醌類化合物的提取分離

關(guān)于醌類化合物的提取分離第1頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六1.水蒸氣蒸餾法適用于小分子的游離醌類化合物的提取，由于其具有揮發(fā)性，可隨水蒸氣餾出，故可用此法提取，如白雪花中藍(lán)雪醌的提取。第2頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例白雪花粗粉

│加水浸泡

│水蒸氣蒸餾

↓

餾出液

│放置

↓

結(jié)晶

│抽濾

↓

結(jié)晶

│甲醇重結(jié)晶

↓

藍(lán)雪醌（mp：75～76℃）第3頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六2.有機(jī)溶劑提取法常用甲醇或乙醇提取，可將不同極性或類型的醌類成分都提取出來，得到總醌類再進(jìn)行分離。1、用于提取苷元（游離醌類）。2、可用苯、氯仿等極性較小的溶劑提取。第4頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例：大黃中總蒽醌成分的提取大黃粗粉100g置1000ml圓底燒瓶中，加入95%乙醇250ml，回流提取2hr，趁熱抽濾醇液藥渣加入95%乙醇200ml，回流提取1.5hr，趁熱抽濾醇液藥渣第5頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六乙醇提取液靜置冷卻，抽濾濾液

減壓回收乙醇至糖漿狀，將濃縮物轉(zhuǎn)移至250ml三角瓶中

乙醇總提物放冷，加入乙醚60ml冷浸，振搖20′將乙醚液傾入500ml三角瓶中乙醚層浸膏40ml乙醚+16ml丙酮冷浸三次（每次15′）

乙醚層浸膏乙醚總提液第6頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例第7頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六3.堿提酸沉法適用于具有酚羥基的醌類化合物，由于其可溶于堿液，加酸后又沉淀出。

1、用于提取帶游離酚羥基的醌類化合物。2、利用酚羥基與堿成鹽溶于堿水中，酸化后沉淀析出。第8頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第9頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六4.超聲提取法研究超聲波技術(shù)對(duì)大黃中蒽醌類成分提取率的影響,并與傳統(tǒng)提取方法做比較.方法:以超聲波強(qiáng)化提取法為試驗(yàn)組,以常規(guī)煎煮法及乙醇回流法對(duì)對(duì)照組,進(jìn)行平行試驗(yàn).結(jié)果:以水為提取溶劑,采用超聲波強(qiáng)化提取10min對(duì)游離蒽醌的提取率即與水煎煮法煎煮60min提取效果相當(dāng);以乙醇為提取溶劑的提取效果明顯好于水,幾種方法相比較,以乙醇作為提取溶劑超聲波萃取法對(duì)大黃蒽醌的提取效果最好.結(jié)論:超聲波法提取大黃蒽醌類成分具有提取效率高、操作簡便、省時(shí)等優(yōu)點(diǎn),值得推廣應(yīng)用.第10頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六5.微波提取法優(yōu)選微波技術(shù)提取大黃游離蒽醌的工藝。方法：先采用單因素考察,然后采用正交試驗(yàn)法考察微波輸出功率、乙醇濃度、浸出時(shí)間、料液比4個(gè)因素對(duì)提取率的影響,優(yōu)選大黃游離蒽醌的最佳浸出方案。結(jié)果：采用70%乙醇溶液在微波輸出功率中高火,用70%乙醇,料液比為1∶8,提取5min,提取2次,大黃游離蒽醌提取率為1.31%,相對(duì)提取率達(dá)到88.52%。結(jié)論：用微波浸提法提取大黃中的蒽醌類成分效率高、操作簡便、省時(shí)。

第11頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六游離醌類化合物的分離分離方法第12頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六1、羥基蒽醌的酸性差別很大時(shí)，采用PH梯度萃取法。

由于蒽醌羥基位置、數(shù)目及羧基的有無，其酸度大小是有區(qū)別的，可分別溶于不同堿性的水液，故可采用梯度PH萃取法。此法為分離游離蒽醌衍生物的經(jīng)典方法，也為常用方法。5%NaHCO3液→含-COOH及兩個(gè)以上β-酚OH

5%Na2CO3液→含一個(gè)β-酚OH蒽醌類1%NaOH液→含兩個(gè)a-酚OH蒽醌類5%NaOH液→含一個(gè)a-酚OH蒽醌類第13頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第14頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第15頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例大黃中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)

根據(jù)大黃中的羥基蒽醌苷經(jīng)酸水解成游離苷元，苷元可溶于氯仿而被提出的原理。再利用各羥基蒽醌類化合物酸性不同，采用pH梯度萃取法分離而得各單體苷元。第16頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六五、應(yīng)用舉例實(shí)例番瀉葉中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)

番瀉苷A不溶于水、苯、乙醚或氯仿，難溶于甲醇、乙醇或丙酮，，但在與水相混的有機(jī)溶劑中的溶解度隨含水量的增加而增大，溶劑中含水量達(dá)30%時(shí)溶解度最大。采用大孔吸附樹脂法進(jìn)行分離。第17頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第18頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六PH梯度萃取法對(duì)蒽衍生物進(jìn)行初步分離，對(duì)性質(zhì)相似，酸性強(qiáng)弱相差不大的羥基蒽醌類則不能很好分離，故初分后再結(jié)合色譜法進(jìn)一步分離。

