基礎(chǔ)科學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)概述

基礎(chǔ)科學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)概述第1頁(yè)/共23頁(yè)優(yōu)點(diǎn)

2.可控制：

可控制-選擇對(duì)象：均一性、重復(fù)性

哪一種：類(lèi)型：上皮？間質(zhì)？--

性質(zhì)：正常？腫瘤？--

階段：

可控制-調(diào)節(jié)條件：各種因素

物理、化學(xué)、生物等因素

第2頁(yè)/共23頁(yè)優(yōu)點(diǎn)2.可控制：

可控制-利用方法：

采用各種研究技術(shù)、記錄方法：

研究：倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、

電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦

顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、

同位素標(biāo)記--

記錄：攝影照片、縮時(shí)電影、電視--第3頁(yè)/共23頁(yè)優(yōu)點(diǎn)

3.應(yīng)用廣：

學(xué)科多：

對(duì)象廣：

各種動(dòng)物：低等動(dòng)物--高等動(dòng)物--人類(lèi)

一種動(dòng)物：不同年齡--

不同組織--

正常或異常（腫瘤--）

第4頁(yè)/共23頁(yè)優(yōu)點(diǎn)4.較經(jīng)濟(jì)：

可提供大量、同時(shí)、重復(fù)性好的、

生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象第5頁(yè)/共23頁(yè)細(xì)胞培養(yǎng)的缺點(diǎn)

現(xiàn)人工模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)已經(jīng)很高,

但,人工所模擬的條件與體內(nèi)實(shí)際情況

仍不完全相同.

當(dāng)細(xì)胞被置于體外培養(yǎng)后,

生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡的環(huán)境中,

久了，必然發(fā)生變化.第6頁(yè)/共23頁(yè)1.與體內(nèi)主要不同

相對(duì)孤立、相對(duì)單一

缺乏體內(nèi)的系統(tǒng)作用、

失去神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)

和細(xì)胞相互間的影響

第7頁(yè)/共23頁(yè)缺點(diǎn)

2.主要表現(xiàn)

失去原有組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)

分化減弱或不顯

細(xì)胞趨向單一化；

3.提示

要正確認(rèn)識(shí)體外培養(yǎng)細(xì)胞

是一種特定條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞群體。

應(yīng)用

第8頁(yè)/共23頁(yè)生長(zhǎng)類(lèi)型第9頁(yè)/共23頁(yè)體外細(xì)胞培養(yǎng)物的生長(zhǎng)類(lèi)型

按生長(zhǎng)方式:2型

粘附型細(xì)胞:附著在某一固相支持物表面才

能生長(zhǎng)的細(xì)胞。

懸浮型細(xì)胞:不必附著于固相支持物表面，而

在懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)的細(xì)胞。

絕大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞屬粘附型細(xì)胞，

只有少數(shù)細(xì)胞類(lèi)型，如某些腫瘤細(xì)胞和白細(xì)胞

可在懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)第10頁(yè)/共23頁(yè)貼附(粘附)型細(xì)胞

粘附:是大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)

生存和生長(zhǎng)發(fā)育的基本存在方式含義兩方面結(jié)果基于粘附特性，使細(xì)胞與細(xì)胞之間相互結(jié)合形成組織，

有機(jī)體的絕大多數(shù)細(xì)胞必須

粘附于一固相表面

才能生存和生長(zhǎng)。

第11頁(yè)/共23頁(yè)培養(yǎng)時(shí)：細(xì)胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要粘附于某一固相表面才能生存和生長(zhǎng)，因而

屬于粘附型細(xì)胞。粘附(錨定或錨著)依賴型(性)細(xì)胞：

唯有粘附于固相表面才能生存的細(xì)胞第12頁(yè)/共23頁(yè)

