精子酶類及精液檢測

精子酶類及精液檢測

微生物研發(fā)劉志磊精子及精漿酶類精液檢測簡介精液構(gòu)成123內(nèi)容提要精液由精子和精漿組成，其中精子占5%左右，其余為精漿。一、精液構(gòu)成

。

精漿的來源與組成：精漿由精囊液(50%-65%)、前列腺液(30-34%)、外加睪丸、附睪、尿道旁腺、尿道球腺分泌的少量液體混合而成。前列腺液是精液的前導(dǎo)成分之一。前列腺液中蛋白質(zhì)的含量很少，主要含有高濃度的鋅離子、酸性磷酸酶、蛋白水解酶、纖維蛋白酶、精胺、脂族多肽等。其中蛋白水解酶和纖維蛋白酶有促進(jìn)精液液化的作用。而檢測酸性磷酸酶和檸檬酸，可幫助判斷前列腺功能及有無癌變精囊腺液含有豐富的果糖和抗壞血酸，為精子提供營養(yǎng)和能源精子：生精細(xì)胞在曲線精管內(nèi)由精原細(xì)胞、初級精母細(xì)胞、次級精母細(xì)胞、精子細(xì)胞到精子，大約需70天左右。精子有三個(gè)主要部分構(gòu)成，即頭部、頸部和尾部。尾部又分為中段、主段和末段二、所含酶類及其他物質(zhì)氧化還原酶有乳酸脫氫酶、過氧化物酶以及細(xì)胞色素等轉(zhuǎn)氨酶有谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶及甘油激酶等水解酶有脫氧核糖核酸酶、透亮質(zhì)酸酶、磷酸酶、糖苷酶及淀粉酶等精子精漿前列腺分泌物：含有大量的酶，如糖酵解酶、核酸酶、核甘酸酶及溶酶體酶等，對精子的代謝起確定的作用精囊腺分泌物：常呈弱堿性，具有高含量的還原物質(zhì)，假如糖及維生素C等。豬、馬精液中的大量膠狀物也是由精囊腺分泌的。精囊腺分泌物中的糖蛋白是去能因子，能抑制頂體活動(dòng)，延長精子的受精實(shí)力附睪分泌物：分泌出的甘油磷酸膽堿（GPC）、肉毒堿與糖蛋白等，與精子成熟過程有關(guān)三、精液檢測簡介評價(jià)生育功能協(xié)助男性生殖系統(tǒng)的疾病診斷輸精管結(jié)扎后的療效視察支配生育的科研為人工受精和精子庫篩選優(yōu)質(zhì)精子法醫(yī)學(xué)鑒定精液檢查的目的精子發(fā)育影響因素精子發(fā)育激素年齡放射其他溫度局部受熱可使生精細(xì)胞退化萎縮，精母細(xì)胞及精細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)空泡，精細(xì)胞不能完成變態(tài)過程睪酮(間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生)促進(jìn)精子發(fā)生，LH促睪酮產(chǎn)生，F(xiàn)SH促進(jìn)雄激素結(jié)合蛋白合成增加對精子發(fā)生的不良影響，其作用與射線劑量正相關(guān)中年（一般50歲）以后，生精過程明顯減弱，精液中畸形精子和死精子顯著增多微波、營養(yǎng)不良、酗酒、維生素A、E的缺乏、某些藥物（尤其是抗癌藥物）對生精過程影響更大，環(huán)磷酰胺和節(jié)育藥物棉酚都能特異地抑制生精過程精液檢查精子：形態(tài)、數(shù)量、功能精漿：生化、免疫學(xué)、微生物學(xué)等一般性狀檢測量：精液量正常為2.0～6.0ml，平均為3.5ml，少于1.5ml或大于8.0ml可視為異樣。精液量削減（精漿不足）不利于精子通過陰道進(jìn)入子宮和輸卵管，影響受精。精液量削減常見于精囊腺和前列腺病變，使分泌功能減退，特殊是結(jié)核性病變，可造成精液量削減，甚至無精液排出外觀:呈灰白色或淡黃色，血性精液可能與精囊、前列腺的病變有關(guān)液化時(shí)間:精液液化主要是由于前列腺分泌的精液蛋白酶所致精液不液化癥常見于前列腺和精囊疾病的患者精液粘稠度增加提示前列腺的液化酶系統(tǒng)分泌異樣氣味:正常精液具有粟花和石楠花的特殊氣味，由前列腺液產(chǎn)生粘稠度:剛排出的精液快速凝成膠凍狀，然后漸漸液化，若精囊先天發(fā)育不全，則精液可能導(dǎo)致不凝固主要用來評價(jià)副性腺的分泌功能前列腺檸檬酸、鋅、酸性磷酸酶等精囊果糖和前列腺素等附睪左旋肉毒堿、甘油磷酸膽堿、葡萄糖苷酶等生化檢測1.pH測定應(yīng)在標(biāo)本留取后1小時(shí)內(nèi)完成。正常pH值為7.2~8.0，偏酸性精子的活動(dòng)力和代謝水平呈直線下降，反之堿化達(dá)8.4時(shí)，常見活動(dòng)力增加，過于堿性，精子活力又下降。pH<7并伴有少精癥，可能是由于輸精管，精囊或附睪發(fā)育不全。2.果糖正常濃度9.11~17.67mmol/L。精漿中富含果糖，由精囊腺將血糖轉(zhuǎn)化為分泌而來，是精子能量的主要來源，其含量凹凸干脆影響精子的活力。3．精漿酸性磷酸酶精漿中ACP來自于前列腺，屬前列腺酸性磷酸酶（prostaicacidphosphatase,PAP），測定方法有磷酸苯二鈉和-硝基酚比色法。①精漿中的ACP測定有助于了解前列腺功能和前列腺疾病的診斷；②酸性磷酸酶有促進(jìn)精子活動(dòng)的作用，精漿中酸性磷酸酶活性減低，精子活動(dòng)力減弱，可使受精率下降；③精漿中的ACP明顯高于其他任何體液，因此，ACP測定是法醫(yī)鑒定有無精液最靈敏的指標(biāo)。[參考值]>200U/一次射精（β-硝基酚法）