多用硅膠為吸附劑，有時(shí)也用聚酰胺，不宜用氧化鋁，尤其是堿性氧化鋁，因?yàn)榱u基蒽醌能與氧化鋁形成牢固螯合物，難以洗脫。2、羥基蒽醌的酸性差別不大時(shí)，采用色譜方法，可得到徹底分離。第19頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例：建立了以苯酚為原料合成對(duì)苯二酚過程中各物質(zhì)的高效液相色譜(HPLC)及氣相色譜(GC)分析方法。HPLC方法采用KromasilC18色譜柱(4.6mm×250mm,10μm),流動(dòng)相組成:V(甲醇):V(水):V(改性劑)=20:80:0.15,流動(dòng)相流速為1.0mL/min,定量環(huán)進(jìn)樣20μL,Prostar紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長為254nm,實(shí)現(xiàn)了對(duì)低含量對(duì)苯二酚、對(duì)苯醌、鄰苯二酚及苯酚4種物質(zhì)的分離測(cè)定;同時(shí),采用氫火焰離子化檢測(cè)器對(duì)上述4種物質(zhì)在較高濃度下進(jìn)行了GC分析,測(cè)定快速準(zhǔn)確。第20頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例：建立了同時(shí)測(cè)定化妝品中蒽醌類含量的HPLC法，以評(píng)價(jià)化妝品的美容功效。采用甲醇超聲提取，HPLC法分離測(cè)定。結(jié)果為3種被測(cè)物在11min內(nèi)均得到良好的分離。在1μg／mL-250μg／mL均與其各自對(duì)應(yīng)的峰面積呈良好線性關(guān)系（R〉0．9997）。在添加質(zhì)量濃度為0．5μg／mL～5．0μg／mL，回收率在92．0％-102．5％，精密度RSD〈2．1％，最低檢出限（S／N=3）為蘆薈苷0．5160μg／mL，蘆薈大黃素0．0864μg／mL，大黃酚0．1016μg／mL。該法簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于化妝品中蒽醌類含量的檢測(cè)。

第21頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六實(shí)例：硅膠柱色譜法分離大黃酚、大黃素-6-甲醚裝柱：用石油醚－乙酸乙酯（9.8:0.2）浸泡200～300目硅膠約20g，攪拌均勻，盡量趕出氣泡。一次性倒入1.8cmX28cm的層析柱中，輕輕敲打使硅膠均勻下沉，至硅膠界面不再下降為止。上樣：將離大黃酚和大黃素-6-甲醚的混合物用乙醇加熱溶解，伴入少量硅膠，水浴60℃左右烘干，加到已裝好的硅膠柱頂端，最后在樣品帶上蓋上一層硅膠或棉花，以保護(hù)樣品界面不受干擾。洗脫：先用100ml石油醚－乙酸乙酯（9.8:0.2）洗脫，至第一條黃色色帶洗下來，再換用100ml石油醚－乙酸乙酯（9.5:0.5）洗脫下第二條色帶。第22頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六（一）從大黃中提取分離羥基蒽醌類還可采用下列方法用80%乙醇室溫滲漉提取，回收溶劑，得浸膏后依次以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯甲烷部分再分別上硅膠色譜柱以石油醚-乙酸乙酯（95∶5）和（90∶10）洗脫，分離得到大黃素甲醚、大黃酚及大黃素、蘆薈大黃素單體。工藝流程如下：

第23頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第24頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六（二）從大黃中提取分離總蒽醌類可采用下列方法工藝一：工藝二：第25頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六

3.PH梯度萃取法對(duì)蒽衍生物進(jìn)行初步分離，對(duì)性質(zhì)相似，酸性強(qiáng)弱相差不大的羥基蒽醌類則不能很好分離，故初分后再結(jié)合層析法進(jìn)一步分離。

多用吸附柱層析，以硅膠、磷酸氫鈣、聚酰胺粉為吸附劑，不宜用氧化鋁，尤其是堿性氧化鋁，因?yàn)榱u基蒽醌能與氧化鋁形成牢固螯合物，難以洗脫。

第26頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第27頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第28頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六蒽醌苷類的分離由于蒽醌苷類水溶性較強(qiáng)，分離精制較困難，故現(xiàn)多需進(jìn)行預(yù)處理。溶劑法是用中等極性的有機(jī)溶劑如乙酸乙酯、正丁醇等，從除去游離蒽醌衍生物的水溶液中，將蒽醌苷萃取出來，再作進(jìn)一步分離。第29頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六虎杖浸膏的水溶液氯仿回流氯仿液

（含大黃素等游離蒽醌脂溶成分）水液EtOAc萃取EtOAc液（含大黃素苷等蒽醌苷極性成分）

溶劑法：第30頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六

鉛鹽法：中藥粉90%乙醇加熱提取提取液濃縮濃縮液氯仿（或乙醚、苯）萃取

氯仿液（游離蒽醌）水層加醋酸鉛溶液，過濾濾液沉淀水洗，懸浮于水中，通H2S脫鉛過濾沉淀（Pb2S）濾液蒽醌苷第31頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六第32頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六

補(bǔ)充實(shí)例用不同濃度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同極性溶劑萃取，再使用色譜法分離。茜草中主要化學(xué)成分提取分離方法：結(jié)晶Ⅰ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌結(jié)晶Ⅱ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷結(jié)晶Ⅲ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖（1→2）-β-（6’-O-乙?；┻拎咸烟擒战Y(jié)晶Ⅳ：1,2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷結(jié)晶Ⅴ：1,3-二羥基-2-羥甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷流程說明：采用溶劑提取法進(jìn)行提取，系統(tǒng)溶劑法進(jìn)行粗分，得到不同極性部分。對(duì)各極性部分應(yīng)用色譜法如硅膠色譜法、反相柱色譜法進(jìn)行分離。第33頁，共37頁，2023年，2月20日，星期六（一）從決明子中提取分離蒽醌類化合物還可采用下列方法

實(shí)例

工藝一：第34頁，