四天了怎么還沒(méi)出來(lái)？一般培養(yǎng)經(jīng)48小時(shí)后，即第三天出報(bào)告，若需分離致病菌的則第四天出報(bào)告。

細(xì)菌生長(zhǎng)慢，生長(zhǎng)需要適宜的條件。細(xì)菌一般以二分裂法進(jìn)行無(wú)性繁殖，在適宜條件下，多數(shù)細(xì)菌分裂一次需要20-30分鐘，結(jié)核分枝桿菌需18-20小時(shí)才分裂一次。對(duì)數(shù)期（鑒定、藥敏常用該期的培養(yǎng)物）一般在培養(yǎng)后8-18小時(shí)。普通細(xì)菌培養(yǎng)一般需48小時(shí)（培養(yǎng)需12-24小時(shí),鑒定藥敏需要12-24小時(shí)）；酵母樣真菌陽(yáng)性報(bào)告需要2-3天，陰性報(bào)告需5天；絲狀真菌（霉菌）陰性報(bào)告需2-4周;血培養(yǎng)陽(yáng)性報(bào)告需3天以上，陰性報(bào)告需5-7天。問(wèn)題13:今天的培養(yǎng)結(jié)果怎么與前天的不一樣？取材是否規(guī)范。痰標(biāo)本，有時(shí)選優(yōu)勢(shì)菌做，就可能導(dǎo)致兩次不一樣。抗生素的使用問(wèn)題14：明顯稀便,培養(yǎng)結(jié)果為何正常？大便普通培養(yǎng),通常只能鑒定志賀菌、沙門菌感染，致病性大腸桿菌懷疑霍亂時(shí)，需開(kāi)霍亂弧菌培養(yǎng)；可能病毒感染（輪狀病毒）。問(wèn)題15:為什么陽(yáng)性率太低，臨床符合率差？不合格的標(biāo)本直接導(dǎo)致病原菌分離率降低。操作程序不規(guī)范，未進(jìn)行直接涂片，未嚴(yán)格執(zhí)行拒收制度等也是重要原因。微生物和人體關(guān)系復(fù)雜。致病和條件致病,定植和感染等，導(dǎo)致