人血白蛋白低溫乙醇法制造及檢定規(guī)程

人血白蛋白低溫乙醇法制造及檢定規(guī)程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿或血清經(jīng)低溫乙醇法分離提取，經(jīng)60℃10小時加溫滅活病毒后制成。白蛋白含量96%以上，含適宜穩(wěn)定劑，不含防腐劑和抗生素，專供靜脈輸注。主要用于治療創(chuàng)傷性、HYPERLINK\o"書籍相關(guān)：出血"出血性休克、嚴重?zé)齻约暗偷鞍籽Y等。1制造1.1制造要求1.1.1新鮮分離的液體血漿、過期血分離的血漿、半成品、成品檢定剩余血漿、輕度溶血或脂肪血漿、去除其他血漿蛋白的組分，均可用于制備。所用之血漿或血清的來源應(yīng)符合《原料血漿采集（單采血漿術(shù)）規(guī)程》。1.1.2血漿或血清應(yīng)盡可能保持無菌，否則應(yīng)及時投料制造或低溫冰凍保存。低溫冰凍保存血漿量長保存期不應(yīng)超過2年。1.1.3制造工作室應(yīng)符合工藝流程。冷庫及各種生產(chǎn)用具必須專用，嚴禁與其他異種蛋白質(zhì)混用。制造工作室的建筑應(yīng)便于清潔、消毒、防霉。在制造過程中為防止制品污染熱原質(zhì)，應(yīng)采取各種有效措施，如降低操作室溫度，注意無菌操作等。各種直接接觸制品的用具，用后應(yīng)立即洗凈，用前須經(jīng)除熱原質(zhì)或滅菌處理。1.1.4生產(chǎn)用水應(yīng)符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)，直接用于制品的水應(yīng)符合注射用水標(biāo)準(zhǔn)。所用各種化學(xué)藥品應(yīng)符合《中國生物制品主要原材料試行標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，未納入試行標(biāo)準(zhǔn)者應(yīng)不低于化學(xué)純。1.2制造工藝1.2.1采用低溫乙醇法。應(yīng)含適量的穩(wěn)定劑（每g蛋白質(zhì)用0.16mmol辛酸鈉或0.08mmol辛酸鈉和0.08mmol乙酰色氨酸鈉）。1.2.2熱處理每批制品必須經(jīng)60±0.5℃加溫10小時處理。熱處理可在除菌過濾前或分裝后24小時內(nèi)進行。1.2.3分批同一制造工藝、同一容器混合的制品作為一批。不同濾器除菌過濾或不同機柜凍干的制品應(yīng)分為亞批。1.2.4半成品檢定液體制劑于除菌過濾后應(yīng)做理化檢查（殘余乙醇含量≤0.03%）及熱原質(zhì)試驗，并應(yīng)按亞批抽樣做無菌試驗。直接分裝時應(yīng)留樣做上述試驗。1.2.5凍干除菌過濾后制品應(yīng)及時分裝、旋凍、凍干。制品的凍干工藝可根據(jù)機器性能特點制定，但應(yīng)保證制品制備質(zhì)量及保存質(zhì)量符合要求。在凍干的全過程中，制品溫度最高不得超過50℃。凍干的全過程必須在嚴格無菌條件下進行。1.3劑型與規(guī)格1.3.1劑型分為液體及凍干兩種。1.3.2規(guī)格按蛋白質(zhì)濃度分為5%、10%、20%或25%四種。每瓶（支）蛋白質(zhì)裝量為2g、5g及10g。凍干制劑每瓶蛋白質(zhì)裝量為5g及10g。1.4制品重濾和再制1.4.1無菌試驗不合格，無肉眼可見混濁或沉淀，可立即再除菌過濾一次。1.4.2理化檢查或熱原質(zhì)試驗不符合規(guī)程要求的制品，允許用適當(dāng)方法加工再制一次。1.4.3經(jīng)過重濾或再制的制品均應(yīng)重新進行檢定。根據(jù)不同的再制方法，可增加必要的質(zhì)量檢查項目。1.4.4再制品的效期應(yīng)按混合的各批中最早一批制品的效期計算。1.5液體制劑分裝后，應(yīng)放置20～35℃至少14天后逐瓶檢查，應(yīng)符合外觀規(guī)定。2成品檢定2.1抽樣每批成品應(yīng)抽樣作全面質(zhì)量檢定。不同機柜凍干制品應(yīng)分別抽樣作無菌試驗及水分測定。2.2物理檢查2.2.1外觀凍干制劑應(yīng)為白色或灰白色疏松體，無融化跡象。液體制劑和凍干制劑重溶后應(yīng)為略粘稠、黃色或綠色至棕色澄明液體，不應(yīng)有異物、混濁和沉淀。2.2.2真空度凍干制劑以高頻火花真空測定器測試，瓶內(nèi)應(yīng)出現(xiàn)藍紫色輝光。2.2.3溶解時間凍干制劑溶解為10%蛋白質(zhì)濃度時，其溶解時間不得超過15分鐘。2.2.4熱穩(wěn)定性試驗（液體制劑）取檢品一瓶（支），放入57±0.5℃水浴保溫50小時后，與同批未保溫的另一瓶（支）檢品比較，除顏色有輕微變化外，應(yīng)無肉眼可見的變化。2.3化學(xué)檢定按《生物制品化學(xué)檢定規(guī)程》進行。2.3.1水分凍干制劑的水分含量應(yīng)≤1%（g/g）。2.3.2pH值用生理鹽水稀釋成1%蛋白質(zhì)濃度，在20±2℃測定，pH值應(yīng)為6.4～7.4。2.3.3蛋白質(zhì)含量及總量用鎢酸沉淀法測定，蛋白質(zhì)含量應(yīng)不低于標(biāo)示量的95%，每瓶蛋白質(zhì)總量應(yīng)不低于出品規(guī)格。2.3.4純度白蛋白含量應(yīng)不低于蛋白質(zhì)總量的96%。2.3.5鈉離子測定鈉離子含量應(yīng)≤160mmol/L。2.3.6鉀離子測定鉀離子含量應(yīng)≤2mmol/L。2.3.7吸收度測定1%蛋白質(zhì)溶液在1cm比色池403nm波長下測定吸收度，應(yīng)≤0.15。2.3.8多聚體含量多聚體含量應(yīng)≤5%。2.3.9辛酸鈉含量辛酸鈉含量應(yīng)≤0.18mmol/g蛋白質(zhì)。2.4鑒別試驗免疫雙擴散法。僅與抗人的血清產(chǎn)生沉淀線，與抗馬、抗牛血清不產(chǎn)生沉淀線。2.5無菌試驗按《生物制品無菌試驗規(guī)程》進行。2.6安全試驗2.6.1豚鼠試驗用體重300～400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品5ml，注射后半小時內(nèi)動物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，觀察7天，動物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.6.2小白鼠試驗用體重18～20g小白鼠5只，每只腹腔注射檢品0.5ml，半小時內(nèi)動物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，繼續(xù)觀察7天，動物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.