4.精漿LD-X（乳酸脫氫酶）活性測定LD-X存在于睪丸、初級精母細(xì)胞、精子細(xì)胞、精子以及精漿中，LD-X對于睪丸組織與精子細(xì)胞具有組織特異性，以精子含量最高，約占LD-X的80%～90%。LD-X測定常用電泳法，但較繁瑣，干脆比色法，方法簡便，易于普及。[參考值]LD-X/LD>40%LD-x活性和相對活性與精子濃度特殊是活精子濃度呈良好的正相關(guān)，活性減低可致生育力下降。LD-X活性可作為評價(jià)男性生育功能的指標(biāo)。睪丸萎縮患者，LD-X活性降低或消逝。長期服用棉酚可致精子生成障礙，甚至無精子生成，精液LD-X活性也降低或甚至消逝。這說明LD-X活性與睪丸生精功能有關(guān)，是病人睪丸生精功能的良好指標(biāo)。

5．精子頂體酶活性測定存在于頂體內(nèi)，是一種蛋白水解酶，常常以無活性酶原形式存在，當(dāng)精子頭部進(jìn)入卵細(xì)胞透亮帶時(shí)，才被激活，水解卵細(xì)胞透亮帶，使精子與卵子融合，在受精過程中起重要作用。它還能促進(jìn)生殖道中激肽釋放，從而增加精子活力和促進(jìn)精子運(yùn)動(dòng)。可用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯-醇脫氫酶法測定。

[參考值]BAWW-ADH法（X±s）36.72±21.43U/L

精子項(xiàng)體酶活性減低將致生育力下降。據(jù)報(bào)道不育組項(xiàng)體酶活性顯著低于生育組。6.鋅能促進(jìn)生殖器官的發(fā)育，維持正常生精功能，提高精子濃度的活力；鋅減低可致生殖器官發(fā)育不良，精子生成削減，死精癥等。[參考值]Zn(X±s)2.4μmol/一次射精

