實(shí)驗(yàn)酵母細(xì)胞的固定化

關(guān)于實(shí)驗(yàn)酵母細(xì)胞的固定化第1頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵罅私夤潭ɑ?xì)胞的原理。掌握用海藻酸鈉制備固定化酵母細(xì)胞的方法。第2頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三二、實(shí)驗(yàn)原理工業(yè)上常用包埋法固定微生物細(xì)胞。根據(jù)包埋劑的特性，海藻酸鈉在水相中加熱溶解呈溶液狀。將細(xì)胞加入混勻，滴入氯化鈣溶液中，由于離子的轉(zhuǎn)移作用而凝固，形成凝膠顆粒，凝膠顆粒中的微小空格將細(xì)胞固定。海藻酸鈣凝固的顆粒能反復(fù)使用，細(xì)胞在空格中可新陳代謝（固定活細(xì)胞），也可以利用細(xì)胞中的酶進(jìn)行酶促反應(yīng)（固定死細(xì)胞）。本實(shí)驗(yàn)利用海藻酸鈣凝膠包埋酵母生長細(xì)胞。第3頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三

固定化細(xì)胞材料2.5％海藻酸鈉溶液20mL，加熱助溶，冷至45℃?zhèn)溆谩?/p>

配制50mL1.5％CaCl2。●

20毫升注射器，150ml燒杯和50ml燒杯各一個(gè)、三角瓶、玻璃棒、溫度計(jì)、鑷子三、實(shí)驗(yàn)材料和儀器第4頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三酵母細(xì)胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml

36～38℃的溫水中活化15～20分鐘，酵母細(xì)胞活化時(shí)體積會變大，活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟第5頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三酵母細(xì)胞的固定化在冷卻至45～50℃左右海藻酸鈉溶液中，加入5mL預(yù)熱至35℃的酵母培養(yǎng)液，混合均勻。將混合液裝入注射器中，裝上大好針頭，以緩慢而穩(wěn)定的速度將其滴入1.5％CaCl2溶液中，邊滴邊搖動三角瓶，即可制得直徑為3mm左右的凝膠珠。在CaCl2溶液中鈣化30min，即可使用。四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟第6頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三

加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)一定要溶解徹底，在溶解過程中不斷攪拌，在降溫過程中不能低于45℃，否則會凝固。

五、注意事項(xiàng)第7頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三

海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。

五、注意事項(xiàng)第8頁，共10頁，2023年，2月20日，星期三

剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)

檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。

五、