類(lèi)型

細(xì)胞在體內(nèi)、外的粘附方式：存在差異

體內(nèi)：粘附是全方位

外形具有復(fù)雜的立體特征

體外：多數(shù)情況，細(xì)胞只有一個(gè)附著平面

外形一般與體內(nèi)時(shí)明顯不同

按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可分為幾大類(lèi)型

第13頁(yè)/共23頁(yè)分類(lèi)

根據(jù)形態(tài)大致的不同，主要2類(lèi)：

上皮樣成纖維細(xì)胞樣

其它，不定型第14頁(yè)/共23頁(yè)上皮樣細(xì)胞型

名稱：僅形態(tài)上似體內(nèi)，實(shí)際上不完全等于--來(lái)源：來(lái)源于外胚層，內(nèi)胚層細(xì)胞

如：皮膚及其衍生物消化道，乳腺，肺泡上皮性腫瘤形態(tài)：類(lèi)似體內(nèi)的上皮細(xì)胞

扁平，不規(guī)則多角形，中有圓形核

第15頁(yè)/共23頁(yè)生長(zhǎng)特點(diǎn)

易相連成片

相靠—緊密相連—成薄層—

鋪石狀

生長(zhǎng)時(shí)呈膜狀移動(dòng)

很少脫離細(xì)胞群而單個(gè)活動(dòng)

第16頁(yè)/共23頁(yè)成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞

名稱：凡在培養(yǎng)中形態(tài)與成纖維細(xì)胞類(lèi)似的來(lái)源：由中胚層間充質(zhì)組織起源的組織

如：真正的成纖維細(xì)胞心肌，平滑肌，成骨細(xì)胞，血管內(nèi)皮形態(tài)：似體內(nèi)成纖維細(xì)胞的形態(tài)

胞體梭形或不規(guī)則三角形

胞質(zhì)向外伸出2—3個(gè)長(zhǎng)短不等的突起

中有卵圓形核第17頁(yè)/共23頁(yè)生長(zhǎng)特點(diǎn)

排列成放射狀，漩渦狀

并不緊靠連成片，

細(xì)胞—細(xì)胞接觸易斷開(kāi)而

單獨(dú)行動(dòng)

游離的單獨(dú)的成纖維樣細(xì)胞，

常有幾個(gè)伸長(zhǎng)的細(xì)胞突起

第18頁(yè)/共23頁(yè)貼附生長(zhǎng)型--類(lèi)型1.與體內(nèi)同名的細(xì)胞不完全相同

如：形態(tài)相似的成纖維細(xì)胞，可不同來(lái)源

自同一動(dòng)物不同組織的成纖維樣細(xì)胞相似但

發(fā)展趨向不同2.培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)不穩(wěn)定

條件改變，細(xì)胞形態(tài)可有變化第19頁(yè)/共23頁(yè)培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)不穩(wěn)定

血清

Hela高血清低血清

成纖維細(xì)胞樣上皮樣細(xì)胞

pH

Hela太酸或太堿標(biāo)準(zhǔn)pH

成纖維細(xì)胞樣上皮樣細(xì)胞

細(xì)胞密度

3T3低密度高密度

成纖維細(xì)胞樣上皮樣細(xì)胞

生長(zhǎng)狀態(tài)改變

懸浮或貼附

懸浮貼附

圓形成纖維或上皮樣

轉(zhuǎn)化與否

未轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化后

成纖維樣可成上皮樣第20頁(yè)/共23頁(yè)懸浮生長(zhǎng)型

概念

培養(yǎng)時(shí)不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)

或以機(jī)械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)來(lái)源

自血，脾或骨髓，尤以血中白細(xì)胞

癌腫細(xì)胞也可能特點(diǎn)

在懸浮中生長(zhǎng)良好細(xì)胞圓形，單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán)第21頁(yè)/共23頁(yè)優(yōu)點(diǎn)

生存空間大，提供數(shù)量大傳代方便(不需消化)

易于收獲可獲得穩(wěn)定狀態(tài)缺點(diǎn)