1．精子活率（spermactivityrate）濕片法:簡便、快速、應(yīng)用廣泛，但該法較主觀，且影響因素多，結(jié)果誤差較大，重復(fù)性較差?；铙w染色法:操作較為困難，費(fèi)時(shí)，但較客觀反映死活精子比例，結(jié)果精確、牢靠、重復(fù)性好，試劑易配制，易保存?！緟⒖挤秶竣贊衿ǎ海?0%（精液離體30～60min內(nèi)）②伊紅染色法：＞75%（精液離體30～60min內(nèi)）【臨床意義】精子活率檢查主要用于男性不育癥的診斷。有活動(dòng)力的精子達(dá)45%，即使精子數(shù)＜0.5×109/L，仍能受孕。顯微鏡檢查2．活動(dòng)力（spermmotility）精子向前運(yùn)動(dòng)的實(shí)力，是干脆反映精子質(zhì)量的一項(xiàng)指標(biāo)。WHO將活力分4級，用%率表示。a.快速前向運(yùn)動(dòng)；b.慢或呆滯的前向；c.非前向；d.不動(dòng)。有顯微鏡檢查、連續(xù)攝影法和精子質(zhì)量分析儀測定等方法。【參考范圍】射精60min內(nèi)，a級精子應(yīng)＞25%；或a和b級精子之和＞50%。【臨床意義】精子活動(dòng)力下降，見于：①精索靜脈曲張；②生殖系統(tǒng)非特異性感染以及運(yùn)用某些藥物（抗代謝藥、抗瘧藥、雌激素）等。3.精子計(jì)數(shù)【參考范圍】①精子濃度：（50～100）×109/L；WHO：＞20×109/L；②精子總數(shù)：≥40×106/次?！九R床意義】一般認(rèn)為＜20×109/L為不正常，連續(xù)3次檢查皆低下者可確定為少精癥，多次未查到精子為無精癥。臨床上亦可見到精子濃度＜20×109/L仍能生育。精子濃度減低見于：①先天性或后天性睪丸疾病如睪丸畸形、萎縮、結(jié)核、炎癥、腫瘤等；②精索靜脈曲張；③輸精管堵塞、精囊缺陷；④重金屬或放射線損害；⑤某些藥物如抗癌藥或長期服用棉酚；⑥50歲以上老年人等。4.精子形態(tài)分析正常精子形態(tài):正常精子外形似蝌蚪狀，由頭、體（頸、中段）、尾（主、末段）構(gòu)成。頭部正面觀呈卵圓形，側(cè)面觀呈扁平梨形，長約4.0～5.0μm，頭部輪廓規(guī)則，頂體覆蓋頭部表面的1/3以上。體部輪廓直而規(guī)則，長約5～7μm。尾部瘦長，彎而不卷曲呈鞭毛狀，長約50～60μm。異樣精子形態(tài)：①頭部異樣：常見有大頭、小頭、錐形頭、無定形頭、空泡樣頭、雙頭、無頂體頭等；②體部異樣：常見有體部腫脹、不規(guī)則、彎曲中段、異樣薄中段；③尾部異樣：常見有無尾、短尾、長尾、雙尾、卷尾等；④聯(lián)合缺陷體：精子頭、體、尾均有或其中兩者有不同程度異樣。

【參考范圍】正常精液中異樣精子數(shù)＜20%【臨床意義】如正常形態(tài)精子30%，稱為畸形精子癥(WHO)，畸形精子40%，即會(huì)影響精液質(zhì)量，50%常可致不育。5.精液中非精子細(xì)胞成分檢查

(1)未成熟生殖細(xì)胞：是指各階段發(fā)育不完全的生精細(xì)胞（spermatogeniccell），包括精原、初級精母、次級精母和發(fā)育不完全的精子細(xì)胞。這些細(xì)胞胞體較大，不具有尾部，應(yīng)留意與白細(xì)胞和上皮細(xì)胞區(qū)分（2）其他：正常精液中有少量WBC（＜5/HP）和上皮細(xì)胞，偶見RBC。精液RBC、WBC增多可見于生殖系統(tǒng)炎癥、結(jié)核、惡性腫瘤等。精液中白細(xì)胞＞1×109/L的病人稱為白細(xì)胞精子癥，表明存在感染

1．抗精子抗體測定AsAb有IgG、IgA、IgM、IgE4種類型，其中IgE-AsAb只參與變態(tài)反應(yīng)，與免疫不孕、流產(chǎn)無關(guān)，IgM-AsAb是近期感染指標(biāo)。2.精漿免疫抑制物

（seminalplasmaimmunoinhibitionmaterial，SPIM）SPIM和MIM活性減低與不育（孕）、習(xí)慣性流產(chǎn)、配偶對丈夫精液過敏發(fā)生親密相關(guān)。近來探討發(fā)覺SPIM與HIV及生殖道腫瘤的發(fā)生親密相關(guān)3.精漿免疫球蛋白精漿免疫球蛋白主要是IgA、IgG，相當(dāng)于血清中的１％～２％【參考范圍】①IgG：28.6±16.7mg/L。②IgA：90.3±57.7mg/L。③IgM：2.3±1.9mg/L【臨床意義】AsAb陽性者，IgG、IgM增高；正常人精漿中分泌性IgA含量很低，生殖道炎癥時(shí)，分泌性IgA增高；生殖道感染早期IgM增高免疫學(xué)檢查由生殖道感染所致男性不育癥發(fā)病率比非感染性高4倍，男性生殖道感染時(shí)，可從精液中檢出30多種微生物。微生物感染可使精子凝集、制動(dòng)或受到破壞等導(dǎo)致不育。通過對精液進(jìn)行涂片或培育，能剛好發(fā)覺致病菌，對男性不育診斷、治療有重要意義微生物學(xué)檢查精子功能檢查包括精子穿透試驗(yàn)（體內(nèi)和體外）、精子尾部低滲腫脹試驗(yàn)、精子頂體反應(yīng)、精子速度試驗(yàn)、精子運(yùn)動(dòng)軌跡試驗(yàn)等多種能反映精子生存周期中各階