土壤銨態(tài)氮的測(cè)定

一、方法原理土壤銨態(tài)氮是土壤速效氮的重要組成部分，測(cè)定土壤NH4+-N的方法主要有直接蒸餾法和浸提法兩類，直接蒸餾法是在氧化鎂的存在下直接蒸餾土壤，但此法在弱堿性蒸餾時(shí)仍可能使一些簡(jiǎn)單的有機(jī)氮微弱水解有NH3蒸出，易使結(jié)果偏高，同時(shí)該法操作復(fù)雜，不適合大批量分析。故在ASI法中采用氯化鉀溶液提取土壤中的NH4+，提取液中的NH4+用靛酚藍(lán)比色法，靛酚藍(lán)比色法的靈敏度高，準(zhǔn)確度也較高，適合于大批量樣品的自動(dòng)化分析。靛酚藍(lán)比色法的基本原理是：土壤膠體上的NH4+被K+交換下來(lái)后，在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚反應(yīng)，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，其深淺與溶液中的NH4+-N含量呈正比，線性范圍為0.05?0.5mg/L之間。二、試劑配制NaOH溶液將6.75gNaOH、0.75gEDTA二鈉、1.25g醋酸鈉溶解于250ml水中，儲(chǔ)存于250ml的容量瓶中。其中EDTA二鈉作為金屬離子的掩蔽劑，防止干擾。醋酸鈉可增強(qiáng)顏色的穩(wěn)定性。90%苯酚溶液將45g苯酚溶解于50ml水中，注意苯酚易結(jié)塊，可加熱到60-70°C。堿性苯酚溶液測(cè)定當(dāng)天，將36ml90%苯酚溶液加到250ml溶液中，搖勻。次氯酸鈉溶液在400ml的水中加入100ml的NaClO溶液即可。NH4+-N標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（改進(jìn)的地方）稱取1.9105gNH4Cl（65C烘4h），于500ml的容量瓶中，加水定容至刻度。該溶液的濃度為1000mg/L.用移液管吸取1ml于100ml的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，此時(shí)容量瓶中溶液濃度為10mg/ml。再對(duì)該溶液分別取0，0.5,1，2,4,8ml于25ml的比色皿中，，對(duì)應(yīng)的濃度為0.0，0.2，0.4,0.8,1.6，3.2ppm（mg/L）.6.浸提劑KCl溶液的配制稱取74.5gKCl溶解于500ml水中，并加0.25g聚丙烯酰胺至1000ml容量瓶中。為1mol/L的溶液。三、操作步驟樣品的處理：用電子分析天平稱取約為2.000g土樣于錐形瓶中，加入40ml的KCl溶液，放于振蕩機(jī)上，振蕩1h，將其過(guò)濾于50ml的容量瓶中，同時(shí)做空白試驗(yàn)。向有一定量的NH4+-N溶液中加入4ml堿性苯酚溶液，再用加液器加入10ml次氯酸鈉溶液，用KCl滴至刻度線，搖勻，放置1h后，用分光光度計(jì)在630nm處比色，讀取吸光度A。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：從濃度為0.0，5.0，10.0,20.0,40.0ppm（ug/mL）的NH4+-N標(biāo)準(zhǔn)溶液中各取1.0ml的溶液于25ml的比色管中，補(bǔ)加KCl溶液至10.0ml，然后按步驟2進(jìn)行操作。四、比色條件：（1）堿性介質(zhì)中反應(yīng)，要求pH10.5-11.7。（2）顯色和穩(wěn)定時(shí)間：在室溫下（20。0一般顯色時(shí)間約為1小時(shí)，但要完全顯色約需2-3小時(shí)，所以加入試劑后靜置1小時(shí)即可比色。穩(wěn)定時(shí)間為24小時(shí)，或24小時(shí)以上。為加速顯色，也可在40°C下加熱，半小時(shí)即可顯色。（3）干擾離子：因在堿性下顯色，很多金屬離子都有干擾，可用EDTA等螯合劑來(lái)掩蔽。（4）測(cè)定范圍：0.05-0.5mg/L；（5）比色波長(zhǎng)：625nm。五、評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)：蘭色穩(wěn)