體外受精和早期胚胎培養(yǎng)課件

3.2體內(nèi)受精和早期胚胎培養(yǎng)試管動(dòng)物技術(shù)

是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。一、體外受精哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精包括幾個(gè)過程？精子和卵子的發(fā)生、受精哺乳動(dòng)物的體外受精包括幾個(gè)過程？哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等幾個(gè)主要步驟。（一）卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)不同動(dòng)物,采取卵母細(xì)胞的方法不同2.培養(yǎng)（1）從輸卵管中沖取的卵子，不需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)，可直接與獲能的精子在體外受精。（2）從卵巢中獲取的卵母細(xì)胞，需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精。（二）精子的采集和獲能1.采集方法：（1）假陰道法：滿足雄性動(dòng)物交配時(shí)對(duì)壓力、溫度和濕潤(rùn)度的要求；配有與采精動(dòng)物相適應(yīng)的活臺(tái)畜或假臺(tái)畜；采用假陰道收集精液。用于大型動(dòng)物，采用仿生學(xué)，模擬發(fā)情雌性動(dòng)物陰道環(huán)境設(shè)計(jì)（2）手握法：徒手或戴乳膠手套，直接把握雄性動(dòng)物的陰莖。適用于豬和犬等體型較小，易于控制的家畜。（3）電刺激法：電極直接刺激位于腰薦部的射精中樞神經(jīng)，引起射精。適用于野生或經(jīng)濟(jì)動(dòng)物。2.獲能處理:（1）培養(yǎng)法：放入人工配制的獲能液如：嚙齒動(dòng)物、家兔和豬（2）化學(xué)法：一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)。如：牛、羊（三）受精在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程二、胚胎的早期培養(yǎng)1.培養(yǎng)液成分：“兩鹽、兩酸、兩素”+水、血清2.目的：（1）檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。（2）使胚胎發(fā)育到適宜的階段進(jìn)行受體移植或冷凍保存。3.移植時(shí)間：不同動(dòng)物胚胎移植時(shí)間不同:一般在桑椹胚和囊胚階段。胚胎不同發(fā)育時(shí)期生理代謝的要求不同，進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng)時(shí)，必須配制一系列含有不同成分的培養(yǎng)液，用以培養(yǎng)不同發(fā)育時(shí)期的胚胎。采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